مورين الكولين تعاني من نقص، تستكمل اثيونيني (الرفيق) النظام الغذائي النموذجي لإصابة الكبد المزمنة

ملخص

هنا يصف لنا طريقة شائعة للحث على إصابة الكبد المزمنة في الفئران عن طريق تغذية غذائي (الرفيق) تفتقر إلى مادة الكولين وتستكمل اثيونيني. ندلل على رصد الصحة، نضح الكبد، والعزلة، والحفاظ على. يمكن إطلاع مرة دورة لمدة ستة أسابيع في إصابة الكبد، باثوهيستولوجي، والتليف، والالتهابات، واستجابات الخلايا السلف الكبد.

الملخص

أمراض الكبد المزمنة، مثل التهاب الكبد الفيروسي، وأمراض الكبد الكحولية، أو مرض الكبد الدهني غير الكحولية، وتتميز بالتهاب مستمر والتدمير التدريجي والتجديد للخلية السلف لحمه الكبد، الكبد الانتشار، والتليف. المرحلة النهائية لكل أمراض الكبد المزمنة هو تليف الكبد، عامل خطر رئيسي لتنمية سرطانه الخلية الكبدية. دراسة العمليات التي تنظم بدء المرض، وإنشاء، وتقدم، تستخدم العديد من النماذج الحيوانية في المختبرات. هنا يصف لنا دورة وقت ستة أسابيع من طراز الماوس (الرفيق) تفتقر إلى مادة الكولين وتستكمل اثيونيني الذي ينطوي على تغذية القديم الأسبوع-ستة ذكور الفئران C57BL/6J مع نقص الكولين تشاو 0.15% DL--اثيونيني--استكملت مياه الشرب و. وأوضح رصد صحة الحيوان ومنحني فقدان وزن جسم نموذجية. البروتوكول يوضح إجمالي دراسة مجموعة الكبد والدم تعامل الرفيق بثقب القلب لتحليلات المصل اللاحقة. المقبل، هي تقنية التروية الكبد وجمع الفصوص الكبدية المختلفة فيما يتعلق بالتقييمات القياسية الأنسجة الكبد أظهرت، بما في ذلك التقييمات التي توضع وويوزين أو ستينينجس "الأحمر سيريوس"، الكشف عن إيمونوفلوريسسينت من السكان الخلية الكبدية كذلك الترنسكربيتوم التنميط من المكروية الكبد. هذا الطراز الماوس مناسبة لدراسة الالتهابات والتليف وخلية الكبد السلف الديناميات التي يتسبب فيها عن طريق أمراض الكبد المزمنة، ويمكن استخدامها لاختبار العوامل العلاجية المحتملة التي قد تعدل هذه العمليات.

المقدمة

الكبد هو أكبر جهاز غدي الأيضية للجسم والعديد من الوظائف المعقدة. وتشمل الأدوار الرئيسية للكبد الهضم، الأيض، إزالة السموم، وتخزين المواد الغذائية الأساسية، إنتاج مكونات بروتين بلازما الدم، والحصانة بوساطة من خلال الضامة المقيم أو خلايا كوبفر. الكبد له قدرة كبيرة على تجديد حتى لو كان ما يصل إلى 70-90 في المائة كتلتها الإجمالية المفقودة. في حالة إصابة الكبد الحاد، مثل كما رأينا عقب ظهرت جزئية أو التسمم أسيتامينوفين، تتكاثر خلايا الكبد السليمة المتبقية لإصلاح الضرر الذي لحق ب درجة عالية من تنسيق عملية¹. ومع ذلك، عندما مزمن يصابون خلايا الكبد سبب العدوى الفيروسية طويلة الأجل، الكحولية أو غير الكحولية مرض الكبد الدهني، المكروية التحريضية تنتج تفعيل ا....

البروتوكول

1. "التجريب الحيوان"

جميع الدراسات الحيوانية الموصوفة في هذا التحقيق كانت أقرته "لجنة أخلاقيات الحيوان جامعة كورتين" (رقم الاعتماد: AEC_2014_28) قبل بدء والتجارب وتنفيذها وفقا للقانون الأسترالي لرعاية واستخدام الحيوانات.

1. الحيوانات
   1. استخدام القديم الأسبوع-ستة ذكور الفئران C57BL/6J للتجارب-
2. التصميم التجريبي
   1. عقب وصوله إلى "مرفق الحيوان"، السماح للفئران التأقلم لمدة أربعة أيام قبل البدء في أي تجارب.
   2. بيت الفئران في الفراش قش قمح، التي استنفدت الحبوب مرئية وسيقان وإبقاء الفئران على مدار 12 ساعة اليوم/ليلة دورات في منفردة التهوية الأقفاص. تغيير الفراش في أ....

النتائج

طوال الوقت ستة أسابيع للإصابة الكبد المزمنة الناجمة عن الرفيق، تم تقييم المعلمات في أيام 7 (المرحلة التعريفي) و 14 و 21 (مرحلة الإنشاء) و 42 (مرحلة الصيانة). مقارنة لمكافحة الفئران، الفئران المعالجة بالرفيق فقد تصل إلى 20% وزن الجسم الأولية في مرحلة تكيف أولية وتميل إلى استعادة الوزن في مراحل إنشاء وصيانة (الشكل 1). وزن الجسم كان ارتباطاً عكسيا مع مستويات المصل transaminase ألانين، مؤشرا لإصابة كبدية (الشكل 2

المناقشة

أمراض الكبد المزمنة غالباً مرض صامت مع معظم المرضى بأعراض، واحد المساهمين الرئيسيين في المراضة والوفيات في جميع أنحاء العالم. إدمان الكحول المزمن والعدوى بفيروس التهاب الكبد الوبائي هي الأسباب الرئيسية. تتميز الإصابة الكبد المزمنة بالتهاب الكبد، تليف وتليف الكبد في الحالات الشديدة وسرطان وفشل الكبد في نهاية المطاف. لا تتوفر حاليا لا علاج وعلى الرغم من أن تقدما كبيرا قد بذلت لفهم آليات مرض الكبد، السبل العلاجية الجديدة لا تزال مطلوبة على وجه الاستعجال.

النظام الغذائي الرفيق نموذج بسيط، اعتبارا .......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
ذكور C57BL / 6J يبلغ من العمر ستة أسابيع	مركز الموارد الحيوانية في غرب أستراليا ، مردوخ ، واشنطن ، & nbsp ؛ أستراليا	N / A
10 كجم قشر قمح مقطوع بالبخار	الأعلاف المتخصصة ، غلين فورست ، واشنطن ، أستراليا   ؛	N / A
مياه للري زجاجة 1000 مل (باكستر)   ؛	بيت الجراحة، بيرث، واشنطن، أستراليا	AHF7114A
الكولين- نقص النظام الغذائي, معدل (الكريات)	MP Biomedicals Australasia Pty Limited ، واشنطن ، أستراليا 02960210
DL-Ethionine  ؛	سيجما ألدريتش ، كاسل هيل ، نيو ساوث ويلز ،   ؛ أستراليا	E5139-25G
حقن الكيتاميل	Troy Laboratories Pty Limited, Glendenning, NSW, Australia	N / A
Ilum Xylazil-20 حقن	Troy Laboratories Pty Limited, Glendenning, NSW, Australia	N / A
27G × 1/2 "، إبرة حائط عادية   ؛	Terumo Australia Pty Limited, NSW, Australia	محاقن NN-2713R
Terumo 1 مل و 10 مل   ؛	Terumo Australia Pty Limited, Macquarie Park, NSW, Australia	1018242, 1018037
مركب Tissue-Tek OCT	VWR International Pty Limited, Tingalpa, QLD, Australia	25608-930
الفورمالين المخزن المحايد	Amber Scientific ، Midvale ، واشنطن ، أستراليا   ؛	NBF-2.5L
الإيثانول المطلق anaLaR normalpur	VWR International Pty Limited, Tingalpa, QLD, Australia	20821.33
شرائح Superfrost Plus	Grale Scientific Pty Limited, Ringwood, VIC, Australia	SF41296SP
داكو بروتين بلوك ، خالي من السيروم   ؛	Dako Australia Pty Limited, North Sydney, NSW, Australia	X090930-2
مخفف الأجسام المضادة داكو	Dako Australia Pty Limited, North Sydney, NSW, Australia	s0809
الفئران المضادة ل CD45   ؛	eBioscience, سان دييغو, كاليفورنيا, الولايات المتحدة الأمريكية	m0701	1/200 تخفيف
أرنب مضاد للبانك	Dako Australia Pty Limited, North Sydney, NSW, Australia	Z0622	1/300 تخفيف
الماعز المضاد للأرانب (Alexa Fluor 488)	Life Technologies Australia Pty Limited, Mulgrave, VIC, Australia	A-11008	1/500 تخفيف
الماعز المضاد للفئران IgG (Alexa Fluor 594)	Life Technologies Australia Pty Limited, Mulgrave, VIC, Australia	A-11007	1/500 التخفيف
ProLong الذهب الكاشف المضاد للبهتان مع DAPI   ؛	Life Technologies Australia Pty Limited, Mulgrave, VIC, Australia	P36935
Picrosirius Red Stain Kit	Polysciences Inc. ، Warrington ، PA ، الولايات المتحدة الأمريكية   ؛	ab150681 & emsp;