Le murin déficients en Choline, additionné d’éthionine (CDE) alimentation modèle d’atteinte hépatique chronique

Jully Gogoi-Tiwari; Julia Köhn-Gaone; Corey Giles; Dirk Schmidt-Arras; Francis D. Gratte; Caryn L. Elsegood; Geoffrey W. McCaughan; Grant A. Ramm; John K. Olynyk; Janina E.E. Tirnitz-Parker

doi:10.3791/56138

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Article de méthode

Le murin déficients en Choline, additionné d’éthionine (CDE) alimentation modèle d’atteinte hépatique chronique

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DOI :

10.3791/56138

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21 octobre 2017

Jully Gogoi-Tiwari¹ , Julia Köhn-Gaone¹ , Corey Giles² , Dirk Schmidt-Arras³ , Francis D. Gratte¹^,⁴ , Caryn L. Elsegood¹ , Geoffrey W. McCaughan⁵^,⁶^,⁷ , Grant A. Ramm⁸^,⁹ , John K. Olynyk¹⁰^,¹¹ , Janina E.E. Tirnitz-Parker¹^,¹²

¹School of Biomedical Sciences & Curtin Health Innovation Research Institute, Curtin University, ²School of Public Health & Curtin Health Innovation Research Institute, Curtin University, ³Institute of Biochemistry, Christian-Albrechts-University, ⁴School of Veterinary and Life Sciences, Murdoch University, ⁵Centenary Institute of Cancer Medicine and Cell Biology, The University of Sydney, ⁶Royal Prince Alfred Hospital, ⁷A.W. Morrow Gastroenterology and Liver Centre, ⁸QIMR Berghofer Medical Research Institute, ⁹Faculty of Medicine and Biomedical Sciences, The University of Queensland, ¹⁰Fiona Stanley and Fremantle Hospitals, ¹¹School of Medical and Health Sciences, Edith Cowan University, ¹²School of Medicine and Pharmacology, University of Western Australia

Dans cet article

Résumé

Nous décrivons ici une méthode commune pour induire des lésions chroniques du foie chez les souris en se nourrissant d’un régime alimentaire (CDE) déficients en choline et additionné d’éthionine. Nous démontrons la surveillance de la santé, perfusion hépatique, d’isolement et de préservation. Une durée de six semaines peut informer d’atteinte hépatique, pathohistology, fibrose, inflammation et les réponses des cellules progénitrices du foie.

Résumé

Maladies chroniques du foie, comme l’hépatite virale, maladie alcoolique du foie ou stéatose hépatique non alcoolique, sont caractérisent par l’inflammation continuelle, une destruction progressive et la régénération des cellules du parenchyme hépatique, foie prolifération et la fibrose. La phase terminale de chaque maladie chronique du foie est la cirrhose, un facteur de risque majeur pour le développement du carcinome hépatocellulaire. Afin d’étudier les processus régissant la progression, l’établissement et initiation de la maladie, plusieurs modèles animaux sont utilisés dans les laboratoires. Nous décrivons ici un cours de six semaines de temps du déficients en choline et additionné d’éthionine (CDE) souris modèle, qui consiste à nourrir six - semaine vieilles souris C57BL/6J mâles avec déficients en choline chow et 0,15 % DL-éthionine-complété en eau potable. Surveillance de la santé animale et une courbe de perte de poids de corps typiques sont expliqués. Le protocole montre l’examen brut d’une collection de traités CDE foie et le sang par ponction cardiaque pour des analyses ultérieures de sérum. Ensuite, la technique de perfusion hépatique et la perception des différents lobes hépatiques pour évaluations standards sont les quotes-parts indiquées, y compris l’histologie du foie par l’hématoxyline et éosine ou Sirius rouge salissures, détection par immunofluorescence des populations de cellules hépatiques ainsi que du transcriptome de profilage du microenvironnement du foie. Ce modèle de souris convient pour étudiant inflammatoires, fibrogène et cellules hépatiques dynamique induite par une maladie hépatique chronique et peut être utilisée pour tester les agents thérapeutiques potentiels qui peuvent moduler ces processus.

Introduction

Le foie est le plus grand organe glandulaire métabolique du corps et a de nombreuses fonctions complexes. Les rôles principaux pour le foie comprennent la digestion, métabolisme, détoxification, stockage d’éléments nutritifs essentiels, la production de composants de protéine de plasma sanguin et immunité médiée par des macrophages résidents ou des cellules de Kupffer. Le foie a une grande capacité à se régénérer même si jusqu'à 70-90 % de sa masse totale est perdue. En cas d’atteinte hépatique aiguë, comme vu après une hépatectomie partielle ou acetaminophen l’empoisonnement, les hépatocytes sains restants se multiplient pour réparer les dégâts dans un processus haut....