Summary

طريقة مريحة لاستخراج وتحليل مع اللوني السائل عالي الضغط الكاتيكولامينات العصبية وعلى نواتج الأيض

Published: March 01, 2018
doi:

Summary

ونقدم استخراج المرحلة الصلبة مريحة بالإضافة إلى الضغط العالي اللوني السائل ([هبلك]) مع كشف الكهروكيميائية (النماء) للتصميم المتزامن لثلاثة مونوأمين العصبية واثنين من بهم المستقلبات في البول الرضع. ونحن أيضا تحديد المستقلب مهبج كالعلامات البيولوجية محتملة للتشخيص المبكر لتلف الدماغ للأطفال الرضع.

Abstract

استخراج وتحليل الكاتيكولامينات العصبية في السوائل البيولوجية لها أهمية كبيرة في تقييم وظيفة الجهاز العصبي والأمراض ذات الصلة، ولكن القياس الدقيق لا يزال يمثل تحديا. وقد وصف العديد من البروتوكولات للقياس العصبي مجموعة متنوعة من الصكوك، بما في ذلك الفصل اللوني للسوائل ذات الضغط العالي ([هبلك]). ومع ذلك، هناك أوجه قصور، مثل عملية معقدة أو صعبة للكشف عن الأهداف المتعددة، التي لا يمكن تجنبها، وفي الوقت الحاضر، لا يزال أسلوب التحليل المهيمنة [هبلك] يقترن حساسة الكهروكيميائية أو الكشف عن فلوريميتريك، ونظرا حساسية عالية والانتقائية الجيدة. هنا، يرد وصف بروتوكول مفصل للمعالجة والكشف عن الكاتيشولامين مع ارتفاع الضغط اللوني السائل مع كشف الكهروكيميائية ([هبلك]-النماء) في عينات البول الحقيقية للرضع، استخدام النانو اليكتروسبون مركب مؤلفة البوليمرية التاج خماسي البروم ثنائي الفينيل مع البوليستيرين الإدمصاص، المعروف أيضا كأسلوب وجبات والألياف الصلبة مرحلة الاستخراج (بفسبي). ونحن تبين كيف البول عينات يمكن أن بريكلينيد بسهولة بعمود معبأة nanofiber مرحلة صلبة، وكيف يمكن تحليلها في العينة إثراء سريعاً، ديسوربيد، والكشف على نظام لتنمية الطفولة المبكرة. بفسبي يبسط إلى حد كبير إجراءات المعالجة المسبقة للعينات البيولوجية، مما يسمح لتقليل الوقت والنفقات والحد من الخسائر في الأهداف.

وعموما، هذا العمل يوضح بروتوكول بسيطة ومريحة لاستخراج المرحلة الصلبة بالإضافة إلى نظام [هبلك]-نماء للتصميم المتزامن من العصبية مونوأمين الثلاثة (إفراز (شمال شرق)، أدرينالين (ﻫ)، الدوبامين (DA)) واثنين من الأيض (3-ميثوكس-4-هيدروكسيفينيلجليكول (مهبج) و 3 و 4-ديهيدروكسي-فينيل الخل حمض (دوباك)) في البول الرضع. تم تطبيق البروتوكول المتبعة لتقييم اختلافات الكاتيشولامين البولية وعلى نواتج الأيض بين الرضع شديدة الخطورة مع تلف الدماغ قبل الولادة وضوابط صحية. وكشف تحليل مقارن فرقا كبيرا في مهبج البولية بين المجموعتين، مشيراً إلى أن نواتج الأيض الكاتيكولامينات قد تكون علامة مرشح مهم للتشخيص المبكر للحالات المعرضة للخطر لتلف في المخ عند الرضع.

Introduction

الكاتيكولامينات العصبية ومحتوياتها المستقلب في سوائل الجسم يمكن أن تؤثر على الوظيفة العصبية وتؤثر على التوازن بين الدول استجابة لحافز إلى حد كبير1. أبنورميتيس قد يسبب مجموعة متنوعة من الأمراض، مثل فيوتشروماسيتوما، جانجليونيوروما، نيوروبلاستوما، واضطرابات الجهاز العصبي1،2. استخراج وتحديد الكاتيشولامين في سوائل الجسم ذو معنى لتشخيص الأمراض ذات الصلة. ومع ذلك، الكاتيشولامين في عينات بيولوجية موجودة بتركيزات منخفضة وتتأكسد بسهولة. وعلاوة على ذلك، يصعب جداً الوت بسبب كمية كبيرة من التدخل في المتوسط3. وهكذا، الكشف عن واحد من الكاتيشولامين في السوائل البيولوجية لا يزال يمثل تحديا.

وهناك ملاحظات تبين أن البولي الكاتيشولامين يمكن أن تكون مقياسا للإجهاد، وأن المستويات علامات بيولوجية هامة الاستجابة للتحفيز عن طريق اللمس من المعالجة في الأطفال حديثي الولادة5. وفقا للبحوث، في خطر للدماغ إصابة4،،من56جميع الرضع الذين عانوا من حوادث سابقة لأوانها، والإصابة قد يؤدي إلى إطلاق غير طبيعي الكاتيشولامين والمسائل ذات الصلة في السوائل. وتوجد تقنيات الرنين المغناطيسي المتقدمة التي يمكن الكشف عن تلف في المخ في مراحل سابقة7،8. ومع ذلك، ضمن ح 48 الأولى، عملية النماء العصبي الشاذ سوف يسبب إصابة في الدماغ الدائمة التي لن تكون واضحة في الصور الطبية11. وإلى جانب ذلك، أداة عالية التكلفة وندرة الموارد، جنبا إلى جنب مع عوامل أخرى، يجعل من المستحيل على جميع وحدات الأطفال حديثي الولادة في الحصول على هذه التقنيات العصبية-التصوير المتخصصة. ومع ذلك، استخدام العلامات البيولوجية بسهولة ودود والعملية (مثل الكاتيشولامين وعلى نواتج الأيض) يمكن التغلب على أوجه القصور هذه، وفحص العلامات البيولوجية في السوائل البشرية قد تساعد في التشخيص المبكر لإصابة في الدماغ ويؤدي إلى موجه تعريف مولودا جديداً تحتاج إلى نيوروبروتيكشن9. ويمكن الكاتيشولامين في البول مؤشر سهل وواضح، بسبب الارتباط المباشر بين المبلغ منها صدر في السوائل والدالة نيورواكتيفيتي.

بين السوائل البيولوجية، عينات البلازما والسائل الدماغي النخاعي (CSF) ليست سهلة للحصول على عن طريق الإجراءات المؤلمة القائمة، ومن الصعب جداً أيضا للتخلص من التدخل بسبب البروتين لاصقة وغيرها من الشوائب، مما يؤدي إلى مزعجة و وكرر عملية أخذ العينات مضيعة للوقت الذي للكشف. أيضا، للأطفال، من المستحيل تقريبا الحصول على العينات بطريقة مؤلمة. ولذلك، أخذ العينات البولية أفضل من الأشكال الأخرى لأخذ العينات، كما غير الغازية، وسهل التشغيل، ويمكن القيام به مرارا وتكرارا. عينات البول وفيرة وسهلة لتخزين، وإظهار مزايا كبيرة على أشكال أخرى من العينات البيولوجية.

وتشمل الأساليب الرئيسية لقياس الكاتيشولامين في السوائل البيولوجية فحوصات راديونزيميك10وفحوصات مسيل المناعي المرتبط بالانزيم11، فولتاميتري12 والعدسة الحرارية قياس الطيف الكتلي13. ولكن أوجه القصور الموجودة، مثل عمليات معقدة وصعبة للكشف عن أهداف متعددة. اليوم، هو أسلوب التحليل المهيمنة كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء ([هبلك])14، مقترنة بحساسية الكهروكيميائية15 أو فلوريميتريك الكشف عن16، بسبب حساسية عالية والانتقائية الجيدة. مع تكنولوجيا الكتلي جنبا إلى جنب، مثل كروماتوغرافيا سائلة/الطيف الكتلي (LC/MS) والسائل اللوني/قياس الطيف الكتلي/وسائل قياس الطيف الكتلي (LC/MS/MS) والتحليل الكمي للعصبية يمكن تحقيق عالية الدقة والتحديد17،18. ومع ذلك، يتطلب الأسلوب MS أجهزة مكلفة، فضلا عن القوى العاملة المؤهلة إلى حد كبير، مما يجعل من الصعب على تطبيقها عالمياً في المختبرات الأكثر تقليدية الأسلوب. نظم [هبلك]-النماء مجهزة عادة في المختبرات السريرية والأكثر تقليدية، وهكذا أصبحت خياراً جيدا والمشتركة لمجموعات بحثية لاستخدامها لتحديد المواد الكيميائية، ولكنها تتطلب العينة أدخلت في النظام أن تكون نظيفة ومن عبارة المجلد19. وهكذا، أنها ذات أهمية كبيرة لتنقية وتتكثف العينة قبل التحليل. هو الأسلوب الكلاسيكي لتنقية خطوة استخراج سائل14،،من1520 واستخراج المرحلة الصلبة دون اتصال، بما في ذلك أكسيد الألومنيوم المنشط العمود21،22 وديفينيلبوراتي (دببا) كومبليكسيشن23،24،،من2526.

لي مييونغو et al. تم استخدام الراتنج البوليمر كيميائيا تعديل مع التاج خماسي البروم ثنائي الفينيل الممتزة انتقائية استخراج الكاتيشولامين من البول البشري منذ 200727. أيضا، في عام 2006، أنه هايبو وآخرون. أظهر نهجاً توليف سهلة لاستخراج تقارب برنت بيوتيليزينج ماصة مركب استناداً إلى نانوماجنيتيك نانوماجنيتيك فونكتيوناليزابل سيلسيسكويوكساني أوليجوميريك بوليهيدرال (POSS)، وتطبيقه في إثراء الكاتيشولامين في البول البشري (نورادرينالين وادرينالين والايزوبرينالين)28. كما أخذوا الاستفادة من المواد النانوية إنجاز هذا العمل، باستخدام تقنية تسمى نانو-اليكتروسبينينج وتشكيل المواد الليفية البوليمر في النانو. يمكن ضبط عملية اليكتروسبينينج القطر ومورفولوجيا، والمحاذاة المكانية للمنتج بالتحكم في الجهد العامل وتغيير مضمون الحل الغزل جنبا إلى جنب مع معلمات أخرى29. وبالمقارنة مع خرطوشة الدائرة التقليدية، النانو اليكتروسبون مناسبة جداً لاستخراج وإثراء تحليلها المستهدفة من مصفوفة معقدة، كما أنها مجهزة بارتفاع سطح المنطقة إلى حجم نسب الجسميات تحليلها بكفاءة عالية، و يحمل أكثر تسيطر بسهولة السطحية الخصائص الكيميائية، السماح بالمرفقات مفيد من المركبات المستهدفة. هذه الخصائص تجعل منها خيارات جيدة لجمعية مهندسي البترول الممتزات، يقلل إلى حد كبير في المرحلة الصلبة والامتزاز كمية المذيب30،31،،من3233. الكاتيشولامين في عينات البول، استخدمت النانو اليكتروسبون تتألف من الاثير التاج أبوليميريك مع البوليستيرين (PCE-PS) لاستخراج ثلاثة (ني وه ودا) الكاتيشولامين34بشكل انتقائي. الصحيفة أشارت إلى أن الاثير التاج انتقائية تمتز أهداف ني وه دا، التي تستند إلى الهندسة الصحيحة لملزمة الكاتيشولامين عن طريق تشكيل السندات الهيدروجين. النتائج عرض الاثير التاج مادية فعالة، إزالة المركبات التدخل الأخرى الواردة في العينات البيولوجية. مستوحاة من هذا التقرير، طريقة جديدة وضعت لاستخراج انتقائية الكاتيشولامين باستخدام النانو اليكتروسبون مركب يتألف من PCE-س.

في هذه الورقة، الأسلوب الذي ذكرت سابقا34 قد تحسنت ويعمل ليس فقط لنجاح تحليل ه، ني، ودا، ولكن أيضا على والايضات، مهبج ودوباك، في البول. ونحن أيضا استكشاف إمكانيات جديدة لآلية عملية الامتزاز. يبين الطريقة مرضية كفاءة الاستخراج والانتقائية لتحليلها الخمسة، وتم التحقق من الأسلوب في تحليل البول من الرضع شديدة الخطورة مع تلف الدماغ قبل الولادة وضوابط صحية.

Protocol

تم الحصول على موافقة مستنيرة من الآباء والأمهات، وتم الحصول على موافقة مجلس المراجعة المؤسساتية للدراسة. وأجريت الدراسة وفقا لمدونة الأخلاقيات “الرابطة الطبية العالمية” (إعلان هلسنكي) للتجارب التي تنطوي على البشر. مقدمي الرعاية لجميع المشاركين في تقديم كتب موافقة ليجري الملتحقين بالدرا?…

Representative Results

هذا البروتوكول طريقة بسيطة ومريحة بفسبي بريتريات عينات البول وإثراء الكاتيشولامين الخمسة للكشف عن طريق نظام [هبلك]-نماء الطفولة المبكرة؛ ويرد رسم تخطيطي للعملية في الشكل 1. ويتضمن البروتوكول أساسا أربع خطوات-تفعيل، تحميل، الشطف، والتينج-مقترنة بكمية صغ?…

Discussion

الأسلوب بفسبي المقترحة في هذه الورقة قد تكون كبيرة وذات مغزى فيما يتعلق السرعة والبساطة والراحة. الممتزات المستخدمة في البروتوكول هي النانو اليكتروسبون، وارتفاع نسب مساحة للتخزين السطحي، والجسميات تحليلها بكفاءة عالية. الإجراء يحتاج ملليغرام عدد قليل من نانوفيبير وكمية صغيرة من المذيب…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

هذه الدراسة وأيده “الوطنية مؤسسة العلوم الصينية” (No.81172720، رقم 81673230)، الاجتماعية التنمية البحث البرنامج من جيانغسو مقاطعة إدارة العلوم والتكنولوجيا (رقم BE2016741)، العلوم والتكنولوجيا المشروع من الإدارة العامة الصينية للرقابة على الجودة والتفتيش والحجر الصحي (2015QK055)، برنامج فتح المشروع من المختبرات الرئيسية لتنمية الطفل، وتعلم العلوم في وزارة التربية والتعليم، جامعة جنوب شرق (كدلس-2016-04). ونعترف إخلاص سونغ يوان وليو بينغ الذي ساعدنا في جمع العينات.

Materials

200 µL pipette tip column to contain nanofibers
PCE-PS nanofibers material for PFSPE extraction
steel rod (about 0.5 mm diameter) fill the nanofibres into the column
gastight plastic syringe (5 ml) compress solution into the end of the tip
methanol Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 67-56-1
diphenylborinic acid 2-aminoethyl ester(DPBA) Sigma-Aldrich.Inc A-106408 complex reagent
norepinephrine(NE) Sigma-Aldrich.Inc A-9512 analyte
3-Methoxy-4-hydroxyphenylglycol(MHPG) Sigma-Aldrich.Inc H1377 analyte
epinephrine(E) Sigma-Aldrich.Inc 100154-200503 analyte
3, 4-Dihydroxyphenylacetic acid(DOPAC) Sigma-Aldrich.Inc D-9128 analyte
dopamine(DA) Sigma-Aldrich.Inc H-8502 analyte
3, 4-dihydroxybenzylamine hydrobromide(DHBA) Sigma-Aldrich.Inc 858781 interior label
acetonitrile Sigma-Aldrich.Inc 75-05-8 eluriant and mobile phase
phosphoric acid Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 7664-38-2 eluriant
uric acid Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 69-93-2 artifical urine
creatinine Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 60-27-5 artifical urine
trisodium citrate Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 6132-04-3 artifical urine
KCl Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 7447-40-7 artifical urine
NH4Cl Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 12125-02-9 artifical urine
NaHCO3 Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd SWC0140326 artifical urine
C2Na2O4 Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 62-76-0 artifical urine
NaSO4 Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 7757-82-6 artifical urine
disodium hydrogen phosphate Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 10039-32-4 artifical urine
urea Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 57-13-6 artifical urine
NaCl Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 7647-14-5 artifical urine
MgSO4.7H2O Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 10034-99-8 artifical urine
CaCl2 Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 10035-04-8 artifical urine
HCl Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 7647-01-0 artifical urine
citric acid Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 77-92-9 artifical urine and mobile phase
EDTA disodium salt Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 34124-14-6 mobile phase
monometallic sodium orthophosphate Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 7558-80-7 artifical urine and mobile phase
1-heptanesulfonic acid sodium salt Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 22767-50-6 mobile phase
sodium hydroxide Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd 1310-73-2 mobile phase
phenylboronic acid column(PBA column) Aglilent 12102018 PBA extraction
Inertsil® ODS-3 5 µm 4.6×150 mm column Dikma 5020-06731 HPLC column for seperation
SHIMADZU SIL-20AC prominence AUTO SAMPLER Shimadzu Corporation, Japan SIL-20AC auto injection for eluriant
SHIMADZU LC-20AD High Performance Liquid Chromatography Shimadzu Corporation, Japan LC-20AD HPLC pump
SHIMADZU L-ECD-60A electrochemical detector Shimadzu Corporation, Japan L-ECD-60A detector for the analytes
ASAP 2020 Accelerated Surface Area and Porosimetry System Micromeritics, USA surface and porosity analyzer 

References

  1. Elhwuegi, A. S. Central monoamines and their role in major depression. Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 28, 435-451 (2004).
  2. Da, C. F., Ngoabdalla, S., Houzel, J. C., Rehen, S. K. Murine model for Parkinsons disease: From 6-OH dopamine lesion to behavioral test. J. Vis. Exp. (35), e1376 (2010).
  3. Varley, H., Gowenlock, A. H. The clinical chemistry of monoamines. Brit. Med. J. 2, 1330 (1963).
  4. Wang, X., Rousset, C. I., Hagberg, H., Mallard, C. Lipopolysaccharide-induced inflammation and perinatal brain injury. Semin. Fetal. Neonatal. Med. 11, 343-353 (2006).
  5. Inder, T. E., Volpe, J. J. Mechanisms of perinatal brain injury. Semin. Neonatol. 5, 3-16 (2000).
  6. Miller, S. P., Ferriero, D. M. From selective vulnerability to connectivity: Insights from newborn brain imaging. Trends. Neurosci. 32, 496-505 (2009).
  7. Barkovich, A. J., et al. Proton MR spectroscopy for the evaluation of brain injury in asphyxiated, term neonates. Am. J. Neuroradiol. 20, 1399-1405 (1999).
  8. Liauw, L., van Wezel-Meijler, G., Veen, S., van Buchem, M. A., van der Grond, J. Do apparent diffusion coefficient measurements predict outcome in children with neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy?. Am. J. Neuroradiol. 30, 264-270 (2009).
  9. Varsami, M., et al. Inflammation and oxidative stress biomarkers in neonatal brain hypoxia and prediction of adverse neurological outcome: A review. J. Pediatr. Neonat. Individual. Med. 2, e020203 (2013).
  10. Cooper, R. L., Walker, R. F. Microradioenzymic assays for the measurement of catecholamines and serotonin. Methods. Enzymol. 103, 483-493 (1983).
  11. Murphy, J. F. The development of enzyme linked immunosorbent assays (ELISA) for the catecholamines adrenaline and noradrenaline. J. Immunol. Methods. 154, 89-98 (1992).
  12. Jones, S. R., Mickelson, G. E., Collins, L. B., Kawagoe, K. T., Wightman, R. M. Interference by pH and Ca2+ ions during measurements of catecholamine release in slices of rat amygdala with fast-scan cyclic voltammetry. J. Neurosci. Methods. 52, 1-10 (1994).
  13. Sanchismallols, J. M., Villanuevacamañas, R. M., Ramisramos, G. Determination of unconjugated catecholamine in urine as dopamine by thermal lens spectrometry. Analyst. 117, 1367-1371 (1992).
  14. Lan, C., Liu, W. Determination of catecholamines by HPLC-ECD in urine. Medical Laboratory Science and Clinics. , (2007).
  15. Tsunoda, M., Aoyama, C., Ota, S., Tamura, T., Funatsu, T. Extraction of catecholamines from urine using a monolithic silica disk-packed spin column and high-performance liquid chromatography-electrochemical detection. Anal. Methods. 3, 582-585 (2011).
  16. Bartolini, B., et al. Determination of monoamine oxidase activity by HPLC with fluorimetric detection. Neurobiology (Bp). 7, 109-121 (1999).
  17. Dunand, M., Gubian, D., Stauffer, M., Abid, K., Grouzmann, E. High throughput and sensitive quantitation of plasma catecholamines by ultraperformance liquid chromatography tandem mass spectrometryusing a solid phase microwell extraction plate. Anal. Chem. 85, 3539-3544 (2013).
  18. He, H., Carballo-Jane, E., Tong, X., Cohen, L. H. Measurement of catecholamines in rat and mini-pig plasma and urine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry coupled with solid phase extraction. J. Chromatogr. B. 997, 154-161 (2015).
  19. Simon, N., Young, P. How to increase serotonin in the human brain without drugs. J. Psychiatry. Neurosci. 32, 394-399 (2007).
  20. Grossi, G., et al. Improvements in automated analysis of catecholamine and related metabolites in biological samples by column-switching high-performance liquid chromatography. J. Chromatogr. A. 541, 273-284 (1991).
  21. Iwamot, T., Yoshiura, M., Iriyama, K. Liquid chromatographic identification of urinary catecholamine metabolites adsorbed on alumina. J. Liq. Chromatogr. R. T. 10, 1217-1235 (1987).
  22. Maycock, P. F., Frayn, K. N. Use of alumina columns to prepare plasma samples for liquid-chromatographic determination of catecholamines. Clin. Chem. 33, 286-287 (1987).
  23. Grossi, G., Bargossi, A., Lippi, A., Battistoni, R. A fully automated catecholamines analyzer based on cartridge extraction and HPLC separation. Chromatographia. 24, 842-846 (1987).
  24. Rondelli, I., et al. New method for the resolution of the enantiomers of 5,6-dihydroxy-2-methyl-aminotetralin by selective derivatization and HPLC analysis: Application to biological fluids. Chirality. 8, 381-389 (1996).
  25. Kumar, A., Hart, J. P., McCalley, D. V. Determination of catecholamines in urine using hydrophilic interaction chromatography with electrochemical detection. J. Chromatogr. A. 1218, 3854-3861 (2011).
  26. Sabbioni, C., et al. Simultaneous liquid chromatographic analysis of catecholamines and 4-hydroxy-3-methoxyphenylethylene glycol in human plasma: Comparison of amperometric and coulometric detection. J. Chromatogr. A. 1032, 65-71 (2004).
  27. Lee, M., et al. Selective solid-phase extraction of catecholamines by the chemically modified polymeric adsorbents with crown ether. J. Chromatogr. A. 1160, 340-344 (2007).
  28. He, H., et al. Facile synthesis of a boronate affinity sorbent from mesoporous nanomagnetic polyhedral oligomeric silsesquioxanes composite and its application for enrichment of catecholamines in human urine. Anal. Chim. Acta. 944, 1-13 (2016).
  29. Subbiah, T., Bhat, G. S., Tock, R. W., Parameswaran, S., Ramkumar, S. S. Electrospinning of nanofibers. J. Appl. Polym. Sci. 96, 557-569 (2005).
  30. Hu, W. Y., et al. Packed-fiber solid-phase extraction coupled with high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry for determination of diethylstilbestrol, hexestrol, and diedestrol residues in milk. J. Chromatogr. B. 957, 7-13 (2014).
  31. Liu, Z., Kang, X., Fang, F. Solid phase extraction with electrospun nanofibers for determination of retinol and α-tocopherol in plasma. Microchim. Acta. 168, 59-64 (2010).
  32. Qi, D., Kang, X., Chen, L., Zhang, Y., Wei, H., Gu, Z. Electrospun polymer nanofibers as a solid-phase extraction sorbent for the determination of trace pollutants in environmental water. Anal. Bioanal. Chem. 390, 929-938 (2008).
  33. Kang, X. J., Chen, L. Q., Zhang, Y. Y., Liu, Y. W., Gu, Z. Z. Performance of electrospun nanofibers for SPE of drugs from aqueous solutions. J. Sep. Sci. 31, 3272-3278 (2008).
  34. Chen, L. Q., Wang, Y., Qu, J. S., Deng, J. J., Kang, X. J. Selective extraction of catecholamines by packed fiber solid-phase using composite nanofibers composing of polymeric crown ether with polystyrene. Biomed. Chromatogr. 29, 103-109 (2015).
  35. Chen, L. Q., Zhu, X. H., Shen, J., Zhang, W. Q. Selective solid-phase extraction of catecholamines from plasma using nanofibers doped with crown ether and their quantitation by HPLC with electrochemical detection. Anal. Bioanal. Chem. 408, 4987-4994 (2016).
  36. Hu, H., Zhang, Y., Zhang, Y., Huang, X., Yuan, D. Preparation of a new sorbent based on boronate affinity monolith and evaluation of its extraction performance for nitrogen-containing pollutants. J. Chromatogr. A. 1342, 8-15 (2014).
  37. Chen, J., et al. Sensitive determination of four camptothecins bysolid-phase microextraction-HPLC based on a boronic acid contained polymer monolithic layer. Anal. Chim. Acta. 879, 41-47 (2015).
  38. Li, D., Chen, Y., Liu, Z. Boronate affinity materials for separation and molecular recognition: structure, properties and applications. Chem. Soc. Rev. 44, 8097-8123 (2015).
  39. Yan, J., Springsteen, G., Deeter, S., Wang, B. The relationship among pKa, pH, and binding constants in the interactions between boronic acids and diols: It is not as simple as it appears. Tetrahedron. 60, 11205-11209 (2004).
  40. Reuster, T., Rilke, O., Oehler, J. High correlation between salivary MHPG and CSF MHPG. Psychopharmacology. 162, 415-418 (2002).
  41. Beckmann, H., Goodwin, F. K. Urinary MHPG in subgroups of depressed patients and normal controls. Neuropsychobiology. 6, 91-100 (1980).
  42. Mitoma, M., et al. Stress at work alters serum brain-derived neurotrophic factor (BDNF) levels and plasma 3-methoxy-4-hydroxyphenylglycol (MHPG) levels in healthy volunteers: BDNF and MHPG as possible biological markers of mental stress?. Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 32, 679-685 (2008).
  43. Ressler, K. J., Nemeroff, C. B. Role of Norepinephrine in the Pathophysiology and Treatment of Mood Disorders. Biol. Psychiatry. 46, 1219-1233 (1999).
  44. Alonso-Spilsbury, M., et al. Perinatal asphyxia pathophysiology in pig and human: A review. Anim. Reprod. Sci. 90, 1-30 (2005).
  45. Shalak, L., Perlman, J. M. Hypoxic-ischemic brain injury in the term infant: Current concepts. Early. Hum. Dev. 80, 125-141 (2004).
  46. Maas, J. W., Leckman, J. F. relationships between central nervous system noradrenergic function and plasma and urinary MHPG and other norepinephrine metabolites. MHPG: Basic Mechanisms and Psychopathology. , 33-43 (1983).
  47. Maas, J. W. Relationships between central nervous system noradrenergic function and plasma and urinary concentrations of norepinephrine metabolites. Adv. Biochem. Psychopharmacol. 39, 45-55 (1984).
  48. Peyrin, L., Pequignot, J. M., Chauplannaz, G., Laurent, B., Aimard, G. Sulfate and glucuronide conjugates of 3-methoxy-4-hydroxyphenylglycol (MHPG) in urine of depressed patients: Central and peripheral influences. J. Neural. Transm. 63, 255-269 (1985).
  49. Peyrin, L. Urinary MHPG sulfate as a marker of central norepinephrine metabolism: A commentary. J. Neural. Transm. 80, 51-65 (1990).
check_url/56445?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Xie, L., Chen, L., Gu, P., Wei, L., Kang, X. A Convenient Method for Extraction and Analysis with High-Pressure Liquid Chromatography of Catecholamine Neurotransmitters and Their Metabolites. J. Vis. Exp. (133), e56445, doi:10.3791/56445 (2018).

View Video