De incidentie van obesitas stijgt en verhoogt het risico van chronische longziekten. De onderliggende mechanismen en preventieve strategieën, welomschreven dier vast te stellen modellen nodig zijn. Hier bieden wij drie methoden (glucose-tolerantie-test, lichaam plethysmography en fixatie van de Long) te bestuderen van het effect van obesitas op pulmonaire resultaten in muizen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Intraperitoneaal Glucose tolerantie Test, meting van de longfunctie, en fixatie van de longen om te bestuderen van de gevolgen van obesitas en verminderde stofwisseling op pulmonaire resultaten
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Obesitas en respiratoire aandoeningen zijn grote gezondheidsproblemen. Obesitas is steeds een opkomende epidemie met een verwachte aantal zwaarlijvige individuen van meer dan 1 miljard wereldwijd in 2030, dus vertegenwoordigen een groeiende sociaal-economische last. Gelijktijdig, zijn obesitas-gerelateerde comorbidities, met inbegrip van diabetes, alsmede hart en chronische longziekten, voortdurend op de stijging. Hoewel obesitas is geassocieerd met verhoogd risico op astma exacerbaties, wordt verslechtering van de respiratoire symptomen, en slechte controle, de functionele rol van obesitas en verontrust metabolisme in de pathogenese van chronische longziekte vaak onderschat, en moleculaire mechanismen blijven elusive. Dit artikel beoogt te presenteren van de methoden voor de beoordeling van het effect van obesitas op metabolisme, evenals Long structuur en functie. Hier beschrijven we drie technieken voor muizen studies: (1) beoordeling van intraperitoneaal glucosetolerantie (ipGTT) voor analyseren het effect van obesitas op glucose metabolisme; (2) meting van de weerstand van de luchtwegen (Res) en ademhalingswegen compliance (Cdyn) voor het analyseren van de invloed van obesitas op de longfunctie; en (3) voorbereiding en fixatie van de longen voor verdere kwantitatieve histologische beoordeling. Obesitas longziekten zijn waarschijnlijk multifactoriële, die voortvloeien uit de systemische inflammatoire en metabole disregulatie die potentieel ongunstig beïnvloeden longfunctie en de respons op therapie. Daarom is een gestandaardiseerde methode voor het bestuderen van de moleculaire mechanismen en het effect van nieuwe behandelingen essentieel.
Inleiding
Volgens de World Health Organization (WHO) in 2008, waren meer dan 1,4 miljard volwassenen, leeftijd 20 en ouder, overgewicht met een index van de lichaamsmassa (BMI) groter is dan of gelijk aan 25; verder, meer dan 200 miljoen mannen en bijna 300 miljoen vrouwen waren zwaarlijvig (BMI≥30)1. Obesitas en het metabool syndroom zijn belangrijke risicofactoren voor een veelheid aan ziekten. Terwijl de zwaarlijvigheid en de daarmee gepaard gaande verhoogde witte vetweefsel massa is nauw gekoppeld om type 2 diabetes2,3, cardio-vasculaire ziekten, met inbegrip van coronaire hartziekte (CHZ), h....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle dierlijke procedures werden uitgevoerd met inachtneming van de protocollen aangenomen door lokale overheden (Land NRW, AZ: 2012.A424), en werden overeenkomstig de Duitse dierenwelzijn-wet en de verordeningen inzake het welzijn van dieren die voor experimenten of voor andere wetenschappelijke doeleinden worden gebruikt. Aangezien Long functie analyse van invloed kan zijn op de structuur van de longen en dus latere histologische analyseert, moet de meting van Res en Cdyn en de voorbereidings- en fixatie van de longen voor histomorphometry in verschillende dieren worden uitgevoerd. Meting van Res en Cdyn na ipGTT is echter mogelijk. Omdat stress tijdens de ipGTT zou....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Representatieve resultaten van intraperitoneaal glucose tolerantie test (ipGTT) (Figuur 4), Long functie test (Figuur 5), en de vertegenwoordiger beelden ter illustratie van de haematoxyline en eosine gekleurd longen (Figuur 6).
De ipGTT werd uitgevoerd in zwaarlijvige muizen (blauw) na 7 weken van hoog-vet-dieet (HFD). Standaard dieet-gevo.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Dit rapport bevat drie protocollen voor drie verschillende methoden voor het analyseren van de gevolgen van obesitas op glucose metabolisme en pulmonaire resultaten. Eerst de glucose tolerantie test biedt de mogelijkheid om het analyseren van intracellulaire glucose-opname en kan worden indicatie van insulineresistentie. Ten tweede, hele lichaam plethysmography is een techniek voor het meten van de longfunctie en is daarmee handig voor het testen van de werkzaamheid van nieuwe behandelingen. Ten derde, een gestandaardise.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
De experimenten werden ondersteund door de Marga en Walter Boll-Stiftung, Kerpen, Duitsland; Project 210-02-16 (MAAA), Project 210-03-15 (MAAA) en door de Duitse Research Foundation (DFG; AL1632-02; MAAA), Bonn, Duitsland; Centrum voor moleculaire geneeskunde Keulen (CMMC; Universitair ziekenhuis Keulen; Carrière Advancement programma; MAAA), Köln Fortune (faculteit geneeskunde, Universiteit van Keulen; KD).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| GlucoMen LX | A.Menarini diagnostics, Firneze, Italy | 38969 | bloedglucosemeter |
| GlucoMen LX Sensor | A.Menarini diagnostics, Firneze, Italy | 39765 | Teststrips |
| Glucose 20% | B. Braun, Melsungen, Germany | 2356746 | |
| FinePointe Software | DSI, MC s´Hertogenbosch, Netherlands | 601-1831-002 | |
| FinePointe RC Single Site Mouse Table | DSI, MC s´Hertogenbosch, Netherlands | 601-1831-001 | |
| FPRC Controller | DSI, MC s´Hertogenbosch, Netherlands | 601-1075-001 | |
| FPRC Aerosol Block | DSI, MC s´Hertogenbosch, Netherlands | 601-1106-001 | |
| Aerogen neb head-5.2-4um | DSI, MC s´Hertogenbosch, Netherlands | 601-2306-001 | |
| Forceps | FST, British Columbia, Canada | 11065-07 | |
| Blunt scissors | FST, British Columbia, Canada | 14105-12 | |
| Micro scissors | FST, British Columbia, Canada | 15000-00 | |
| Perma-Hand 4-0 | Ethicon, Puerto Rico, USA | 736H | Chirurgische hechtdraad |
| Roti-Histofix 4% | Roth | P087.1 | 4% Paraformaldehyd |
| Ketaset | Zoetis, Berlijn, Germany | 10013389 | Ketamine |
| Rompun 2% | Bayer, Leverkusen, Germany | 770081 | Xylazine |
Referenties
- Kelly, T., Yang, W., Chen, C. S., Reynolds, K., He, J. Global burden of obesity in 2005 and projections to 2030. Int J Obes (Lond). 32, 1431-1437 (2008).
- Freemantle, N., Holmes, J., Hockey, A., Kumar, S. How strong is the assoc....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
