Estimulação do nervo cavernoso e gravação de pressão Intracavernous em um rato
Summary
Este estudo descreve um procedimento cirúrgico simplificado e técnica para a realização de estimulação do nervo cavernoso com o isolamento do nervo-eletrodo complexas usando cola de silicone e medição de pressão intracavernous.
Abstract
A estimulação do nervo cavernoso (CN) e a medida da pressão intracavernous (ICP) têm sido amplamente utilizados para testar e avaliar terapias para disfunção erétil. No entanto, os métodos usados variam entre laboratórios e armadilhas continuam a existir. O objetivo deste estudo foi descrever uma técnica cirúrgica que fornece um modelo confiável e reprodutível. Ao expor o músculo isquiocavernoso no seu ponto de inserção na tuberosidade isquial, as crus penianas podem ser canuladas com dissecção mínima e prejuízo para as estruturas envolvidas na função erétil. Estimulação repetida da NC, sem a necessidade de elevação e de secagem, foi alcançada por meio de um eléctrodo de prata bipolar µm 125 e cola de silicone biocompatível para isolar o complexo de eletrodo-nervo. Esse método impede a neurapraxia reduzindo o alongamento e secagem do nervo e fornece o completo isolamento do nervo, eliminando vazamento elétrico e impedindo a estimulação das vias alternativas.
Introduction
Estudo in vivo da função erétil em animais experimentais começou em 1863 com o trabalho experimental pioneiro de Eckhard1. Eletroestimulação dos nervos pélvicos foi usada para induzir o aumento da pressão Intracraniana em cães. Ao longo doséculo 20, protocolos experimentais similares foram usados em animais maiores, como cães, macacos, gatos e coelhos. Avaliando a função erétil em um rato foi desenvolvida pelo Quinlan et al , em 1989,2. O método já foi modificado e atualizado por vários outros grupos34. Hoje, o rato é o mais amplamente utilizado modelo animal para estudar a patologia da disfunção erétil e avaliando as opções de tratamento emergente. As principais etapas do processo incluem, gravação de pressão arterial sistêmica, usando uma linha na artéria carótida, canulação o peniana crus para medida de pressão Intracraniana e estimulação da NC para induzir um aumento da pressão Intracraniana. Embora diversos pesquisadores refinaram o modelo, sua reprodutibilidade continua a ser um problema, e resultados variáveis têm sido relatados por laboratórios diferentes. Várias armadilhas ainda persistem.
Anteriores artigos5,6,7,8,9,10 descrevem o uso de exposição completa do pênis com Desluvamento de pênis para canulação do corpo cavernoso. Isto não é uma abordagem ideal como manipulação e dissecação interrupções causa lesão às estruturas, que são essenciais para a função erétil. A dissecação da NC tem sido bem descrito10,11, mas a estimulação do nervo não é o ideal, devido a vários fatores que poderiam afetar os resultados experimentais. A técnica de estimulação CN inclui levantamento do nervo no tecido circundante puxando o eletrodo bipolar gancho, que é posicionado ao redor do nervo, e o nervo antes cada estimulação de secagem. Isso pode levar a vários graus de dano do nervo e escapamento corrente elétrico, resultando em uma resposta diminuída ou falso aumento a pressão Intracraniana através da estimulação dos caminhos alternativos , por exemplo, os músculos do assoalho pélvico, bexiga e gastrointestinal trato de12. Todos esses fatores limitam de reprodutibilidade.
Durante nosso estudo, observamos que a profundidade e o tipo de anestesia tem um profundo efeito sobre a pressão Intracraniana. Os anestésicos usados são pentobarbital de sódio, xilazina/cetamina ou cetamina/midazolam injeção ou inalação de oxigênio/isoflurano.
Aqui nós descrevemos um método simplificado de cirúrgico e fornecer dados para apoiar a padronização do protocolo experimental.
Protocol
Representative Results
Discussion
O principal objetivo deste estudo foi descrever uma técnica cirúrgica simplificada de canulação peniana crus para gravação de ICP e isolamento da NC para eletroestimulação. Nós introduzimos modificações para a dissecação do corpo cavernoso para simplificar a cirurgia e proporcionar gravações reprodutíveis do aumento do ICP com estimulação de CN. Com uma incisão de pele vertical de 1 cm, lateral para a base do pênis, usando a tuberosidade palpável como orientação, atingimos boa exposição do isquio…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Os autores têm sem agradecimentos.
Materials
| Adson forceps | Fine Science Tool | 11006-12 | |
| Dumont #7 forceps | Fine Science Tool | 11271-30 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tool | 11273-20 | |
| ToughCut Mayo scissor | Fine Science Tool | 14110-15 | |
| Miniature Vannas Spring scissor | Fine Science Tool | 15006-09 | |
| Ultra Fine Hemostat | Fine Science Tool | 13020-12 | |
| Crile Hemostat | Fine Science Tool | 13004-14 | |
| Kwik-Sil Adhesive | World Precision Instruments | KWIK-SIL | |
| Teflon coated silver wire 0.125 mm | World Precision Instruments | AGT0510 | |
| Elastic wire retractors | Custom made | ||
| Scalpel blade | Fine Science Tool | 10023-00 | |
| PE-50 tubing | Warner Instruments | 64-0753 | |
| 23 G Needle | Kruuse | 121272 | |
| SD-9 Square Pulse Stimulator | Somatco | 1077/183 | |
| Blood pressure transducer and cable | World Precision Instruments | BLPR2 | |
| Raucotupf Cotton-tipped Applicators | Lohmann-Raucher | 11966 | |
| Pro-ophta Ocular Sticks | Lohmann-Raucher | 16515 | |
| NaCl 0,9 % 100 mL | Local pharmacy | ||
| Heparin | Local pharmacy | ||
| 25 mL Syringe | Odense University Hospital | ||
| Vet eye ointment – Viscotears | Local pharmacy | ||
| silver wires | Science Products GmbH, Heidelberg, Germany | ||
| Silicon Glue | Kwik-Sil, World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA | ||
References
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