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Während oxidativer Stress eine häufig zitierte toxikologischen Mechanismus ist, leiden einige Mängel, einschließlich Zerstörung der Probe, Einführung der möglichen Artefakte und mangelnder Spezifität für die reaktive konventionelle Methoden zu studieren beteiligten Spezies. So gibt es einen aktuellen Bedarf auf dem Gebiet der Toxikologie für die zerstörungsfreie, sensitive und spezifische Methoden, die verwendet werden können, zu beobachten und zu quantifizieren, intrazellulären Redox-Störungen, häufiger als oxidativer Stress bezeichnet. Hier präsentieren wir Ihnen eine Methode für die Verwendung von zwei genetisch codierte Fluorogenic Sensoren, roGFP2 und HyPer in live Cell imaging Studien verwendet werden, um Fremdstoff-induzierte oxidative Reaktionen zu beobachten. roGFP2 gestalten mit der Glutathion-Redoxpotential (EGSH), während HyPer direkt erkennt Wasserstoffperoxid (H2O2). Beide Sensoren in verschiedenen Zelltypen über Transfektion oder Transduktion ausgedrückt werden können, und können zu bestimmten zellulären Kompartimenten ausgerichtet sein. Am wichtigsten ist, bietet live-Cell-Mikroskopie mit diesen Sensoren hohen räumlichen und zeitlichen Auflösung, der mit herkömmlichen Methoden nicht möglich ist. Änderungen in der Fluoreszenzintensität überwacht bei 510 nm dient als Anzeige für beide genetisch codierte Fluorogenic Sensoren nacheinander begeistert von 404 nm und 488 nm Licht. Diese Eigenschaft macht beide Sensoren ratiometrischen, Beseitigung von gemeinsamen Mikroskopie Artefakte und Berichtigung für Unterschiede bei den Sensor Ausdruck zwischen den Zellen. Diese Methodik kann über eine Vielzahl von fluorometrisch Plattformen in der Lage, spannende und sammeln von Emissionen bei der vorgeschriebenen Wellenlängen, bildet es verwendbar für Gebrauch mit konfokale bildgebenden Systemen, konventionellen Weitfeld-Mikroskopie und Platte Leserinnen und Leser. Beide Fluorogenic genetisch codierten Sensoren wurden in einer Vielzahl von Zelltypen und toxikologischen Studien zur zellulären EGSH und H2O2 Generation in Echtzeit zu überwachen. Die hier skizzierten ist eine standardisierte Methode, die allgemein anpassungsfähig Zelltypen und fluorometrisch plattformübergreifend für die Anwendung von roGFP2 und HyPer im Leben-Zelle toxikologische Bewertungen von oxidativem Stress.