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Article de méthode

Utilisant des ultrasons de haute résolution à l’apparition de tumeur de moniteur et de la croissance dans les modèles issus du génie génétique du cancer du pancréas

10.9K vues

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DOI :

10.3791/56979

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7 avril 2018

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Dans cet article

Résumé

Cet article décrit l’utilisation de l’échographie haute résolution chez les souris génétiquement modifiées de cancer du pancréas. L’objectif principal est de fournir une instruction détaillée pour la détection et l’évaluation des tumeurs pancréatiques endogènes.

Résumé

Le LSL-Kras G12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre modèle murin (KPC) représente un modèle transgénique établi et fréquemment utilisé pour évaluer de nouveaux traitements dans le cancer pancréatique. Apparition de la tumeur est variable dans le modèle de la KPC âgés de 8 semaines à plusieurs mois. Par conséquent, les outils d’imagerie non invasive sont tenus d’écran pour l’apparition de la tumeur et du moniteur pour la réponse au traitement. Pour résoudre ce problème, différentes approches ont émergé ces dernières années. Échographie haute résolution dispose d’atouts majeurs tels que le caractère non invasif, temps de session rapide et une image haute résolution sans exposition aux radiations. Cependant, l’échographie chez la souris n’est pas trivial et suffisamment de connaissances anatomiques et compétences pratiques nécessaires pour son exécution avec succès l’échographie haute résolution dans des modèles précliniques de cancer du pancréas. Avec l’article suivant, un guide pratique détaillé pour une échographie abdominale dans les modèles murins en mettant l’accent sur des modèles de cancer pancréatique endogène est présenté. Par ailleurs, on trouvera un résumé des erreurs courantes et comment les éviter.

Introduction

Modèles de souris génétiquement modifiées ont acquis une importance croissante dans la recherche sur le cancer en raison de leur capacité à récapituler étroitement la nature complexe de la carcinogenèse humaine1,2,3. Un des plus fréquemment utilisé des modèles pour étudier le développement du cancer pancréatique, la progression et la réponse thérapeutique est caractérisée par une mutation activatrice de l’oncogène Kras, combinée à une inactivation de la tumeur suppresseur p534. Cette LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1....

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Protocole

Ce protocole est en conformité avec les directives de protection des animaux à l’University Medical Centre Goettingen, Allemagne (33,9-42502-04-15/2056). Selon les besoins spécifiques de chaque animal review boards, parmi les mesures du protocole pourrait être modifiée en conséquence.

1. abdominale Palpation des CPK souris

  1. Pour éviter les échographies inutiles, palper l’abdomen de la souris pour identifier des souris qui pourraient éventuellement porter une lésion intraabdominale et devraient subir par la suite une échographie abdominale.
    1. Effectuer une palpation abdominale hebdomadaire à partir de 8 semaines d’âge dans le ....

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Résultats

L’échographie est une technique polyvalente et non invasif qui est utilisée pour traiter plusieurs questions dans des modèles murins de maladies humaines. Par rapport à tous les autres avantages majeurs des approches d’imagerie sont efficacité haut débit, coût, temps d’acquisition court et imagerie en temps réel. Toutefois, cet outil a besoin d’expertise pour générer des images précises et de haute qualité. Particulièrement dans le cas d’objets non désirés au moins une certaine expérience.......

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Discussion

Avec ce protocole, une description détaillée pour quantifier les tumeurs du pancréas, à l’aide de l’échographie abdominale haute résolution dans des modèles murins transgéniques est fournie. Récemment, Sastra et coll. publié une description détaillée comment quantifier les tumeurs pancréatiques dans les modèles murins, mais aucune instruction visualisées sur la préparation et la manipulation comme condition sine qua non pour toutes les autres étapes ont été indiqué11. L’objectif global de.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Cette recherche a été financée par la Deutsche Krebshilfe (groupe Eder Max pour AN : 110972), une bourse de thèse de doctorat d’impliquant (pour PME/PMI) et une bourse de la Fondation Else-Kröner-Fresenius (à RGG) à l’University Medical Center Goettingen. Nous remercions Jutta Blumberg et Ulrike Wegner d’assistance technique d’experts. Nous remercions également tous les techniciens animales à l’animalerie de l’University Medical Center Goettingen pour garder la souris. Toutes les expériences ont été effectuées conformément à la réglementation allemande de bien-être animal.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Système d’échographie haute résolution Visual Sonics Vevo2100, y compris platine d’imagerie et ligne d’anesthésieFUJIFILM VisualSonics Inc, CanadaVS-11945
Sonde MicroScan Vevo 2100 MS-550-D (22-55MHz)FUJIFILM VisualSonics Inc, CanadaVS-11874
Système d’anesthésie Vevo (chambre d’induction d’anesthésie avec entrée de gaz frais et résiduaires)FUJIFILM VisualSonics Inc, CanadaSA-12055
Station d’imagerie Vevo (platine fonctionnelle avec cône nasal pour l’alimentation en anesthésie)FUJIFILM VisualSonics Inc, CanadaSA-11982
  ; tondeuses électroniques pour animaux de compagniePanasonic Marketing Europe, Allemagne5025232484324Panasonic ER-PA10-s
Labotect Plaque chauffanteLabor tech Gö ; ttingen, Allemagne13854
crème pour les yeux (pommade ophtalmique)Schü ; lke& Mayr, Allemagne9080249
isoflurane vétérinaireAbbvie, Allemagne4831867
crème dépilatoireRB healthcare Royaume-Uni, Royaume-Uni8218535
70 % d’éthanol (v/v) dans de l’eau distilléeTH. Geyer, Allemagne22941000
gel à ultrasonsAsmuth, Allemagne13477
lingettes mouchoirsKimberly-Clark Allemagne, Allemagne7558
cotons-tigesMeditrade, Allemagne75481116
bol en verre pour gel à ultrasonsARC France, FranceH1149
bol d’eauW & P Trading Co., États-UnisB00K2P6PLQ
éponges de gazeFuhrmann, Allemagne960504

Références

  1. Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine. EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).
  2. Olive, K. P., Politi, K. Translational therapeutics in genetically engin....

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Réimpressions et autorisations

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