वसा ऊतक के प्रत्यारोपण-व्युत्पन्न स्टेम सेल शीट एक चूहा मॉडल में आंशिक Colectomy के बाद रिसाव को कम करने के लिए
Summary
तैयारी और प्रत्यारोपण वसा ऊतक व्युत्पंन स्टेम सेल (ए एस सी) पर चादरों अपर्याप्त टांका एक चूहा मॉडल में कोलोरेक्टल anastomoses प्रस्तुत किया है । इस उपंयास आवेदन से पता चलता है कि ए एस सी शीट्स कोलोरेक्टल सम्मिलन रिसाव को कम कर सकते हैं ।
Abstract
Anastomotic रिसाव कोलोरेक्टल सर्जरी के बाद एक विनाशकारी जटिलता है । हालांकि रिसाव की रोकथाम के लिए मौजूदा तरीकों नैदानिक प्रभावकारिता के विभिन्न स्तरों है, वे अब अपूर्ण समाधान तक कर रहे हैं. स्टेम सेल चिकित्सा ए एस सी शीट्स का उपयोग कर इस समस्या का समाधान प्रदान कर सकता है । ASCs अपने पौष्टिकता और इम्यूनोमॉड्यूलेटरी गुणों के कारण ऊतक चिकित्सा को बढ़ावा देने के लिए होनहार उंमीदवारों के रूप में माना जाता है । यहां, हम उच्च घनत्व ए एस सी शीट, कि एक चूहा मॉडल में एक कोलोरेक्टल सम्मिलन पर प्रत्यारोपण के रिसाव को कम कर रहे है उत्पादन तरीकों प्रदान करते हैं । ASCs को आसानी से अलग किया जा सकता है कि थर्मामीटरों उत्तरदायी संस्कृति व्यंजन में सेल शीट का गठन । रोपाई के दिन, 5-सीवन कोलोरेक्टल सम्मिलन के साथ एक आंशिक colectomy प्रदर्शन किया गया था । पशुओं को तुरंत चूहे के प्रति 1 ए एस सी शीट के साथ प्रत्यारोपण किया गया । ए एस सी शीट किसी भी गोंद, टांका, या किसी भी सामग्री के बिना सम्मिलन को सहज का पालन किया । पशु समूहों 3 और 7 दिन पश्चात बलि दी गई । प्रत्यारोपण पशुओं की तुलना में, anastomotic फोड़े और रिसाव की घटना नियंत्रण पशुओं में अधिक था । हमारे मॉडल में, ए एस सी शीट के ट्रांसप्लांटेशन कोलोरेक्टल सम्मिलन के बाद सफल और एक कम रिसाव दर के साथ जुड़ा हुआ था ।
Introduction
एक प्राथमिक सम्मिलन के साथ आंशिक colectomy एक सामांयतः प्रदर्शन किया सर्जरी कि कई ऐसे कोलोरेक्टल कैंसर, Crohn रोग और diverticulitis1,2के रूप में बृहदांत्र को प्रभावित करने के रोगों के लिए किया जा सकता है । सबसे खतरनाक जटिलता के बाद कोलोरेक्टल सम्मिलन है anastomotic रिसाव3. हालांकि कई जोखिम कारकों anastomotic लीक के साथ जुड़े पहचान की गई है, रिसाव को रोकने के लिए समाधान रह unkown4,5।
वसा ऊतक-व्युत्पन्न stromal कोशिकाओं (ASCs) विरोधी भड़काऊ और पौष्टिकता गुण6,7के साथ जुड़े रहे हैं, जो इन कोशिकाओं को अपक्षयी उपचार के लिए उंमीदवारों का वादा8बनाता है । ASCs की प्रभावशीलता ऊतक चिकित्सा को बढ़ावा देने के लिए इस तरह के हृदय की मांसपेशी, त्वचा, और oesophagus9,10,11,12,13के रूप में विभिंन ऊतकों में दिखाया गया था । हालांकि, आंतों के उपचार को बढ़ावा देने के लिए ASCs के उपयोग पर कुछ रिपोर्ट कर रहे हैं । सी एस सी लेपित टांके या ASCs के serosal इंजेक्शन के माध्यम से प्रयोगात्मक कोलोरेक्टल anastomoses करने के लिए ASCs के स्थानीय प्रत्यारोपण या तो14 उपचार में कोई सुधार या एक अधिक अनुकूल anastomotic के बावजूद anastomotic रिसाव को रोकने नहीं दिखाया आरोग्य१५.
निलंबन में ASCs के स्थानीय प्रत्यारोपण या के साथ संयुक्त, अपर्याप्त सेल प्रतिधारण या प्रत्यारोपण कोशिकाओं के एक अपर्याप्त वितरण11के साथ संबद्ध हो सकता है । सेल शीट प्रौद्योगिकी16,17 ए एस सी डिलीवरी18,19की एक अभिनव विधि प्रदान करता है । इसलिए, पिछले अध्ययन में, एक उपंयास दृष्टिकोण का प्रस्ताव किया गया था जिसमें एक सेल शीट में आयोजित ASCs प्रयोगात्मक कोलोरेक्टल सम्मिलन20पर लागू किया जा सकता है । इस अध्ययन का प्रदर्शन किया है कि ए एस सी शीट ट्रांसप्लांटेशन एक चूहा मॉडल में आंशिक colectomy के बाद कोलोरेक्टल सम्मिलन रिसाव को कम करने में सफल रहा है । यह लेख रिपोर्ट ए एस सी शीट तैयारी और शल्य चिकित्सा प्रत्यारोपण तकनीक ।
Protocol
Representative Results
Discussion
Anastomotic रिसाव सबसे गंभीर प्रतिकूल एक प्राथमिक सम्मिलन के साथ बृहदांत्र लकीर के बाद घटना है । इष्टतम तकनीक anastomotic व्यवधान और रिसाव को रोकने के लिए अभी भी कमी है । एक सरणी के स्थानीय अनुप्रयोग का आयोजन किया गय?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखक प्रो डॉ S.E.R. Hovius, डॉ M.A.M. Mureau और चमड़े के नीचे वसा ऊतक के संग्रह के लिए प्लास्टिक सर्जरी विभाग के सभी सर्जन के लिए आभारी हैं । पी सुखो नीदरलैंड फैलोशिप कार्यक्रम (NFP-12/435) से एक अनुदान द्वारा समर्थित है, अध्ययन के संचालन के दौरान । Y.M. Bastiaansen-Jenniskens डच गठिया फाउंडेशन (LP11) से अनुदान द्वारा समर्थित है ।
Materials
| LG DMEM | Gibco, Life technologies | 22320022 | ASC isolation and culture |
| Collagenase type I | Gibco, Life technologies | 17100-01 | ASC Isolation |
| Bovine Serum Albumin | Sigma-Aldrich | A9418 | ASC Isolation |
| Fetal bovine serum | Gibco, Life technologies | 10270-106 | FBS, ASC isolation and culture |
| 3% acetic acid with methylene blue | Stemcell Technologies | 7060 | ASC Isolation |
| Gentamicin | Gibco, Life technologies | 15750-037 | ASC isolation and culture |
| Ampothericin B | Gibco, Life technologies | 15290-018 | ASC isolation and culture |
| Shaker (Gallenkamp Environmental Shaker Model 10X 400) | Akribis Scientific | F240 | ASC Isolation |
| Centrifuge | Hettichlab | Rotina380 | ASC isolation and culture |
| Phosphate buffer saline | Gibco, Life technologies | 14190-094 | PBS, ASC isolation and culture |
| Ascorbic acid-2-phosphate | Sigma-Aldrich | A8960 | ASC isolation and culture |
| Human recombinant fibroblast growth factor 2 | AbD Serotec | AF-100-15 | FGF2, ASC isolation and culture |
| Trypsin EDTA | Gibco, Life technologies | 25200-056 | ASC culture |
| Dimethyl sulfoxide | Sigma-Aldrich | D2650-5x | DMSO, ASC freezing |
| Thermo-responsive culture dishes | Nunc Thermo scientific | 174904 | ASC sheet preperation |
| Non-absorbable braided silk 4/0 | B Braun | 21151042 | surgery |
| Non-absorbable monofilament polyamide 8/0 | B Braun | G1118170 | surgery |
| Absorbable braided polyglycolic acid 5/0 | B Braun | C1048207 | surgery |
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