Модель человека печени химерных мыши семейной гиперхолестеринемией, с помощью индуцированных плюрипотентных стволовых клеток гепатоцитов

Jiayin Yang; Lai-Yung Wong; Xiao-Yu Tian; Rui Wei; Wing-Hon Lai; Ka-Wing Au; Zhiwei Luo; Carl Ward; Wai-In Ho; David P. Ibañez; Hao Liu; Xichen Bao; Baoming Qin; Yu Huang; Miguel A. Esteban; Hung-Fat Tse

doi:10.3791/57556

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Модель человека печени химерных мыши семейной гиперхолестеринемией, с помощью индуцированных плюрипотентных стволовых клеток гепатоцитов

7.7K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/57556

⸱

15 сентября 2018 г.

Jiayin Yang^*¹^,²^,⁶ , Lai-Yung Wong^*² , Xiao-Yu Tian^*³ , Rui Wei¹^,² , Wing-Hon Lai² , Ka-Wing Au² , Zhiwei Luo⁴^,⁵ , Carl Ward⁴^,⁵ , Wai-In Ho² , David P. Ibañez⁴^,⁵ , Hao Liu⁴^,⁵ , Xichen Bao⁴^,⁵ , Baoming Qin⁴^,⁵ , Yu Huang³ , Miguel A. Esteban⁴^,⁵^,⁷ , Hung-Fat Tse¹^,²^,⁶^,⁷

¹Department of Medicine, University of Hong Kong-Shenzhen Hospital, ²The Cardiology Division, Department of Medicine, Li Ka Shing Faculty of Medicine, University of Hong Kong, ³School of Biomedical Sciences, Institute of Vascular Medicine, Li Ka Shing Institute of Health Sciences, Chinese University of Hong Kong, ⁴Key Laboratory of Regenerative Biology of the Chinese Academy of Sciences, Joint School of Life Sciences, Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health and Guangzhou Medical University, ⁵Laboratory of RNA, Chromatin, and Human Disease, CAS Key Laboratory of Regenerative Biology and Guangdong Provincial Key Laboratory of Stem Cells and Regenerative Medicine, Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health, Chinese Academy of Sciences, ⁶Research Centre of Heart, Brain, Hormone, and Healthy Ageing, Li Ka Shing Faculty of Medicine, University of Hong Kong, ⁷Hong Kong-Guangdong Stem Cell and Regenerative Medicine Research Centre, University of Hong Kong and Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health

^* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем протокол для создания человеческой печени химерных мыши модели семейной гиперхолестеринемией, используя человеческое индуцированных плюрипотентных стволовых клеток гепатоцитов. Это является полезной моделью для тестирования новых терапий для гиперхолестеринемии.

Аннотация

Семейной гиперхолестеринемией (FH) в основном вызвано мутациями липопротеинов низкой плотности рецептора (LDLR) и приводит к повышенным риском сердечно-сосудистых заболеваний раннего начала из-за заметное повышение ЛПНП в крови холестерина (LDL-C). Статины являются первой линией гиполипидемические препараты для лечения FH и другие виды гиперхолестеринемии, но появляются новые подходы, в частности PCSK9 антител, которые в настоящее время проходит испытания в клинических испытаниях. Изучить новые терапевтические подходы для FH, новых лекарств или новых формулировок, мы должны надлежащим в естественных условиях модели. Однако различия в метаболические профили липидов, по сравнению с людьми являются ключевой проблемой доступных животных моделей FH. Для решения этой проблемы, мы породили модель человеческой печени химерных мыши, с помощью FH индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (iPSC)-производных гепатоцитов (iHeps). Мы использовали/Ldlr^{- / -}/Rag2^{- / -}/Il2rg^{- / -} (LRG) мышах, чтобы избежать иммунной неприятие трансплантированных человеческих клеток и для оценки эффекта LDLR-дефицит iHeps в LDLR null фон. Пересаженные FH iHeps может населить 5-10% печени мыши LRG основе человеческого альбумина пятнать. Кроме того прижившимися iHeps ответил гиполипидемические препараты и резюмировалась клинические наблюдения повышенной эффективности PCSK9 антител, по сравнению с статины. Наши человеческой печени химерных модель таким образом может быть полезным для доклинических испытаний новых терапий для FH. Используя тот же протокол, аналогичных человеческой печени химерных мышей для других генетических вариантов FH или мутации, соответствующий других наследственных заболеваний печени, также могут быть созданы.

Введение

Рецептор липопротеинов низкой плотности (LDLR) захватывает LDL холестерина (LDL-C) в крови, чтобы модулировать синтез холестерина в печени. Мутации в гене LDLR являются наиболее частой причиной семейной гиперхолестеринемией (FH)¹. Статины традиционно первая линия препаратов для лечения FH и другие виды гиперхолестеринемии (унаследованные или приобретенных). Статины препятствовать 3-гидрокси-3-methylglutaryl кофермент редуктазы снизить синтез холестерина в печени². Кроме того статины увеличить уровень LDLR на поверхности гепатоцитов содействовать плазмы LDL-C разминирование. Однако основных предостережение лечения статина....