Summary

Fedt-vand Phantoms for magnetisk resonans validering: en fleksibel og skalerbar protokol

Published: September 07, 2018
doi:

Summary

Formålet med dette arbejde er at beskrive en protokol for at skabe en praktisk fedt-vand phantom, som kan tilpasses til at producere phantoms med varierende fedt procenter og diskenheder.

Abstract

Da er udviklet nye metoder til billede fedtvæv, bliver metoder til at validere sådanne protokoller stadig vigtigere. Spøgelser, eksperimentelle reproduktioner af et væv eller organ af interesse, giver en billig og fleksibel løsning. Dog uden adgang til dyre og specialiseret udstyr, konstruere stabil phantoms med højt fedt fraktioner (fx., > 50% fedtfraktionen niveauer som dem set i brunt fedtvæv) kan være vanskelig på grund af den hydrofobiske karakter af lipider. Dette arbejde præsenterer en detaljeret, lave omkostninger protokol for at skabe 5 x 100 mL phantoms med fedt brøkdele af 0%, 25%, 50%, 75% og 100% ved hjælp af grundlæggende lab forsyninger (kogeplade, bægre, osv.) og let tilgængelige komponenter (destilleret vand, agar, vandopløselige overfladeaktivt stof, natriumbenzoat, gadolinium-diethylenetriaminepentacetate (DTPA) kontraststof, jordnøddeolie, og olie-opløselige overfladeaktivt stof). Protokollen var designet til at være fleksibel. Det kan bruges til at oprette phantoms med forskellige fedt fraktioner og en bred vifte af diskenheder. Fantomer lavet med denne teknik blev evalueret i den feasibility-undersøgelse, som sammenlignede fedtfraktionen værdier fra fedt-vand magnetisk resonans at målværdierne i de beregnede spøgelser. Denne undersøgelse givet en konkordans korrelationskoefficienten af 0.998 (95% konfidensinterval: 0.972-1,00). Sammenfattende viser disse undersøgelser nytte af fedt phantoms til validering af fedtvæv imaging teknikker på tværs af en vifte af klinisk relevante væv og organer.

Introduction

Interessen for kvantificering af fedtvæv og triglycerid indhold ved hjælp af Billeddannende modaliteter, såsom magnetisk resonans imaging (MR), strækker sig over mange felter. Forskningsområder omfatter undersøgelse af hvidt og brunt fedtvæv depoter og ektopisk opbevaring af lipid i organer og væv som lever1, bugspytkirtlen2og skeletmuskulatur3. Da disse nye teknikker for fedt kvantificering er udviklet, metoder er nødvendige for at bekræfte, at billeddannelse parametre er gyldig for forskning og kliniske applikationer.

Spøgelser, eksperimentelle reproduktioner af et væv eller organ, giver en low-cost, fleksibel og kontrolleret værktøj til at udvikle og validere billeddiagnostiske teknikker4. Specifikt, kan spøgelser konstrueres til at bestå af fedt og vand i forholdet eller fedt volumenfraktion (FF) sammenlignes med væv af klinisk interesse. Klinisk, FF værdier i væv og organer kan variere meget: FF i brunt fedtvæv falder mellem 29,7% og 93,9%5; den gennemsnitlige leveren FF i steatose patienter er 18,1 ± 9,0%6; pancreas FF i voksne i risiko for type 2 diabetes varierer mellem 1,6% og 22,2%7; og i nogle tilfælde på forhånd sygdom, patienter med Duchennes muskeldystrofi kan have FF værdier på næsten 90% i nogle muskler8.

Fordi ikke-polære molekyler såsom lipider ikke opløses i opløsninger af polære molekyler såsom vand, forbliver at skabe stabile phantoms med et højt mål FF udfordrende. For FF op til kan 50%, mange eksisterende metoder bruges til at oprette fat vand phantoms9,10,11,12. Andre metoder, at opnår højere FFs typisk kræver dyrt udstyr såsom en homogeniseringsapparat eller en ultralyd celle disruptor13,14. Selv om disse teknikker give en køreplan for høj FF phantoms, begrænse udstyr begrænsninger og varierende mængder af eksperimentelle detaljer bestræbelserne på at skabe reproducerbare og robust fedt vand spøgelser.

Bygger på disse tidligere teknikker, udviklet vi en metode til at konstruere omkostningseffektive og stabil fat vand spøgelser på tværs af en tilpasselig vifte af FF værdier. Denne protokol detaljer de nødvendige skridt for at gøre 5 x 100 mL fedt phantoms med FF værdier af 0%, 25%, 50%, 75% og 100% ved hjælp af en enkelt kogeplade. Det kan nemt justeres for at skabe forskellige mængder (10 til 200 mL) og fedt procenter (0 til 100%). Effekten af de fantom teknik blev evalueret i de feasibility undersøgelse sammenligner fedt-vand Mr FF værdier målværdier på FF i de beregnede spøgelser.

Protocol

1. Forbered arbejdsstation og materialer Overholde alle laboratorium sikkerhedsregler. Bære øjenbeskyttelse og handsker. Læs det materiale sikkerhedsdatablad for hver af reagenserne, der anvendes og tage passende forholdsregler. Gennemgå materialer og udstyr listen, kemiske håndteringsprocedurerne og glasvarer forholdsregler.Advarsel: Denne protokol kræver brug af en kogeplade ved høje temperaturer. Være forsigtig og varmebestandige handsker, når interagere med hot beholdere og rør ikke ved overfl…

Representative Results

Hvis vand løsning er blevet forberedt korrekt, skal en lille mængde af løsningen stivne hurtigt i en test hætteglas (figur 1, venstre). Hvis løsningen adskiller (figur 1, højre), skal løsningen være forberedt igen (som anvist i trin 3.8 i protokollen). Hvis emulsion adskiller (eksempler i figur 2, venstre og højre), phantom er ikke levedygti…

Discussion

Vi beskriver en robust metode til at oprette fat vand phantoms egnet til validering af de medicinske Billeddannende teknikker bruges til at kvantificere fedtvæv og triglycerid indhold in vivo. Ved at oprette to reservoirer (én for olie løsning) og én til vand løsning, blev der bygget stabil spøgelser med en bred vifte af FF værdier-herunder værdier på over 50% – uden behov for dyrt udstyr. Høj FF phantoms (> 50%) giver nytte for at sikre Billeddannende teknikker for fedt kvantificering er gyldig for …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Finansiering støtte denne forskning blev ydet National Institutes of Health (NIH) og nationale Institut for Diabetes og Digestive og nyre sygdomme (NIDDK) / NIH R01-DK-105371. Vi takker Dr. Houchun (Harry) Hu for råd og forslag på fedt vand phantom skabelse.

Materials

Distilled Water Amazon B000P9BY38 Base of water solution
Agar Sigma Aldrich Incorporated A1296-100G Gelling agent
Water-Soluble Surfactant Sigma Aldrich Incorporated P1379-500ML Surfactant/emulsifying agent
Gadolinium-DTPA Contrast Agent Bayer Healthcare 50419-0188-01 Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent.
Sodium Benzoate Sigma Aldrich Incorporated 71300-250G Preservative
Peanut Oil Amazon 54782-LOU Base of oil solution
Oil-Soluble Surfactant Sigma Aldrich Incorporated S6760-250ML Surfactant/emulsifying agent
Hotplate w/ Stirrer Fisher Scientific 07-770-152
Stir bars (Egg-Shaped) Sigma Aldrich Incorporated Z127116-1EA
400 mL Beaker Sigma Aldrich Incorporated CLS1003400-48EA
250 mL Erlenmeyer Flask Sigma Aldrich Incorporated CLS4450250-6EA
25 mL Glass Volumetric Pipette Fisher Scientific 13-650-2P Quantity = 2
50 mL Glass Volumetric Pipette Fisher Scientific 13-650-2S Quantity = 2
75 mL Glass Volumetric Pipette Fisher Scientific 13-650-2T Quantity = 2
3.0 mL Syringe Sigma Aldrich Incorporated Z248002-1PAK
1.0 mL Syringe Sigma Aldrich Incorporated Z230723-1PAK
Spatula Sigma Aldrich Incorporated S3897-1EA
Scale (100g X 0.01g Resolution) Amazon AWS-100-BLK
Weigh Boats Sigma Aldrich Incorporated Z740499-500EA
120 mL Glass Jars McMaster Carr Supply Co 3801T73
Heat Resistant Gloves (pair) Amazon B075GX43MN
Syringe Needles Sigma Aldrich Incorporated Z192341-100EA
18" stir bar retriver Fisher Scientific 14-513-70
1 Dram Clear Glass Vial Fisher Scientific 03-339-25B

References

  1. Franz, D., et al. Association of proton density fat fraction in adipose tissue with imaging-based and anthropometric obesity markers in adults. Int J Obes. , 1-8 (2017).
  2. Chai, J., et al. MRI chemical shift imaging of the fat content of the pancreas and liver of patients with type 2 diabetes mellitus. Exp Ther Med. 11 (2), 476-480 (2016).
  3. Hogrel, J. Y., et al. NMR imaging estimates of muscle volume and intramuscular fat infiltration in the thigh: variations with muscle, gender, and age. Age (Omaha). 37 (3), 1-11 (2015).
  4. Hoskins, P. R. Simulation and Validation of Arterial Ultrasound Imaging and Blood Flow. Ultrasound Med Biol. 34 (5), 693-717 (2008).
  5. Hu, H. H., Perkins, T. G., Chia, J. M., Gilsanz, V. Characterization of human brown adipose tissue by chemical-shift water-fat MRI. Am J Roentgenol. 200 (1), 177-183 (2013).
  6. d’Assignies, G., et al. Noninvasive quantitation of human liver steatosis using magnetic resonance and bioassay methods. Eur Radiol. 19 (8), 2033-2040 (2009).
  7. Schwenzer, N. F., et al. Quantification of pancreatic lipomatosis and liver steatosis by MRI: comparison of in/opposed-phase and spectral-spatial excitation techniques. Invest Radiol. 43 (5), 330-337 (2008).
  8. Wokke, B. H., et al. Quantitative MRI and strength measurements in the assessment of muscle quality in Duchenne muscular dystrophy. Neuromuscul Disord. 24 (5), 409-416 (2014).
  9. Fischer, M. A., et al. Liver Fat Quantification by Dual-echo MR Imaging Outperforms Traditional Histopathological Analysis. Acad Radiol. 19 (10), 1208-1214 (2012).
  10. Hayashi, T., et al. Influence of Gd-EOB-DTPA on proton density fat fraction using the six-echo Dixon method in 3 Tesla magnetic resonance imaging. Radiol Phys Technol. , (2017).
  11. Hines, C. D. G., Yu, H., Shimakawa, A., McKenzie, C. A., Brittain, J. H., Reeder, S. B. T1 independent, T2* corrected MRI with accurate spectral modeling for quantification of fat: Validation in a fat-water-SPIO phantom. J Magn Reson Imaging. 30 (5), 1215-1222 (2009).
  12. Fukuzawa, K., et al. Evaluation of six-point modified dixon and magnetic resonance spectroscopy for fat quantification: a fat-water-iron phantom study. Radiol Phys Technol. , 1-10 (2017).
  13. Bernard, C. P., Liney, G. P., Manton, D. J., Turnbull, L. W., Langton, C. M. Comparison of fat quantification methods: A phantom study at 3.0T. J Magn Reson Imaging. , (2008).
  14. Poon, C., Szumowski, J., Plewes, D., Ashby, P., Henkelman, R. M. Fat/Water Quantitation and Differential Relaxation Time Measurement Using Chemical Shift Imagin Technique. Magn Reson Imaging. 7 (4), 369-382 (1989).
  15. Yu, H., Shimakawa, A., Mckenzie, C. a., Brodsky, E., Brittain, J. H., Reeder, S. B. Multi-Echo Water-Fat Separation and Simultaneous R2* Estimation with Multi-Frequency Fat Spectrum Modeling. Spectrum. 60 (5), 1122-1134 (2011).
  16. Peri, C. . The extra-virgin olive oil handbook. , (2014).
  17. Kell, G. S. Density, Thermal Expansivity, and Compressibility of Liquid Water from 0° to 150°C: Correlations and Tables for Atmospheric Pressure and Saturation Reviewed and Expressed on 1968 Temperature Scale. J Chem Eng Data. 20 (1), 97-105 (1975).
check_url/57704?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Bush, E. C., Gifford, A., Coolbaugh, C. L., Towse, T. F., Damon, B. M., Welch, E. B. Fat-Water Phantoms for Magnetic Resonance Imaging Validation: A Flexible and Scalable Protocol. J. Vis. Exp. (139), e57704, doi:10.3791/57704 (2018).

View Video