Hier presenteren we een protocol om een groot beeldveld (FOV) driedimensionale (3D) fluorescentie en OCT retinale beeld met behulp van een roman imaging multimodale platform. We introduceren de systeeminstellingen, de methode van de aanpassing en de operationele protocollen. In vivo imaging zal worden aangetoond, en representatieve resultaten zal worden verstrekt.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Multimodale volumetrische Retinal Imaging door schuine scannen Laser Ophthalmoscopy (oSLO) en optische coherentie tomografie (OCT)
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Hoewel fluorescentie imaging wijd in de oogheelkunde gebruikt wordt, is een groot beeldveld (FOV) driedimensionale (3D) fluorescentie retinale beeld nog steeds een grote uitdaging met de state-of-the-art retinal imaging modaliteiten, omdat zij z-stapelen te vereisen zou het compileren van een volumetrische dataset. Nieuwere optische coherentie tomografie (OCT) en OCT angiografie (OCTA) systemen overwinnen deze beperkingen om driedimensionale (3D) anatomische en vasculaire beelden, maar de kleurstof-vrije aard van LGO kan niet visualiseren lekkage indicatieve van vasculaire dysfunctie. Dit protocol beschrijft een roman oblique laser ophthalmoscopy (oSLO) techniek waarmee 3D volumetrische fluorescentie retinale imaging te scannen. De installatie van de imaging systeem genereert de schuine scannen door de schuifregelaar van een duif staart en Hiermee lijnt u de definitieve imaging systeem onder een hoek met fluorescerende transversale afbeeldingen detecteren. Het systeem maakt gebruik van de laser methode voor het scannen, en daarom, een gemakkelijke integratie van LGO wordt toegestaan als een aanvullende structurele volumetrische imaging modaliteit. In vivo imaging op rat netvlies is hier gedemonstreerd. Fluoresceïne oplossing is intraveneus geïnjecteerd om het produceren van volumetrische fluoresceïne-angiografie (vFA).
Inleiding
Oogheelkunde en visie wetenschap veel baat hebben bij de moderne optische beeldvormingstechnieken, want het netvlies zijn gemakkelijk toegankelijk met licht. Fluorescentie retinale imaging is een essentieel instrument in de diagnose en het beheer van chorioretinal en vaatziekten zoals diabetische retinopathie (DR) en leeftijdsgebonden Macula Degeneratie (AMD), die beide zijn belangrijkste oorzaken van blindheid in de Verenigde Staten.
Het is echter nog steeds uitdagend te verwerven van een groot beeldveld (FOV), driedimensionale (3D) retinal imaging met behulp van fluorescentie imaging. Fundus fotografie hoeft niet het vermogen diepte-oplos....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de Animal Care en gebruik Comité (ACUC) van Boston Medical Center.
1. de systeeminstellingen
- oSLO systeem
- Gebruik een supercontinuum laserbron als de bron van de laser systeem.
- Het zichtbare licht bereik (450-650 nm) van hogere golflengtegebied (650-2000 nm) scheiden door een dichroïde spiegel (DM1). Vouw het spectrum met een paar verspreide prisma's na de lichtbundel passeren een polarisatie balk splitter (PBS).
- Plaats een gleuf te selecteren de excitatie golflengtegebied (475-495 nm). Gebruik een reflecterende spiegel na te denken het gefi....
- Gebruik een supercontinuum laserbron als de bron van de laser systeem.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Figuur 4a toont een transversale OCT beeld van het netvlies van een rat. Figuur 4b -4 c Toon de dezelfde retinale transversale beelden van OCTA- en oSLO vFA verworven op hetzelfde moment. De oSLO kunt transversale FA analoog aan de OCT B-scan. In vergelijking met OCTA identificeert de oSLO vFA transversale afbeelding duidelijk de vaartuigen in de zenuw vezel laag (NFL) en ganglion cel (GCL) en haarvaten in Meervo.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Wij hebben hier, oSLO, een in vivo volumetrische fluorescerende retinal imaging techniek met een FOV van meer dan 30 ° beschreven. In vergelijking met de LGO, een huidige standaard van zorg imaging methode in oogheelkunde, oSLO biedt een soortgelijke 3D-imaging vermogen nog kunt fluorescentie contrast dat OCT is niet gevoelig voor. Het voordeel van oSLO is dat het vereist slechts één raster scan, en dus kan de naadloze combinatie van LGO, twee complementaire technieken te voorzien van structurele en fluoresceren.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Ji Yi heeft een hangende patent voor oSLO. De andere auteur verklaren geen concurrerende financiële belangen.
Dankbetuigingen
Financiering afkomstig is van de medische Evans Stichting financiering uit Boston Medical Center evenals een sub-contract van NIH 5R01CA183101, BU-CTSI piloot verlenen 1UL1TR001430, BU-Joslin proefprogramma en BU-CTSI KL2TR001411.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Supercontinuum Laserbron | NKT Photonics | SuperK EXTREME EXU-OCT6 | |
| Dichroïsche spiegel (DM1) | Thorlabs | DMLP650R | |
| Dichroïsche spiegel (DM2) | Chroma | ZT514/1064rpc | |
| Dichroïsche spiegel (DM3) | Thorlabs | DMLP900R | |
| Single Mode Fiber (SMF 1) | Thorlabs | P3-460B-FC-2 | |
| Single Mode Fiber (SMF 2) | Thorlabs | P3-780A-FC-2 | |
| Optische vezelkoppeling | Thorlabs | TW850R5A2 | |
| 1:1 Telescoop systeem | Thorlabs | AC254-100-A×2 | |
| 3:1 Telescoop systeem | Thorlabs | AC254-150-A×2 | |
| 3:1 Telescoop systeem | Thorlabs | AC254-50-A×2 | |
| Galvo spiegels (GM1,GM2) | Thorlabs | GVS201×2 | |
| De-scan Galvo spiegels (GM3) | Thorlabs | GVS011 | |
| Objectieflens | Olympus | UplanSApo 20×/0.75 | |
| Eind beeldvorming systeem | Olympus | UplanFL N 10×/0.3 | |
| Eind beeldvorming systeem | Computar | 12-36mm/1:2.8 | |
| Camera | PCO | Pco.pixelfly usb | |
| Filter | Thorlabs | FEL0800 | |
| Gemonteerde continu variabele ND-filter | Thorlabs | NDC-50C-4M-A | |
| Line scan camera | Thorlabs | SPL2048-140K | |
| Analoge uitvoer board (AO1) | National Instrument | PCI-6731 | |
| Analoge uitvoer board (AO2) | National Instrument | PCIe-6351 | |
| Long pass filter | Thorlabs | FEL0800 |
Referenties
- Webb, R. H., Hughes, G. W., Delori, F. C. Confocal scanning laser ophthalmoscope. Applied Optics. 26 (8), 1492-1499 (1987).
- Roorda, A., et al. Adaptive optics scanning laser ophthalmoscopy. Optics Express. 10 (9), 405-412 (2002).
- Huang, D., et al.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
Meer artikelen verkennen
Volumetrische fluoresceïne-angiografiebeeldvorming van de retinale microvasculatuurfluorescentie-beeldvorming van het netvliesdriedimensionale beeldvorming van het netvliesbeeldvorming met een groot gezichtsveldvisualisatie van retinale capillairendiagnose van diabetische retinopathiemultimodale beeldvorming van het netvlies
