Qui, presentiamo un protocollo per stabilire un'induzione della perdita dell'udito conduttiva replicabile tramite la puntura chirurgica della membrana tipopanica e la verifica mediante la visualizzazione dell'otoscopio e la valutazione comportamentale tramite clap startle.
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Articolo metodologico
Semplice induzione chirurgica della perdita dell'udito conduttiva con verifica utilizzando la visualizzazione dell'otoscopio e la risposta di clap di clap di comportamento in ratto
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'ipoacusia conduttiva (CHL) è un'imposizione uditiva prevalente negli esseri umani. L'obiettivo del protocollo è descrivere una semplice procedura chirurgica per indurre CHL nei roditori. Il protocollo dimostra CHL da puntura a membrana timpanica. La verifica della chirurgia CHL è stata effettuata mediante esame di otoscopio e valutazione comportamentale mediante risposta clap startle, sia replicabile che affidabile, e sono semplici metodi per dimostrare che si è verificata la perdita dell'udito. La semplice procedura CHL è vantaggiosa per la sua riproducibilità e flessibilità nei diversi inseguimenti nella ricerca sulla perdita dell'udito. I limiti di indurre CHL con un approccio chirurgico sono associati alla curva di apprendimento per eseguire la procedura chirurgica e la fiducia nell'esame audiologico. L'induzione di un'ipoacusia da parte della CHL consente di studiare facilmente le manifestazioni neurali e gli esiti comportamentali della perdita dell'udito.
Introduzione
La prevalenza della perdita dell'udito nei bambini e negli adulti è di circa il 19,5%1 e 15,2%2 rispettivamente. Tuttavia, circa il 39,3% di tutti i neonati con uno screening acustico anomalo non riceve un trattamento correttivo come riportato dai Centers for Disease Control3. La perdita dell'udito è una condizione ampiamente studiata e il roditore è un modello robusto per studiare i normali disturbi dell'udito e dell'udito4,5,6,7,8
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Protocollo
L'attuale studio e le procedure sono stati approvati dai comitati etici della ricerca sugli animali della City University di Hong Kong, dell'Università di Hong Kong e del Dipartimento della Salute della Regione Amministrativa Speciale di Hong Kong.
1. Animali
- Utilizzare ratti Sprague-Dawley (SD) di due mesi (N - 90, 200-250 g).
NOTA: i roditori sono stati forniti dall'unità animale da laboratorio accreditata dell'Università di Hong Kong. - Mantenere i ratti sotto una temperatura costante di 25 gradi centigradi e del 60-70% di umidità presso l'Unità di Ricerca Animale di Laboratorio.
- Casa roditori in cicli di l....
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Risultati
La semplice procedura CHL è stata eseguita su 90 ratti e da questo gruppo 2 ha avuto sanguinamento significativo e 2 non hanno avuto perdita dell'udito il giorno successivo, come valutato da clap startle comportamentale. Questi quattro ratti sono stati scartati. I ratti dovrebbero essere scartati come descritto dai motivi della discussione a causa di complicazioni. L'induzione di foratura e/o malleus spostamento/rimozione di malleus (Figura 2B) provoca CHL, c.......
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Discussione
Descriviamo una semplice induzione chirurgica di CHL con verifica utilizzando la visualizzazione dell'otoscopio e la risposta comportamentale dell'applauso nel ratto. Qui dimostriamo il metodo sul ratto e in precedenza questo metodo è stato applicato a gerbilli e topi. Il metodo può essere facilmente adottato per altri roditori. L'induzione di CHL consente lo studio di una sottile forma di perdita dell'udito che si manifesta nelle alterazioni corticali uditive e nei risultati comportamentali psicofisici.......
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Dichiarazioni
Gli autori non dichiarano conflitti di interessi finanziari o non finanziari.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto in parte dall'Hong Kong Research Grants Council, Early Career Scheme, Project #21201217 to C. L., per il progetto Brain mapping ha guidato l'elettrofisiologia con applicazioni nella ricerca sull'inquinamento acustico e acustico. Ringraziamo il Posgrado en Ciencias Biomédicas, l'Instituto de Neurobiologa dell'Universidad Nacional Autnoma de México (UNAM), il Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (CONACyT) México per la Graduate Fellowship 578458 a FAM Manno.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Guanti in lattice, polivinile o nitrile | AMMEX | Utilizzare guanti senza polvere Forbici | |
| (vedi Fig. 1b) | RWD Life Science | S11035-08 | Lunghezza totale 8,0 cm, con tagliente da 3,5 mm, o micro pinze simili. Le pinzette standard con azione a molla saranno sufficienti |
| Otoscopio mini 3000 | HEINE | D-008.70.120M | L'otoscopio LED standard sarà sufficiente |
| per ratti o topi | JAX labs | Qualsiasi piccolo roditore | |
| Piccola gabbia per roditori | Tecniplast | 1284L | Servono due gabbie per separare il roditore CHL dal roditore udente. Se i roditori sono a diretto contatto tra loro, si spaventeranno a vicenda. Dimensioni della gabbia 365 x 207 x 140 mm, superficie del pavimento: 530 cm2/82,15 in2 |
Riferimenti
- Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. Change in prevalence of hearing loss in US adolescents. The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).
- Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V.
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Ristampe e permessi
