Summary

Ethanol-induzierte zervikalen sympathischen Ganglion Block-Anwendungen für die Förderung der Eckzahn minderwertig alveoläre Nervenregeneration mit einer künstlichen Nerv

Published: November 30, 2018
doi:

Summary

Wir bewerten die Wirkung der zervikalen sympathischen Ganglion Block auf Nerv Reparatur mit künstlichen Nerv Leitungen. Männliche Beagle Hunde wurden jeweils mit einer künstlichen Nerv über einen 10 mm Spalt im linken minderwertigen alveoläre Nerv implantiert; linken zervikalen sympathischen Ganglion wurde blockiert, durch die Injektion von 99,5 % Ethanol über laterale Thorakotomie.

Abstract

Polyglycolic Säure Kollagen (PGA-C) Rohre sind Bio-resorbierbaren Nerv Rohre gefüllt mit Kollagen Mehrkammer-Struktur, bestehen aus dünnen Kollagen Filme. Günstige klinische Ergebnisse erzielt werden, wenn diese Rohre für die Behandlung von Geschädigten schlechter als alveoläre Nerv (IAN) verwenden. Ein entscheidender Faktor für die erfolgreiche Nervenregeneration mit PGA-C Röhren ist Blut-Versorgungsmaterial des umgebenden Gewebes. Zervikalen sympathischen Ganglion Block (CSGB) erstellt eine sympathische Blockade in der Kopf-Hals Region damit Erhöhung des Blutflusses in der Gegend. Um eine ausreichende Wirkung zu gewährleisten, muss die Blockade mit Lokalanästhetika ein bis zwei Mal täglich für mehrere Wochen hintereinander verabreicht werden; eine Herausforderung bei der Erstellung Tiermodelle zur Erforschung dieser Technik. Um diese Einschränkung zu beheben, haben wir eine Ethanol-induzierten CSGB in einem Eckzahn Modell der langfristigen Steigerung des Blutflusses in der orofazialen Region entwickelt. Wir prüfen, ob IAN Regeneration über PGA-C Rohr Implantation durch dieses Modell verbessert werden kann. Vierzehn Beagles waren jeweils mit einem PGA-C-Rohr über einen 10 mm Spalt in der linken IAN implantiert. Die IAN befindet sich innerhalb des Unterkiefers Kanals von Knochen umgeben, deshalb wählten wir piezoelektrischen Chirurgie, bestehend aus Ultraschall-Wellen für die Verarbeitung von Knochen, um den Nerv und Gefäß Verletzungsrisiko zu minimieren. Mit diesem Ansatz wurde ein gutes OP Ergebnis erhalten. Eine Woche nach der Operation wurden sieben dieser Hunde linken CSGB durch Injektion von Ethanol unterzogen. Ethanol-induzierte CSGB führte zu verbesserte Nervenregeneration, was darauf hindeutet, dass die erhöhte Durchblutung effektiv Nervenregeneration IAN Mängel fördert. Diese Hunde-Modell kann zu weiterer Forschung über die langfristigen Auswirkungen der CSGB beitragen.

Introduction

Traumatische Verletzungen des minderwertigen alveoläre Nervs (IAN) ist in vielen Fällen iatrogene, häufig verursacht durch die Extraktion der dritten Molaren oder die Platzierung von Zahnimplantaten1,2,3. Verletzungen der IAN kann führen zu Defiziten in der thermischen und berühren Empfindungen sowie Parästhesien, Dysästhesien, Hypoesthesia und Allodynie. Nervenverletzung ist nicht nur durch eine konservative Therapie, sondern auch durch andere Methoden, einschließlich Nähen und Autotransplantation Platzierung behandelt. Diese Methoden haben jedoch Nachteile, die häufig das Fehlen der Symptom-Verbesserung und neurologische Defekte an der Spender Seite4,5,6.

Die künstlichen Nerv-Polyglycolic Säure-Kollagen (PGA-C) Rohr wurde ursprünglich in Japan entwickelt. Es ist ein Bio-resorbierbaren Rohr mit seiner inneren Lumen, gefüllt mit einer spongiformen Kollagen7. Im Tierversuch dieses Rohr wurde zur Nervenregeneration bei Beagle-Hunden mit peroneus defekt zu verbessern, und wurde gezeigt, dass höhere Verwertung als autologe Nerv Transplantation8zu fördern. Die klinische Anwendung der PGA-C Röhre begann im Jahr 2002 bei Patienten mit peripheren Nervenverletzungen. Darüber hinaus wurden günstige klinische Ergebnisse bei der Behandlung von Trigeminus Neuropathie (IAN und lingual Nerv)9,10,11erreicht. Ein entscheidender Faktor für erfolgreiche Nervenregeneration mit PGA-C Röhren ist Blut-Versorgungsmaterial zu den umliegenden Gewebe8. Zervikalen sympathischen Ganglion Block (CSGB) schafft eine sympathische Blockade in der Kopf-Hals-Region und erhöht den Blutfluss zu den jeweiligen innervierten Bereich12; so hat es bei der Behandlung von komplexen regionalen Schmerzsyndrom und Herz-Kreislauf-Insuffizienz13,14,15eingesetzt. Allerdings gab es nur wenige experimentelle Untersuchungen über die Wirksamkeit der CSGB in immer mehr Blut fließen16,17. Um ausreichende CSGB Effizienz zu gewährleisten, muss die Blockade zusammen mit Lokalanästhetika ein-bis zweimal täglich für mehrere Wochen angewendet werden und stellen somit eine Herausforderung beim Generieren von Tiermodellen um diese Technik zu untersuchen. Bewältigung dieser Einschränkung in einer früheren Studie entwickelten wir ein eckzahn des langfristigen erhöht den Blutfluss in der orofazialen Region18. Das Modell wurde generiert durch die Durchführung einer CSGB durch die Injektion von 99,5 % Ethanol. Wir bewerten die oralen Mukosa Blutfluss und nasale Hauttemperatur durch Laser-Doppler-Flowmetry und Infrarot-Thermografie einmal pro Woche für 12 Wochen. Wir fanden, dass die Durchblutung der orofazialen Region für 7 – 10 Wochen in diesem Modell erhöht wurde.

In der vorliegenden Studie haben wir die Auswirkungen der Ethanol-induzierte CSGB auf Nervenregeneration ausgewertet.
Das PGA-C-Rohr wurde über einen 10 mm Spalt in der linken IAN Beagle Hunde implantiert. Eine Woche später wurde CSGB durchgeführt, durch die Injektion von Ethanol. Drei Monate nach der Operation, führten wir eine Vielzahl von elektrophysiologischen, histologische und morphologische Studien zur Bewertung der Auswirkungen von CSGB auf Nervenregeneration. Wir bieten ein detailliertes Protokoll für IAN Rekonstruktion mit einem PGA-C Rohr und Ethanol-induzierten CSGB.

Protocol

Diese Studie wurde im Einklang mit den Leitlinien für die Pflege und Nutzung von Tieren und den vom Ausschuss angenommenen für Animal Research der Universität Kyōto (Kyoto, Japan, Zulassungsnummer: R-16-16). Alle Anstrengungen wurden unternommen, um die Leiden der Tiere zu minimieren, und alle Abschnitte dieses Berichts befolgen die Ankunft (Animal Research: Meldung von in Vivo Experimente) Richtlinien. 1. Herstellung von der PGA-C-Schlauch Um die künstlichen Nerv Leitu…

Representative Results

Wir beobachteten eine Zunahme der Gesichtshaut Temperatur der blockierten Seite 1 Woche nach der linken CSGB (Abbildung 8). Auf 3 Monate nach dem Wiederaufbau der PGA-C-Rohr im Bereich Wiederaufbau wurde aufgenommen und Regeneration des Nervs minderwertig alveoläre verzeichneten die Wiederaufbau-only und Wiederaufbau + CSGB Gruppen (Abbildung 9A, B)<su…

Discussion

Wir präsentieren eine effiziente Methode für IAN Regeneration mithilfe einer bioresorbierbare Nerv Röhre in Kombination mit Ethanol-induzierten CSGB. Für diese Studie verwendet wir Hunde, seit anderen Tiermodellen wie Mäuse, Ratten und Kaninchen, eine kurze Lebenserwartung und kleine Körpergröße haben, und daher können nicht verwendet werden, um die genaue chirurgische Eingriffe. Da die IAN gelegen innerhalb des Unterkiefers Kanals von Knochen umgeben ist, ist eine chirurgische Technik notwendig, Nerven und Blut…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Arbeit wurde unterstützt durch die Abteilung bioartifizielle Organe in Kyoto University Institute for Frontier Medical Science. Wir möchten das tierärztliche Personal des Instituts für Frontier Medical Science danken.

Materials

NMP Collagen PS Nippon Meatpackers 301-84621 Atelocollagen extracted from young porcine skin by enzyme treatment
Surgical clippers Roboz Surgical Instrument Company RC-5903
Disposable scalpel (No.15) Kai medical  219ABBZX00073000
VarioSurg3 Nakanishi VS3-LED-HPSC, E1133 Piezoelectric surgery for bone processing
4-0 nylon sutures Ethicon 8881H
8-0 nylon sutures Ethicon 2775G
Isepamicin sulfate Nichi-Iko 620005641
Disposable scalpel (No.10) Kai medical  219ABBZX00073000
30-gauge needle  Nipro 1134
1-0 absorbable stitches Ethicon J347H
3-0 Nylon stitches Ethicon 8872H
Neo Thermo NEC Avio TVS-700 Infrared thermography 
Neuropack Σ  NIHON KOHDEN MEB-5504 Orthodromic recorder for electrophysiological recording
Toluidine Blue  Sigma-Aldrich  T3260-5G
Light microscope Keyence BZ-9000
Mouse anti-human neurofilament protein monoclonal antibody DAKO N1591
Polyclonal rabbit anti-S100 antibody DAKO Z0311
Transmission electron microscopy Hitachi High Technologies Hitachi H-7000
Dynamic cell count Keyence BZ-H1C Software for morphological evaluation

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Shionoya, Y., Sunada, K., Tsujimoto, G., Shigeno, K., Nakamura, T. Ethanol-Induced Cervical Sympathetic Ganglion Block Applications for Promoting Canine Inferior Alveolar Nerve Regeneration Using an Artificial Nerve. J. Vis. Exp. (141), e58039, doi:10.3791/58039 (2018).

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