Summary

ऊतक Microcolumns कटाई के लिए उपकरण

Published: October 25, 2018
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Summary

यहां हम संचयन सुई कि दाता साइट scarring के कारण के बिना पूर्ण मोटाई त्वचा ऊतक एकत्र करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता उत्पादन के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन । सुई उच्च मात्रा संचयन को प्राप्त करने के लिए एक सरल संग्रह प्रणाली के साथ जोड़ा जा सकता है ।

Abstract

इस पांडुलिपि एक प्रयोगशाला उपकरण के लिए उत्पादन की प्रक्रिया का वर्णन, बंद से बना-शेल्फ घटकों, कि पूर्ण मोटाई त्वचा ऊतक के microcolumns इकट्ठा किया जा सकता है । microcolumns के छोटे आकार दाता साइटों को जल्दी चंगा करने की अनुमति देता है दाता साइट scarring के कारण के बिना, जबकि कटाई पूर्ण मोटाई ऊतक सभी सेलुलर और त्वचा ऊतक के extracellular घटकों के शामिल करने के लिए सक्षम बनाता है, उन सहित जुड़े गहरे चमड़े के क्षेत्रों और adnexal त्वचा संरचनाओं, जो अभी तक सफलतापूर्वक पारंपरिक ऊतक इंजीनियरिंग तकनीक का उपयोग reproduced हो के साथ । microcolumns त्वचा घाव में सीधे लागू किया जा सकता चिकित्सा बढ़ाने के लिए, या वे अंय ऊतक इंजीनियरिंग दृष्टिकोण के लिए ऑटोलॉगस सेल/ कटाई सुई मानक hypodermic सुई को संशोधित करके बनाया जाता है, और वे ऊतक की छोटी मात्रा में कटाई या एक सरल चूषण आधारित संग्रह प्रणाली के साथ युग्मित के लिए अकेले इस्तेमाल किया जा सकता है (भी आमतौर पर उपलब्ध प्रयोगशाला की आपूर्ति से बनाया) के लिए बड़े पशु मॉडलों में अध्ययन की सुविधा के लिए उच्च मात्रा संचयन ।

Introduction

ऑटोलॉगस त्वचा कलम बांधने का कार्य घाव की मरंमत के मुख्य आधार है, लेकिन यह दाता साइट की कमी और रुग्णता द्वारा सीमित है, हाल के दशकों में किए गए प्रयासों के लिए अग्रणी नए चिकित्सीय विकल्प विकसित करने के लिए पारंपरिक त्वचा1,2 भ्रष्टाचार की जगह . हम हाल ही में संचयन त्वचा का एक वैकल्पिक विधि का दोहन करने के लिए पूर्ण मोटाई त्वचा भ्रष्टाचार जबकि दाता साइट रुग्णता को कम करने का लाभ । छोटे (~ ०.५ mm व्यास) “microcolumns” के रूप में पूर्ण मोटाई त्वचा का संग्रह करके, दाता साइटों को तेजी से चंगा कर रहे है और सामांय परिस्थितियों में scarring बिना (संभावित अपवादों के लिए, नीचे चर्चा अनुभाग देखें)3। Microcolumns घाव बंद करने में तेजी लाने, संकुचन3को कम करने, और एपिडर्मल और चमड़े का सेल प्रकार और कार्यात्मक adnexal संरचनाओं4, जिनमें से कई में कमी कर रहे हैं की एक विविध रेंज बहाल करने के लिए घायल बिस्तरों में सीधे लागू किया जा सकता है पारंपरिक विभाजन-मोटाई या वर्तमान में इंजीनियरी त्वचा को भ्रष्टाचारी5विकल्प । microcolumns की क्षमता चिकित्सा बढ़ाने के लिए और उनके दाता साइटों के scarring के बिना चंगा दोनों स्वतंत्र रूप से अंय अनुसंधान6,7समूहों द्वारा मांय किया गया है ।

हमने पहले स्केल8पर microcolumns के संग्रह को सक्षम करने के लिए एक प्रयोगशाला संचयन प्रणाली विकसित की है; हालांकि, इस प्रणाली के कई अनुकूलित घटक है कि व्यापक रूप से उपलब्ध नहीं है से बना है । यहां, हम विस्तार से फसल की सुइयों के उत्पादन के लिए प्रक्रिया का वर्णन है, साथ ही सरल संग्रह प्रणालियों, ज्यादातर बंद से बना-the-शेल्फ घटकों, कि उच्च मात्रा संचयन को प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । इस पांडुलिपि में वर्णित तंत्र इन विट्रो और पशु काम के लिए उपयुक्त है, लेकिन मनुष्यों में उपयोग के लिए नहीं । मानव में इस तकनीक को लागू करने के लिए एफडीए मंजूरी के साथ एक नैदानिक उपकरण व्यावसायिक रूप से उपलब्ध है, लेकिन विस्तार से यहां चर्चा नहीं की जाएगी ।

Protocol

सभी जीवित पशुओं और पशु ऊतक नमूनों को शामिल काम मैसाचुसेट्स जनरल अस्पताल संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) द्वारा अनुमोदित किया गया है । 1. कटाई की सुइयों का उत्पादन उत्पादन अवस्था का …

Representative Results

कटाई सुई लगभग एक 80-90% सफलता दर के साथ पूर्ण मोटाई त्वचा ऊतक के microcolumns इकट्ठा करने में सक्षम होना चाहिए, और प्रत्येक microcolumn एपिडर्मिस, dermis, और कुछ चमड़े के नीचे वसा (चित्रा 4) शामिल होना चाह?…

Discussion

यहां वर्णित विधियों में vivo बड़े पशु अध्ययन के लिए पर्याप्त मात्रा में ऊतक microcolumns के संग्रह को सक्षम करने के लिए, व्यावसायिक रूप से उपलब्ध प्रयोगशाला की आपूर्ति से बने उपकरणों का उपयोग करना है । यह उपकर…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

यह काम सेना, नौसेना, NIH, वायु सेना, VA और स्वास्थ्य मामलों के भाग में समर्थन के लिए AFIRM द्वितीय प्रयास का समर्थन किया गया, पुरस्कार सं के तहत । W81XWH-13-2-0054. अमेरिकी सेना चिकित्सा अनुसंधान अधिग्रहण गतिविधि, ८२० चांडलर स्ट्रीट, किला छल, एमडी 21702-5014 पुरस्कार और प्रशासन अधिग्रहण कार्यालय है । राय, व्याख्या, निष्कर्ष, और सिफारिशें लेखक के वे है और जरूरी रक्षा विभाग द्वारा समर्थन नहीं कर रहे हैं ।

Materials

Diamond wheel Dremel 545
Hypodermic needle (19G) Fisher Scientific 14-840-98 Other needle sizes could be used, depending on experimental needs
Stome wheel Dremel 540
Syringe (20mL with luer lock) Fisher Scientific 22-124-967
Suction adapter Tulip Medical PA20BD Optional, for high volume harvesting
Suction canister Fisher Scientific 19-898-212 Optional, for high volume harvesting. Sterilize before use.
Suction tubing Medline DYND50216H Optional, for high volume harvesting

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Cite This Article
Tam, J., Farinelli, W., Franco, W., Anderson, R. R. Apparatus for Harvesting Tissue Microcolumns. J. Vis. Exp. (140), e58289, doi:10.3791/58289 (2018).

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