Vi presenterer en protokoll for å indusere og oppdage CMHs forårsaket av LPS injeksjon i Sprague-Dawley rotter, som kan benyttes i fremtiden forskning undersøkelser på patogenesen av CMHs.
Et microhemorrhages (CMHs) er vanlig hos eldre pasienter, og er korrelert til ulike nevropsykiatriske lidelser. Etiologien for CMHs er kompleks, og neuroinflammation er ofte observert som en samtidig forekomst. Her beskriver vi en sub akutt CMHs rotte modell av lipopolysakkarid (LPS) injeksjon, samt en metode for å oppdage CMHs. systemisk LPS injeksjon er relativt enkel, økonomisk og kostnadseffektiv. En stor fordel av LPS injeksjon er dens stabilitet å indusere betennelse. CMHs forårsaket av LPS injeksjon kan oppdages av brutto observasjon, hematoxylin og eosin (han) flekker, Perl er prøyssiske flekker, Evans blå (EB) dobbel-merking og magnetisk resonans imaging-mottakelighet vektet imaging (MRI-SWI) teknologi. Til slutt, andre metoder for å utvikle CMHs dyr modeller, inkludert deres fordeler og/eller ulemper, er også omtalt i denne rapporten.
Klassisk cerebral microhemorrhages (CMHs) refererer til lille perivascular forekomster av blod nedbrytningsprodukter som hemosiderin fra røde blod celler i hjernen1. Ifølge Rotterdam skanne Studien fant CMHs nesten 17,8% av personer i alderen 60-69 år og 38,3% i de over 80 år2. Utbredelsen av CMHs hos eldre er relativt høy, og en sammenheng mellom akkumulering av CMHs og kognitive og nevropsykiatriske dysfunksjon har vært etablert3,4. Flere dyr modeller av CMHs har nylig blitt rapportert, inkludert gnager modeller av type IV collagenase stereotaxic injeksjon5, APP transgene6, β-N-methylamino-L-alanin eksponering7og hypertensjon8, med CMHs indusert av systemisk betennelse som en av de fleste valgene. Fisher et al. 9 først brukt LPS avledet fra Salmonella typhimurium for å utvikle en akutt CMHs musemodell. Deretter rapportert samme gruppe utviklingen av en sub akutt CMHs musemodell bruker den samme tilnærmingen2.
LPS er regnet som en standardisert inflammatorisk stimulans via intraperitoneal injeksjon. Tidligere studier har bekreftet at LPS injeksjon føre neuroinflammation som gjenspeiles av store mengder microglia og astrocytter aktivisering i dyr modeller2,10. Videre er en positiv korrelasjon mellom aktivering av neuroinflammation aktivisering og antallet CMHs etablert2,10. Basert på disse tidligere studier, vi ble bedt om å utvikle en CMHs rotte modell av intraperitoneal injeksjon av LPS.
Fremskritt i oppdagelsen teknologiene har ført til en økning i antall forskning undersøkelser på CMHs. Mest allment anerkjent metoder av oppdager CMHs inkluderer gjenkjenning av røde blodlegemer av hematoxylin og eosin (han) flekker, ferric jern gjenkjenning av prøyssiske blå flekker9, oppdagelsen av Evans blå (EB) deponering av immunofluorescence bildebehandling og 7.0 Tesla magnetisk resonans imaging-mottakelighet vektet imaging (MRI-SWI)10. Studien har som mål å utvikle en metode for screening for CMHs.
Studier på CMHs har økt i de siste årene. Mekanismen for CMHs er imidlertid uklart, spørre forskere å etablere dyremodeller som simulerer denne bestemt tilstanden. For eksempel Hoffmann et al. utviklet en hypoksi-indusert CMHs musemodell som viser at CMHs er forårsaket av hypoksi og avbrudd i cerebrovascular autoregulation12. Reuter et al. 5 etablert en CMHs modell i APP23-transgene mus, som viste at cerebral amyloid angiopathy (CAA) spiller en vikti…
The authors have nothing to disclose.
Vi takker lærer Jian Feng Lei og kolleger fra hovedstaden medisinske universitet etter veiledning under MRI. Vi takker også Jing Zeng fra ved Institutt for nevrologi, andre folks sykehuset av Yichang for teknisk støtte.
LPS | Sigma-Aldrich | L-2630 | for inflammation induction |
EB | Sigma-aldrich | E2129 | for EB leakage detection |
DAPI dying solution | Servicbio | G1012 | count medium for IF |
Perl’s Prussian staining | Solarbio | G1424 | Kit for Prussian staining |
HE staining | Solarbio | G1120 | Kit for HE staining |
chloral hydrate | Sigma-Aldrich | 47335U | For anesthesia |
phosphate buffer saline (PBS) | Solarbio | P1022 | a kind of buffer solution commonly used in experiment |
0.9% saline solution | Hainan DonglianChangfu Pharmaceutical Co., Ltd., China | solution for perfusion | |
paraformaldehyde | Sigma-Aldrich | 158127 | a kind of solution commonly used for fixation |
20% sucrose solution | Solarbio | G2461 | a kind of solution commonly used for fixation |
30% sucrose solution | Solarbio | G2460 | a kind of solution commonly used for fixation |
vet ointment | Solcoseryl eye gel, Bacel, Switzerland | for rat's eyes protection |