Summary

لوح منافسة مقايسة كتقييم أولى سريع لقمع المرض

Published: October 28, 2018
doi:

Summary

قدم هو بروتوكول مقايسة منافسة لوحة تحديد ما إذا كان سماد محددة من المحتمل أن تحتوي على البكتيريا والفطريات التي تقمع نمو سولاني مرضى.

Abstract

والهدف هو تطوير وتحسين بسيط، بأسعار معقولة وفعالة الاختبار الأحيائي للكشف عن المرض القدرة القمعية السماد محددة ضد الفطريات soilborne سولاني مرضى. سولاني ر رض طائفة واسعة من مضيفي النباتات في جميع أنحاء العالم. تعيش في التربة سابروفيتي الفطر وينمو بسرعة في المياه بسيطة أجار وسائط الإعلام. فحص لوحة طريقة سريعة لمقارنة كومبوستس لقدرتها على إبطاء نمو سولاني ر.. كما يرتبط المقايسة جيدا مع قمع لمسببات الأمراض الفطرية الأخرى soilborne البقاء على قيد الحياة سابروفيتيس في التربة مثل الآفات المبكرة م وذبول الفوزاريوم وتعفن جذور لفحة وتعفن جذور بيثيوم.

Introduction

مرضى يمثل مجموعة معقدة واسعة من الفطريات، من دونك كوكوميريس ثاناتيفوروس (فرانك) الذي (anamorph = Kühn سولاني مرضى ) هو الممرض تسبب تعفن جذور والتثبيط قبالة1. سولاني مرضى هو ممرض عدوانية وسابروفيتي التي يمكن البقاء على قيد الحياة ك sclerotia تحت الظروف البيئية السلبية1. نتيجة لذلك فإنه توزيع عالمي ويمكن أن يسبب المرض على طائفة واسعة من مضيفي النباتات بما في ذلك الباذنجانية وقرنيات و Asteraceae والفصيلة الكرنبيه أسفر عن خسائر اقتصادية جسيمة.

السماد لديه القدرة على إيواء لذالك وكلاء لبعض مسببات الأمراض النباتية2. لكن ليس كل كومبوستس على حد سواء كما أنها تؤثر على جميع مسببات الأمراض وكذلك3. وقد الكربون الخشبية اللجنين أعلى نسب السليلوز من التبن أو القش من الكربون على أساس كومبوستس. سولاني ر. يفضل الكربون متاحة بسهولة في القش. وفي المقابل، فطريات المكافحة البيولوجية، مثل الترايكوديرما spp.، تكون أكثر فعالية عندما الكربون أقل متاحة بسهولة. الفطريات المفيدة والبكتيريا في السماد يمكن منع الأمراض النباتية من خلال المنافسة أو الخصومة أو تنظيم نمو النبات3. يكشف التحليل المقترح أساسا العداء التي تم إنشاؤها بواسطة إنتاج المضادات الحيوية، أو اكوينزيميس، أو تشيلاتورس التي تضر بمسببات المرض.

مصنع المقايسة معيار الذهبي لتحديد ما إذا كان كومبوستس صالح أو ردع نمو النبات4. بيد أن المقايسة النباتية مضيعة للوقت (أسابيع إلى أشهر) لإكمال التي قد تكون أطول من المطلوب، ويتطلب العمل أكثر لاستخراج النباتات ذات الجذور لقياس شدة نظم جذور. قوية نسبيا، ولكن أسرع فحوصات (الأيام) سيكون أمرا مثاليا لبرامج مراقبة الجودة. والهدف من هذه الورقة لإثبات اختبار نسبيا سريعة ودقيقة للتنبؤ بإمكانات القمعية من السماد العضوي. وكان نمط الأسلوب بعد الفانو et al. كانت تضعف 5 مع استثناءين، مقتطفات السماد واستخدمت أجار المياه بدلاً من البطاطا الدكستروز أجار (PDA). سولاني ر ينمو بسرعة في المياه بسيطة أجار وسائل الإعلام حين المساعد الشخصي الرقمي تشجع نمو البكتيريا والفطريات الأخرى الملوثة الثقافة6.

هذا التحليل لوحة يخدم كمؤشر لقمع التي تنطبق على مجموعة من مسببات الأمراض النباتية التي تعيش في التربة سابروفيتيس بما في ذلك سولاني ر7م الآفات المبكرة والذبول مغزلاويه، تعفن جذور لفحة، وتعفن جذور بيثيوم. تحليل المنافسة لوحة مفيد على الشاشة مجموعة من منتجات السماد العضوي لتحتوي على المجتمعات المحلية للميكروبات التي تكون بمثابة عوامل المكافحة البيولوجية للتربة المسببة للأمراض. وكان المقايسة أحد المؤشرات الأكثر اتساقا لقمع المرض في6،منتجات السماد التجاري8. تم اختيار المنتجات على التغيير في وصفه، والنضج، وعملية الإنتاج.

Protocol

1. إعداد مقدما الثقافة الفطرية الرئيسية (اختبار الكائن الحي) طلب من “جمع نوع الثقافة الأمريكية”، “جمع علم الأحياء الدقيقة”9، تيليومورف كوكوميريس ثاناتيفوروس (فرانك) (ATCC 10154) أو 4031 ميا. وبدلاً من ذلك: جمع يعزل المحلية كما فعل صاحبا. شتلة فجل الأحمر (الزعفران ف?…

Representative Results

وينبغي الانتهاء من السماد مستقرة وناضجة، هما المصطلحات التي كثيرا ما تستخدم بالتبادل، حيث يمكن تعبئتها ونقلها بشكل أمن، ولا تسبب آثار ضارة أثناء الاستخدام النهائي في4. الاستقرار هو مقاومة للتحلل، وعادة ما تحدد باستخدام الأرقام القياسية للنشاط الميكرو…

Discussion

ونعلم من البحوث السابقة، أن بعض كومبوستس فعالة في قمع سولاني ر. وآثار القمعية بسبب الميكروبات الحية في السماد العضوي، لا الخصائص الأحيائية واللااحيائيه السماد6،8. وقد انتقد استخدام التعقيم كوسيلة ‘قتل’ الحجمية لأنه يؤثر على كيمياء الكربون وسائل الإعلا…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

ولاية فيرمونت الزراعية محطة التجربة التنافسية هاتش البرنامج فاتو-HO1609 تمويل البحوث. لين فانغ استخدمت الأسلوب كجزء من بلدها أطروحة ماجستير في جامعة فيرمونت6.

Materials

autoclavable narrow-neck glass conical flask Fisher Scientific 10-040D 125-mL
dehydrated granulated agar Fisher Scientific DF0145-17-0 500 g quantity
heat resistant gloves Fisher Scientific MEMGG1314WL several brands available
Parafilm (strips of 2-3 cm wide) Fisher Scientific PM992 13-374-16 5 or 10 cm widths work
disposable polystyrene petri dishes Fisher Scientific R80116 comes in sleeves of 20/ea or cases of 500
dehydrated potato dextrose agar Fisher Scientific DF0013-15-8 comes in quantities of 100, 500 and 2000 grams
benchtop reciprocal shaker Thomas Scientific 1227Y31 other models will work
water bath ThermoScientific S37363 5L general purpose
clear ruler, flat, at least 10 cm Any use metric rule
ATCC culture American Type Culture Collection ATCC 10154 teleomorph Thanatephorus cucumeris (Frank) (ATCC 10154) or MYA 4031;
lab tape Fisher Scientific 15935 autoclavable and removable, 1" wide preferred
water resistant marker office or scientific supply Sharpie fine tip write sample number on tape

References

  1. Gonzalez Garcia, G., Onco, M. A. P., Susan, V. R. Review. Biology and systematics of the form genus Rhizoctonia. Spanish Journal of Agricultural Research. 4 (1), 55-79 (2006).
  2. Bonanomi, G., Antignani, V., Pane, C., Scala, E. Suppression of soilborne fungal diseases with organic amendments. Journal of Plant Pathology. 89, 311-324 (2007).
  3. Noble, R. Risks and benefits of soil amendment with composts in relation to plant pathogens. Australasian Plant Pathology. 40, 157-167 (2011).
  4. Wichuk, K. M., McCartney, D. Compost stability and maturity evaluation – a literature review. Canadian Journal of Civil Engineering. 37, 1505-1523 (2010).
  5. Alfano, G., Lustrato, G., Lima, G., Vitullo, D., Ranalli, G. Characterization of composted olive mill wastes to predict potential plant disease suppressiveness. Biological Control. 3, 199-207 (2011).
  6. Fang, L. . Biological indicators of compost-mediated disease suppression against the soilborne plant pathogen Rhizoctonia solani. , (2015).
  7. Bonanomi, G., Antignani, V., Capodilupo, M., Scala, F. Identifying the characteristics of organic soil amendments that suppress soilborne plant diseases. Soil Biology and Biochemistry. 42, 136-144 (2010).
  8. Neher, D. A., Fang, L., Weicht, T. R. Ecoenzymes as indicators of compost to suppress Rhizoctonia solani. Compost Science and Utilization. 25 (4), 251-261 (2017).
  9. . ATCC® Mycology Culture Guide Available from: https://www.atcc.org/~/media/PDFs/Culture%20Guides/Mycology_Guide.ashx (2018)
  10. Berns, A. E., Phillip, H., Narres, H. -. D., Burauel, P., Vereecken, H., Tappe, W. Effect of gamma-sterilization and autoclaving on soil organic matter structure as studied by solid state NMR, UV and fluorescence spectroscopy. European Journal of Soil Science. 59, (2008).
check_url/58767?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Neher, D. A., Weicht, T. R. A Plate Competition Assay As a Quick Preliminary Assessment of Disease Suppression. J. Vis. Exp. (140), e58767, doi:10.3791/58767 (2018).

View Video