Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.

Artículo de método

Colección Rápida de Volátiles de Fragancia Floral usando una Técnica de Colección Volátil del Espacio de Cabeza para muestreo de desorción térmica GC-MS

7K visualizaciones

⸱

DOI:

10.3791/58928

⸱

10 de diciembre de 2019

 ,  , 

En este artículo

Resumen

Aquí, presentamos un protocolo para recoger los volátiles de fragancia sorpresal de flores en flor, utilizando un procedimiento de muestreo no destructivo.

Resumen

Se han muestreado fragancias de muchas familias de flores y se han analizado los volátiles. Conocer los compuestos que componen las fragancias puede ser un paso importante para la conservación de las flores que están amenazadas o en peligro de extinción. Debido a que la fragancia floral es fundamental para atraer polinizadores, este método podría utilizarse para comprender mejor o incluso mejorar la polinización. Presentamos un protocolo que utiliza un filtro de aire de carbón portátil y vacío para recoger volátiles de fragancias florales, que luego son analizados por un GC-MS. Mediante el uso de este método, los volátiles de fragancia se pueden muestrear utilizando un método no destructivo con una máquina que se transporta fácilmente. Esta metodología utiliza un procedimiento de muestreo rápido, reduciendo el tiempo de muestreo de 2-3 horas a aproximadamente 10 minutos. Usando GC-MS, los compuestos de fragancia se pueden identificar individualmente, sobre la base de estándares auténticos. Se presentan los pasos utilizados para recopilar datos de fragancia y control, desde la configuración del material hasta la recopilación de la salida de datos.

Introducción

Las flores suelen producir una fragancia utilizada para atraer a los polinizadores. Estas fragancias se componen de muchos compuestos químicos que actúan juntos como una mezcla floral1,2,3. Sin estas fragancias, las flores serían menos propensas a transmitir su información genética usando polinizadores. La fragancia floral se ha documentado en muchas familias de plantas con flores, siendo Orchidaceae una de las familias más comunes estudiadas4. Para entender el papel de la fragancia floral en la polinización, es importante recoger y analizar d....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Protocolo

NOTA: Los perfumes o lociones y productos perfumados no deben usarse durante ninguno de estos procedimientos.

1. Selección de flores

NOTA: Las flores utilizadas pueden ser de crecimiento natural en el medio ambiente o mantenerse bajo condiciones ambientales artificiales. La temperatura, la humedad y el nivel de luz durante la recolección pueden variar en función de las especies de flores específicas utilizadas y del tipo de datos que se recopilan. Por ejemplo, se han recopilado datos durante el día y por la noche de la misma flor para determinar si la fragancia varía a lo largo del día, y se han recopilado tanto de....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Resultados

Los datos representativos del GC-MS se muestran como un cromatograma en la Figura 1. Además del cromatograma, también se proporciona un archivo de datos de resultados(Archivo suplementario 1). Este archivo de datos proporciona el tiempo de retención para cada pico (RT) y una identificación de qué compuesto es ese pico (Biblioteca/ID). Los picos entre las 10:00 y las 15:00 minutos son volátiles florales, debido al peso molecular de los compuestos10. Lo.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Discusión

Aunque esta técnica es increíblemente valiosa por su velocidad de muestreo y portabilidad, una limitación es su uso para especies epífitas, o aquellos que crecen en los árboles y no desde el suelo. En el estudio original10,una de las flores muestreadas fue epífita. Debido a que la máquina es demasiado pesada para colgarlibremente, se debe hacer una base estable y elevada para el muestreo. Además, la máquina se puede conectar a una toma de corriente o alimentada por batería, por lo que si hay un mu.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Divulgaciones

Los autores no declaran conflictos de intereses.

Agradecimientos

USDA-ARS Proyecto de Investigación número 6036-22000-028-00D. El uso de nombres comerciales, de empresas o corporaciones en esta publicación es para la información y conveniencia del lector. Dicho uso no constituye un respaldo o aprobación oficial por parte del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos o del Servicio de Investigación Agrícola de ningún producto o servicio, con exclusión de otros que puedan ser adecuados. Además, el Departamento de Biología de la Universidad de Florida-Lewis y Varina Vaughn Fellowship en Orchid Biology (2017), y una Beca de Investigación de Posgrado de la Universidad de Florida (2014-2018) también proporcionaron fondos. También....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Unión de mamparoCole-PalmerUX-06390-10
Tubo FEPCole-PalmerUX-06407-60
Cromatografía de gasesHewlett Packard6890
Lana de vidrio, silanizadaSigma-Aldrich20411
Revestimiento de entradaAgilent5062-3587
Espectrómetro de masasHewlett Packard5973
Bolsa de hornoReynolds Reynolds Productos de consumo tamañoTurquía
Tenax Adsorbente de polímero porosoSigma-Aldrich11982

Referencias

  1. Knudsen, J. T., Tollsten, L., Bergstrom, L. G. Floral scents- A checklist of volatile compounds isolated by head-space techniques. Phytochemistry. 33, 253-280 (1993).
  2. Dudareva, N. A., Pichersky, E. Biology of floral scent. , CRC Taylor and Francis. Boca Raton, FL. (2006).
  3. Altenburger, R., Matile, ....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Reimpresiones y permisos

Explorar más artículos

Recolección de espacio de cabezaanálisis por GC-MSfiltro de carbón portátilmuestreo no destructivoprocedimiento de muestreo rápidopreparación de bolsas de hornocartucho de filtro de vidriobase de datos Pherobase