सेरेब्रल इस्केमिया का एक माउस मॉडल-रिपरफ्यूजन स्ट्रोक की पैथोफिजियोलॉजी की जांच करने के लिए स्थापित किया गया है । हम distally सही मध्य सेरेब्रल धमनी और सही आम ग्रीवा धमनी और बहाल रक्त प्रवाह के बाद 10 या ४० ischemia के ंयूनतम ।
इस अध्ययन में, एक मध्यम मस्तिष्क धमनी (एमसीए) रोड़ा माउस मॉडल मस्तिष्क ischemia का अध्ययन करने के लिए नियोजित है-reperfusion. एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और विश्वसनीय माउस मॉडल मस्तिष्क ischemia के pathophysiology की जांच के लिए उपयोगी है-reperfusion और स्ट्रोक के साथ रोगियों के लिए संभावित चिकित्सकीय रणनीतियों का निर्धारण । C57BL/6 चूहों के विलीस के वृत्त के एनाटॉमी में भिन्नता सेरेब्रल-इस्केमिया-प्रेरित चोट के बाद उनके infarct मात्रा को प्रभावित करता है । अध्ययनों से संकेत दिया है कि बाहर का एमसीए रोड़ा (mcao) इस समस्या को दूर कर सकते हैं और एक स्थिर infarct आकार में परिणाम. इस अध्ययन में, हम मस्तिष्क ischemia के एक दो पोत रोड़ा माउस मॉडल स्थापित-सही एमसीए करने के लिए रक्त के प्रवाह के व्यवधान के माध्यम से reperfusion । हम distally सही एमसीए और सही आम ग्रीवा धमनी (सीसीए) और ischemia की एक निश्चित अवधि के बाद रक्त के प्रवाह को बहाल ligate । यह इस्कीमिया-रिपरफ्यूजन चोट स्थिर आकार और एक व्यवहार घाटे के एक infarct लाती है । परिधीय प्रतिरक्षा कोशिकाओं को 24 एच घुसपैठ की अवधि के भीतर इस्कीमिक मस्तिष्क घुसपैठ । इसके अतिरिक्त, cortical क्षेत्र में न्यूरोनल हानि एक लंबे समय तक reperfusion अवधि के लिए कम है । इसलिए, यह दो पोत रोड़ा मॉडल मस्तिष्क ischemia के बाद reperfusion अवधि के दौरान प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और न्यूरोनल वसूली की जांच के लिए उपयुक्त है ।
सेरेब्रल इस्केमिया-रिपरफ्यूजन माउस मॉडल ischemia-प्रेरित मस्तिष्क चोट1के pathophysiology की जांच के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया प्रयोगात्मक दृष्टिकोण में से एक है । क्योंकि सेरेब्रल इस्केमिया-reperfusion परिधीय प्रतिरक्षा प्रणाली को सक्रिय करता है, परिधीय प्रतिरक्षा कोशिकाओं इस्कीमिक मस्तिष्क में घुसपैठ और कारण न्यूरोनल क्षति2. इस प्रकार, एक विश्वसनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य माउस मॉडल है कि mimics सेरेब्रल इस्कीमिया-reperfusion स्ट्रोक की pathophysiology समझने के लिए आवश्यक है.
C57BL/6j (बी-6) चूहे स्ट्रोक प्रयोगों में सबसे अधिक इस्तेमाल किया तनाव है क्योंकि वे आसानी से आनुवंशिक रूप से हेरफेर किया जा सकता है । mcao के दो आम मॉडल/reperfusion कि सेरेब्रल ischemia की स्थिति की नकल-reperfusion उपलब्ध हैं । सबसे पहले समीपस् थ mcao का इंट्राएलुमिनल फिलामेंट मॉडल है, जहां सिलिकॉन लेपित फिलामेंट को एमसीएल में रक्त प्रवाह को इंट्रावेक्युलर से बाहर करने के लिए नियोजित कर रहा है; अधिविष् ट रेशा बाद में रक्त प्रवाह को बहाल करने के लिए हटा दिया जाता है3. एक कम रोड़ा उपकोर्टिकल क्षेत्र के एक घाव में परिणाम है, जबकि एक लंबे समय तक रोड़ा अवधि cortical और subcortical क्षेत्रों में infarcts का कारण बनता है । दूसरा मॉडल डिस्टल mcao का बंधाव मॉडल है, जो एमसीए के माध्यम से रक्त के प्रवाह को कम करने के लिए एमसीएल और सीसीए का बहिर्वाहिकीय बंधन शामिल है, जिसके बाद रक्त प्रवाह सीवन और धमनीविस्फार क्लिप4को हटाने के माध्यम से बहाल किया जाता है । इस मॉडल में, cortical क्षेत्रों में एक infarct का कारण बनता है, और मृत्यु दर कम है । क्योंकि mcao/reperfusion मॉडल के बंधाव बाहर एमसीए की साइट का पर्दाफाश करने के लिए craniectomy की आवश्यकता है, साइट आसानी से पुष्टि की जा सकती है, और जांच कि क्या बाहर एमसीए में रक्त प्रवाह प्रक्रिया के दौरान बाधित है सीधा है ।
बी6 चूहे विइस के अपने सर्कल के एनाटॉमी में काफी बदलाव दर्शाते हैं; यह मस्तिष्क के ischemia के बाद infarct मात्रा को प्रभावित कर सकता है-reperfusion5,6,7। वर्तमान में, यह समस्या डिस्टल एमसीए8के बंधाव के माध्यम से दूर किया जा सकता है । इस अध्ययन में, हम एमसीए रक्त प्रवाह अधिविष् ट और ischemia की एक पूर्व निर्धारित अवधि के बाद reperfusion को सक्षम करने के लिए एक विधि स्थापित । सेरेब्रल ischemia के दो पोत रोड़ा-reperfusion मॉडल ischemia की एक निश्चित अवधि के बाद बहाल रक्त प्रवाह के साथ, सही दूरस्थ एमसीए और सही सीसीए के बंधाव के माध्यम से एमसीए क्षेत्र के क्षणिक ischemia लाती है । इस mcao/reperfusion मॉडल स्थिर आकार, मस्तिष्क के एक थोक इस्कीमिक मस्तिष्क में प्रतिरक्षा कोशिकाओं घुसपैठ, और मस्तिष्क इस्कीमिक के बाद एक व्यवहार घाटे-reperfusion के एक infarct लाती है ।
mcao/reperfusion माउस मॉडल आमतौर पर मानव में क्षणिक ischemia नकल करने के लिए कार्यरत एक पशु मॉडल है । इस पशु मॉडल ट्रांसजेनिक और पीटकर चूहों उपभेदों को स्ट्रोक की pathophysiology जांच करने के लिए लागू किया जा सकता है । प्रोटोकॉल ?…
The authors have nothing to disclose.
इस काम के विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय द्वारा समर्थित किया गया था, ताइवान (सबसे 106-2320-b-038-024, सबसे 105-2221-E-038-007-MY3, और सबसे 104-2320-b-424-001) और ताइपे मेडिकल विश्वविद्यालय अस्पताल (107tmuh-SP-01). इस पांडुलिपि वालेस अकादमिक संपादन द्वारा संपादित किया गया था ।
Bone rongeur | Diener | Friedman | |
Buprenorphine | Sigma | B-044 | |
Cefazolin | Sigma | 1097603 | |
Chloral hydrate | Sigma | C8383 | |
Dissection microscope | Nikon | SMZ-745 | |
Electric clippers | Petpro | ||
10% formalin | Sigma | F5304 | |
Germinator dry bead sterilizer | Braintree Scientific | ||
Iris Forceps | Karl Klappenecker | 10 cm | |
Iris Scissors | Diener | 9 cm | |
Iris Scissors STR | Karl Klappenecker | 11 cm | |
Microdrill | Stoelting | FOREEDOM K.1070 | |
Micro-scissors-Vannas | HEISS | H-4240 | blade 7mm, 8 cm |
Mouse brain matrix | World Precision Instruments | ||
Non-invasive blood pressure system | Muromachi | MK-2000ST | |
Operating Scissors STR | Karl Klappenecker | 14 cm | |
Physiological Monitoring System | Harvard Apparatus | ||
Razor blades | Ever-Ready | ||
Stoelting Rodent Warmers | Stoelting | 53810 | Heating pad |
Suture clip | Stoelting | ||
Tweezers | IDEALTEK | No.3 | |
Vetbond | 3M | 15672 | Surgical glue |
10-0 suture | UNIK | NT0410 | |
2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride | Sigma | T8877 |