Опухоли мочевого пузыря мышиных индуцированных с канцерогенных нитрозаминов N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) (BBN). Поколение опухоли мочевого пузыря является неоднородной; Поэтому точной оценки бремени опухоли требуется до рандомизации для экспериментального лечения. Здесь мы представляем быстрый, надежный протокол МРТ для оценки размера опухоли и стадии.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Магнитно-резонансная томография оценки опухолей канцероген индуцированной мышиных мочевого пузыря
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Мышиных пузыря опухоли модели имеют решающее значение для оценки новых терапевтических возможностей. Опухоли мочевого пузыря, индуцированной с канцерогенных нитрозаминов (BBN) N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) выгодны над клеток линии на основе модели, потому что они тесно репликация геномной профили человека опухоли, и, в отличие от клеток модели и ксенотрасплантатов, они обеспечивают хорошая возможность для изучения immunotherapies. Однако поколение опухоли мочевого пузыря является неоднородной; Поэтому точной оценки бремени опухоли требуется до рандомизации для экспериментального лечения. Описанные здесь является BBN мыши модель и протокол для оценки мочевого пузыря рак опухоли бремя в естественных условиях с помощью последовательности быстрый и надежный магнитный резонанс (МР) (правда FISP). Этот метод является простым и надежным, потому, что, в отличие от УЗИ, Мистер зависит от оператора и позволяет для обработки простой после приобретения изображений и обзор. С помощью осевой изображений мочевого пузыря, анализ регионов интерес вдоль стенки мочевого пузыря и опухоли позволяют для расчета площади стены и опухоли мочевого пузыря. Это измерение коррелирует с ex vivo вес мочевого пузыря (rs= 0,37, p = 0,009) и стадии опухоли (p = 0.0003). В заключение BBN генерирует гетерогенных опухоли, которые идеально подходят для оценки immunotherapies, и МРТ может быстро и надежно оценить опухоли бремя до рандомизации для экспериментального лечения оружия.
Введение
Рак мочевого пузыря является пятым наиболее распространенной формой рака в целом, отвечает за примерно 80 000 новых случаев заболевания и 16 000 смертей в Соединенных Штатах в 2017 году1. Примерно через 30 лет без значительных успехов для системного лечения рака мочевого пузыря2недавние испытания ингибитора анти PD-1 и анти PD-L1 КПП продемонстрировали захватывающие и иногда прочный ответы больных с передовой Urothelial карцинома3,4,5. Однако только около 20% больных показывают объективный ответ на эти процедуры, и необходимы да....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все методы, описанные здесь были одобрены институциональный уход животных и использование Комитет (IACUC) Северо-Западного университета.
1. индукции опухоли с BBN
- Получение самцов мышей C57/BL6, каждая по крайней мере 6 недель.
Примечание: Мышей-самцов развиваться рак мочевого пузыря, более быстро и последовательно, чем самок мышей14,15. - Добавьте N-nitrosobutyl(4-hydroxybutyl) Амин (BBN) в дозе 0,05% питьевой воды. Сохранить его в контейнере непрозрачной и предоставить ad libitum как питьевая вода для мышей16.
Примечание: Хр....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Используя протокол описал (рис. 1), опухоли мочевого пузыря были наведены в самцов мышей C57/B6. МРТ была исполнена на 16 недель, и мышей были умерщвлены в 20 недель. Ex vivo мочевого пузыря весов (BW) для каждой мыши были записаны. Слайды окрашивали гематоксилином и эозином, а все гистология слайды были рассмотрены на стадии опухоли.
Чтобы проанализировать бремя опухоли с помощью MR, стены.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Точная визуализация моделей опухоли необходим для соответствующей предварительной эвтаназии промежуточной и животных рандомизации до начала экспериментального лечения. С помощью процедуры, представленные здесь, мы демонстрируем методологии (1) генерировать опухоли мочевого пузыря с помощью BBN канцероген и (2) стратифицировать бремя опухоли мочевого пузыря с помощью г-н MR-производные области измерения (стеныBLA) коррелирует значительно с ex vivo вес мочевого пузыря и ассоциируется с стадии патологиче.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы не имеют ничего сообщать.
Благодарности
J. J. M. финансируется ветеранов здравоохранения администрации заслуги Грант BX0033692-01. J. J. м. также поддерживается Фондом Джона P. Hanson для исследований рака университета Роберт H. Лурье всеобъемлющем Рак центр из северо. Мы благодарим центр для трансляционного Imaging за приобретение МРТ и обработки. Источники финансирования имел никакой роли в письменной форме рукописи или решение представить для публикации.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| C57BL/6 мышей | Лаборатория Джексона | 664 | мыши |
| N-бутил-N-(4-гидроксибутил)нитрозаминовый канцероген (BBN) | TCI American | B0938 | Канцероген |
| 0,9% нормальный физиологический раствор | Hospira, Inc | NDC 0409-488-02 | |
| Изофлуран | пирамал HealthCare | 60307-120-25 | Анестетик |
| 7Тесла КлинСкан МРТ | Bruker | NA | визуализации мелких животных МРТ |
| Syngo | Siemens | NA | Интегрированное программное обеспечение для визуализации МРТ |
| модели 1030 Мониторинг и ; Стробируемая система | Small Animal Instruments, Inc. (SAII) | NA | Физиологический мониторинг мелких животных |
| Формалин, нейтральный буферизованный, 10% | Сигма | HT501128 | Фиксатор |
| Эозин Y | Fisher Scientific | NC1093844 | Гистологический краситель |
| Гематоксилин | Fisher Scientific | 23-245651 | Гистологический краситель |
| Jim7 | Xinapse Systems | NA | Программное обеспечение для анализа медицинских изображений |
| GraphPad Prism v7.04 | Graphpad | NA | Программное обеспечение для построения графиков |
| R v3.4.2 | The R Project for Statistical Computing | NA | Статистическое программное обеспечение |
| R package pROC v1.10.0. | Проект R по статистическим вычислениям | NA | ROC анализ |
Ссылки
- Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer Statistics, 2017. CA: A Cancer Journal for Clinicians. 67 (1), 7-30 (2017).
- Abdollah, F., et al. Incidence, survival and mortality rates of stage-specific bladder cancer in United States: a tre....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
