Cette étude rend compte de prélèvement de sang de la veine caudale chez la souris à l’aide d’un système de tube d’aspiration avec loupe pour lunettes. Notre méthode est facile à pratiquer et pourrait être utilisé pour le prélèvement de sang répétées chez les souris.
Prélèvement d’échantillons de sang est la base de recherches expérimentales sur les animaux. Il est important d’obtenir des échantillons de sang adéquat à des fins de recherches diverses. Les veines de queue de souris sont petites, et il est parfois difficile d’obtenir le volume sanguin requis par les méthodes conventionnelles de ponction. La présente étude examine la supériorité du prélèvement d’échantillons de sang répétées des veines de queue de souris grâce à l’utilisation d’un vide de sang collection système et les lunettes loupe (groupe expérimental) par rapport aux méthodes conventionnelles de prélèvements (groupe conventionnel) , interprété par les débutants et les experts, respectivement. Avec l’aide d’une loupe pour lunettes, une pointe d’aiguille papillon est insérée dans la veine caudale de chaque souris dans le groupe expérimental. Quand la veine est pénétrée avec succès, un échantillon de sang est prélevé dans le tube de prélèvement sous vide en insérant l’extrémité en caoutchouc d’une aiguille à ailettes dans le tube de prélèvement sanguin sous vide. Le piston est ensuite utilisé pour recueillir le sang sans l’aide de la loupe pour lunettes dans le groupe conventionnel. Taux de réussite de prélèvement d’échantillons de sang par les débutants et les experts se sont avérés être de 70 % et 100 % (p < 0,01) dans le groupe expérimental et 35 % par rapport à 85 % (p < 0,01) dans le groupe conventionnel. Pour les débutants et experts, ponction fois nécessaires pour obtenir l’échantillon sanguin requis étaient significativement plus faibles dans le groupe expérimental par rapport au groupe conventionnel (2,40 ± 0,75 vs 2.90 ± 0,31, p < 0,05 ; 1,15 ± 0,37 contre 1,55 ± 0,76, p < 0,05). En conclusion, la technique de prélèvement du sang présentés est faisable et facile à pratiquer et permet fréquemment d’échantillonnage des volumes de sang adéquat des souris non-anesthésiés.
Prélèvement de sang de l’animal impliqué dans des expériences est une technique de recherche fondamentale. Il existe quelques techniques disponibles pour la collecte de sang de souris, y compris les cisailles de queue et de perforer du coeur, plexus rétro-orbitaire, veine jugulaire, veine caudale et veine cave. Idéalement, le sang doit être recueilli de façon mini-invasive, avec un impact minimal sur la santé de l’animal. Cependant, les techniques les plus couramment utilisés souvent infligent stress des animaux et peuvent affecter les résultats de la recherche1. Collecte de sang du plexus rétro-orbitaire permet d’obtenir assez de volume sanguin de souris2. Toutefois, il peut entraîner des lésions tissulaires graves et ne permet pas pour l’obtention de sang à plusieurs reprises dans des intervalles de temps court3.
La veine caudale est un emplacement supérieur pour la collecte de sang, qui inflige des blessures minimes sur la souris. Toutefois, les veines de queue de souris sont minces, et il est parfois difficile d’obtenir suffisamment de sang grâce à la technique de ponction classiques. Dans certains cas, les ponctions répétées sont nécessaires pour obtenir le volume sanguin désirée. L’anesthésie est aussi couramment recommandé pour faciliter la prise de sang dans les veines de queue de souris. En outre, un scalpel, rasoir bord droit ou ciseaux pointus peut être nécessaire d’enlever les extrémités de la queue pour obtenir les échantillons de sang nécessaire4. Nous avons déjà rapporté collection réussie de sang dans les veines de queue de rats non anesthésiés par le système de collecte d’échantillon sanguin sous vide, qui réduit le risque de contamination du sang et évite la nécessité pour les ponctions répétées5. Cette étude décrit une méthode de collecte de sang similaire chez les souris non anesthésiés.
La présente étude décrit une méthode de collecte de sang facile à apprendre chez la souris qui est supérieure aux techniques conventionnelles. Tout d’abord, la méthode peut être facilement maîtrisée avec un taux de réussite élevé. En second lieu, il repose sur le principe de pression négative sous vide et permet pour dessin continu de sang avec une réduction du risque d’exposition à du sang direct, qui réduit les risques de contamination et l’hémolyse9. Troisièmement, cette méthode est réalisable pour l’échantillonnage fréquent du sang avec des volumes suffisants de la souris sur une courte période de temps à des fins de recherches diverses. En outre, la procédure inflige seulement blessure minime à la souris, et prélèvement sanguin peut être effectué sans l’utilisation d’anesthésiques ; ainsi, l’influence de la réponse au stress et anesthésiques sur des échantillons de sang peut être évité.
La veine caudale est un emplacement supérieur pour les prélèvements sanguins selon le protocole approuvé7. Cependant, il n’est pas toujours facile d’obtenir le volume de sang suffisant des veines de queue mince avec des débits sanguins faibles. Dans ce cas, la peau est habituellement découpée et veine est pénétré par une lancette ou au bout de la queue est éliminé rapidement par un rasoir.
Ce protocole vise à améliorer la méthodologie de collecte de sang de souris en utilisant le système de prélèvement sanguin sous vide, qui nécessite un tube de prélèvement sanguin sous vide échantillon, aiguille à ailettes et loupe pour lunettes. Ce système de prélèvement sanguin sous vide est généralement utilisé pour la collecte des échantillons de sang chez des patients de tous les jours de pratique clinique10. Avec l’aide d’une loupe pour lunettes, le point parfait de ponction d’une veine de la queue est plus facile à localiser. Lorsque la pointe d’une aiguille est insérée dans la veine caudale, sang coulera automatiquement dans le tube à vide en raison de la pression négative. Après le retrait de l’aiguille de la veine caudale, le sang qui est bloqué dans le cathéter s’écoule dans le tube d’aspiration collecte en raison de la dépression.
Les conseils suivants sont importants pour une application réussie de la méthode. Tout d’abord, le poids du corps de chaque souris doit être de 40 g ou supérieur pour diminuer la difficulté de percer et d’obtenir suffisamment de sang. Deuxièmement, dans le cas de la collecte de sang ayant échoué, expérimentateurs devraient essayer de retirer l’aiguille lentement jusqu’à ce que le sang continue à couler dehors. En troisième lieu, il est essentiel d’étendre la queue pour éviter tout mouvement lors de prélèvements sanguins. Maintenant l’aiguille doucement peut aider à garder la pointe de l’aiguille dans la veine sous les coups de queue de souris. Quatrièmement, si le sang cesse de couler dehors pendant la collecte de sang, l’angle de l’aiguille doit être ajustée de façon opportune. Afin d’éviter la coagulation du sang dans l’aiguille, une autre position de ponction doit être sélectionnée si le sang cesse de couler dehors après 15 s. Enfin, la coopération de deux opérateurs est recommandée lorsque vous utilisez cette technique pour recueillir le sang des souris.
En bref, la méthode de collecte de sang de vide adopté pour une utilisation chez les souris est sécuritaire, faisable et facile à pratiquer. Cette méthode permet de fréquents d’échantillonnage du sang avec des volumes de sang adéquat des souris non-anesthésiés.
The authors have nothing to disclose.
Ce travail a été soutenu par la subvention de la Fondation Science Nature de la Province de Hubei, Chine [Grant No. 2018CFB761].
Double-pointed needle | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 20163151718 | 22G (0.7 mm x 25 mm) |
Eyeglass magnifier | Vergroberung | 1.5x | |
Normal salt diet for mice | Mice received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study. | ||
Plastic holder | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 35-45 g rat hoder | |
SPSS software for statistical analysis | SPSS Inc, Chicago; USA | Version 17.0. | |
Syringe | Shandong wego Medical polymer products co. LTD., China | 20160911A | 1 mL (Matching needle size: 0.45×16RW LB) |
Vacuum blood collection system | Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China | 20171222 | 1 mL (Φ12.4×L75) |