इस विधि में प्रोस्टेट कैंसर रोगियों के लिए नैदानिक नैदानिक डेटा का उपयोग शामिल है ताकि नमूना प्रक्रियाओं का मार्गदर्शन किया जा सके, जब कट्टरपंथी प्रोस्टेटेक्टॉमी के बाद बायोबैंकिंग ऊतक। यह दक्षता और downstream अनुप्रयोगों की एक व्यापक रेंज के लिए ताजा ऊतक की उपलब्धता के आसपास पहले से प्रकाशित तरीकों के साथ मुद्दों पर काबू पा लिया.
biobanking प्रोस्टेट ऊतक के लिए पिछले तरीकों, कट्टरपंथी prostatectomy निम्नलिखित, आम तौर पर यादृच्छिक नमूना शामिल. आदेश में दक्षता बढ़ाने के लिए, और बहाव अनुप्रयोगों की एक बड़ी रेंज सक्षम, नमूना प्रोस्टेट ऊतक का एक अधिक लक्षित विधि विकसित किया गया था. यहाँ हम दोनों चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) और बायोप्सी डेटा का उपयोग करने के लिए नमूना के लिए अंग के विशिष्ट क्षेत्रों को लक्षित. विधि प्रोस्टेट के एक पूर्व निर्धारित क्षेत्र से एक 5 मिमी अनुप्रस्थ टुकड़ा हटा देता है जो एक पहले से प्रकाशित प्रोस्टेट टुकड़ा करने वाले उपकरण का उपयोग शामिल है, इस टुकड़ा के पूर्व निर्धारित क्षेत्रों से 6 मिमी पंच बायोप्सी को हटाने के बाद. इन नमूनों जमे हुए या biobanking प्रयोजनों के लिए तय संग्रहीत किया जा सकता है, या ट्यूमर सामग्री के 70% विश्वास के साथ तुरंत ताजा इस्तेमाल किया, के रूप में यादृच्छिक नमूना दृष्टिकोण से 10% विश्वास के साथ तुलना में. यह इस तरह के जीनोमिक्स, प्रोटीओमिक्स या हिस्टोलॉजिकल काम के रूप में सभी मानक बहाव तकनीकों का उपयोग सक्षम बनाता है, लेकिन यह भी काम है कि इस तरह के लाइव ऊतक इमेजिंग या पूर्व vivo संस्कृति के रूप में ताजा ऊतक की आवश्यकता है।
उच्च गुणवत्ता वाले मानव प्रोस्टेट कैंसर ऊतक के लिए प्रवेश क्षेत्र में प्रभावी अनुसंधान ड्राइविंग के लिए एक महत्वपूर्ण आवश्यकता है. अनुसंधान के लिए कट्टरपंथी prostatectomy के बाद प्रोस्टेट ऊतक नमूना करने के लिए मौजूदा तरीकों की एक संख्या हैं। आमतौर पर इन पंच बायोप्सी का उपयोग करने के लिए प्रोस्टेट ऊतक के एक ताजा, जमे हुए या निश्चित टुकड़ा से यादृच्छिक नमूने लेने के शामिल है, और पूर्वव्यापी पुष्टि या नहीं ट्यूमर hematoxylin और eosin द्वारा प्रत्येक नमूने में मौजूद है (एच एंड ई) के रूप में एक द्वारा मूल्यांकन यूरोपैथोलॉजिस्ट1,2,3,4,5. हाल ही में की गई एक समीक्षा में इन मौजूदा विधियों का अवलोकन6किया गया है . इन तरीकों को कुछ downstream अनुप्रयोगों के लिए उपयोगी होते हैं, जहां ऊतक संग्रहीत किया जा सकता है और एक बाद की तारीख में ट्यूमर सामग्री के लिए मूल्यांकन, जैसे बड़े पैमाने पर जीनोम कंसोर्टियम (ICGC) और कैंसर जीनोम एटलस (TCGA) की तरह जीनोम विश्लेषण 4,7. हालांकि, इन तरीकों में सुधार किया जा सकता है अगर हम चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग का उपयोग करने के लिए थे (एमआरआई) और / इससे दो तरीकों से कार्यप्रणाली में सुधार होगा; सबसे पहले, एकत्र ऊतक नमूनों की संख्या को कम करके, दक्षता बढ़ाने और पैथोलॉजी विभागों और भंडारण की लागत पर दबाव को कम करने, और दूसरी बात, ताजा ऊतक की तत्काल पुष्टि के लिए आवश्यकता के बिना तुरंत इस्तेमाल किया जा करने की अनुमति देकर ट्यूमर सामग्री, इस तरह के लाइव ऊतक इमेजिंग, organoid पीढ़ी या पूर्व vivo संस्कृति के रूप में कला downstream प्रौद्योगिकियों के नए राज्य के लिए। इस शोध की जरूरत है लोगों के विकास के लिए नेतृत्व किया गया है (PatiEnt prostate samPLes के लिए शोध) विधि, और पहले 84 मामलों से परिणाम biobanked लोगों का उपयोग कर हाल ही में प्रकाशित किए गए8. इस विधि का एक परिवर्तन भी एक तीन आयामी (3 डी) मुद्रित टुकड़ा करने के उपकरण और रोगी विशेष मोल्ड के साथ प्रकाशित किया गया है, ताकि पूर्व और बाद निर्धारण ऊतक9,10पर पूर्व vivo एमआरआई की सुविधा के लिए .
इस प्रोटोकॉल के भीतर महत्वपूर्ण कदम नमूना के लिए ट्यूमर क्षेत्र की पहचान शामिल, प्रोस्टेट की माप, और ऊतक नमूना. सबसे पहले, नमूना के सही क्षेत्र की पहचान करने के लिए एमआरआई की माप कुंजी है. हम साथ वीडियो में इस विधि का प्रदर्शन; हालांकि, हम भी पहले उदाहरण में एक रेडियोलॉजिस्ट के साथ माप की पुष्टि की सलाह देते हैं. स्पष्ट नैदानिक नोट्स जो एमआरआई छवियों के क्षेत्र की ओर शोधकर्ता को इंगित करते हैं जिसमें सूचकांक घाव आदर्श होते हैं। दूसरे, प्रोस्टेट की माप देखभाल के साथ किया जाना चाहिए, यह सुनिश्चित करना है कि शासक एक कोण पर आयोजित किया जाता है आधार से शीर्ष करने के लिए पूरी लंबाई को मापने के लिए, प्रोस्टेट के पूर्वकाल के समानांतर. तीसरे, ट्यूमर क्षेत्रों नेत्रहीन मूल एमआरआई छवि के संबंध में ऊतक टुकड़ा निरीक्षण द्वारा नमूने से पहले की पुष्टि की जानी चाहिए, ऊतक palpating (कुछ मामलों में ट्यूमर क्षेत्र और अधिक घने महसूस कर सकते हैं), और नेत्रहीन ऊतक के रंग का आकलन (कुछ में मामलों ट्यूमर आसपास के सौम्य ऊतक की तुलना में अधिक पीला दिखाई देगा).
यह प्रोटोकॉल गैर-नैदानिक पोस्टडॉक्टोरल शोधकर्ताओं, पैथोलॉजी साथी, पैथोलॉजी सलाहकारों और अनुसंधान तकनीशियनों द्वारा यूसीएल/यूसीएलएच में पूर्ण रूप से किया गया है। हमारे अनुभव में प्रोटोकॉल के सभी चरणों में तकनीकी पृष्ठभूमि की परवाह किए बिना दस मामलों के तहत सीखा जा सकता है. हालांकि, हम एमआरआई माप और पहली बार में टुकड़ा करने के बारे में एक पैथोलॉजिस्ट से प्रशिक्षण के बारे में एक रेडियोलॉजिस्ट से प्रशिक्षण की सिफारिश करते हैं। प्रोटोकॉल एक 3 डी मुद्रित टुकड़ा करने के हैंडल का उपयोग करके संशोधित किया जा सकता है, के रूप में पहले से प्रकाशित10.
तकनीक की संभावित सीमाओं में निदान पर बाधा डालने का जोखिम शामिल है। प्रोस्टेट टुकड़ा करना एक महत्वपूर्ण कदम है, जो ग्रेडिंग या सकारात्मक मार्जिन दरों पर बाधा अगर गलत तरीके से किया जा सकता है. यहां दो संभावित मुद्दे हैं। सबसे पहले, अगर सूचकांक घाव के सभी हटा दिया जाता है और ताजा ऊतक प्रयोग के लिए तुरंत इस्तेमाल किया, नियमित नैदानिक निदान इस घाव के लिए बाहर नहीं किया जाएगा और रोगी एक कम ग्रेड कैंसर होने के रूप में misdiagnosed किया जा सकता है. इससे बचने के लिए, शोधकर्ता सलाहकार पैथोलॉजिस्ट जो नियमित रूप से मामले की समीक्षा करेंगे के साथ नमूना योजना पर चर्चा करनी चाहिए, नमूने से पहले, और संख्या पर सहमत हैं, और स्थान, नमूने लिया जाना है. छोटे ट्यूमर इस कारण के लिए स्थानीय रूप से बाहर रखा जा सकता है. दूसरे, अगर प्रोस्टेटिक कैप्सूल निर्धारण से पहले कॉर्क बोर्ड के लिए सही ढंग से नीचे टिकी नहीं है, यह आंतरिक ऊतक निर्धारण के दौरान बाहर उभार करने के लिए अनुमति दे सकता है, शल्य मार्जिन बदलने. यह एक झूठी सकारात्मक मार्जिन के लिए नेतृत्व कर सकते हैं, जहां शेष ट्यूमर विशुद्ध रूप से ऊतक warping के कारण कैप्सूल में रहने के लिए प्रकट होता है.
मौजूदा तरीकों के संबंध में इस तकनीक का महत्व मुख्य रूप से ट्यूमर को लक्षित करने के साथ निहित है। मौलिक prostatectomy नमूनों के नमूने के लिए तरीकों की एक श्रृंखला की तारीख को प्रकाशित किया गया है; हालांकि , ये सभी पूरी तरह से या आंशिक रूप से यादृच्छिक नमूना दृष्टिकोण1,2,3,4,5,6,7पर निर्भर करते हैं . बायोप्सी के उपयोग और विशेष रूप से एमआरआई डेटा यहाँ दक्षता में सुधार हुआ है, ट्यूमर ऊतक प्राप्त करने के विश्वास में वृद्धि के साथ कम नमूना के लिए अनुमति देताहै 8.
इस विधि के भविष्य अनुप्रयोगों पिछले नमूना तरीकों के साथ की तुलना में बहाव तकनीकों की एक व्यापक रेंज के गोद लेने के लिए अनुमति देते हैं. उदाहरण के लिए, ट्यूमर होने की उच्च संभावना वाले नए ऊतक की उपलब्धता का मतलब है कि अधिक महंगा और/या श्रम गहन ताजा ऊतक तकनीक का उपयोग किया जा सकता है, क्योंकि ट्यूमर की उपस्थिति सुनिश्चित करने के लिए कई नमूनों की आवश्यकता नहीं है। यह शामिल कर सकते हैं और तक ही सीमित नहीं है, पूर्व vivo संस्कृति, पूर्व vivo एमआरआई, उन्नत इमेजिंग और transcriptomics.
The authors have nothing to disclose.
लेखकों को प्रोस्टेट कैंसर ब्रिटेन उत्कृष्टता और यात्रा पुरस्कार फैलोशिप के केंद्र के तहत एसएच वित्त पोषण के लिए प्रोस्टेट कैंसर ब्रिटेन स्वीकार करना चाहते हैं (TLD-PF16-004) और हिमाचल प्रदेश INNOVATE के तहत (PG14-018-TR2). इस काम के शोधकर्ताओं ने राष्ट्रीय स्वास्थ्य अनुसंधान विश्वविद्यालय कॉलेज लंदन अस्पताल जैव चिकित्सा अनुसंधान केंद्र के लिए संस्थान में शोधकर्ताओं द्वारा समर्थित किया गया था.
6 mm biopsy punch | Fisher Scientific | 13404607 | Disposable biopsy punches for removing 6 mm tissue samples |
Black Ink | Leica Biosystems | 3801753 | Tissue marking & margin dye |
Blue Ink | Leica Biosystems | 3801751 | Tissue marking & margin dye |
Chainmail hand glove | Arco | 1456803 | Chainmail gloves to protect hand during slicing |
Cork board | Fisher Scientific | 12396447 | Cork board for pinning prostate to following sampling procedure |
Needles | SLS (Scientific Laboratory supplies) | SYR6112 | Sterile needles to use to pin tissue to cork board following sampling |
Prostate slicing aparatus | Insitute of Cancer Research, London | NA – must be obtained under MTA | A kit containing the slicer handle, blades, spacer, base, walls and pins |