Dit werk presenteert een protocol voor het uitvoeren van een stereotaxic, neurochirurgische implantatie van micro-elektrode arrays in de common marmoset. Deze methode maakt het specifiek mogelijk elektrofysiologische opnames in vrij gedragen dieren, maar kan gemakkelijk worden aangepast aan elke andere soortgelijke neurochirurgische ingreep in deze soort (bv, canule voor Drug Administration of elektroden voor hersenstimulatie).
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Stereotaxic chirurgie voor implantatie van micro-elektrode arrays in de gewone marmoset (Callithrix jacchus)
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Marmosets (Callithrix jacchus) zijn kleine niet-menselijke primaten die aan populariteit winnen in biomedisch en preklinisch onderzoek, waaronder de neurowetenschappen. Fylogenetisch, deze dieren zijn veel dichter bij de mens dan knaagdieren. Ze vertonen ook complexe gedragingen, waaronder een breed scala aan vocaliisaties en sociale interacties. Hier wordt een effectieve stereotaxic neurochirurgische ingreep voor implantatie van opname elektrode arrays in de common Hapalomys beschreven. Dit protocol geeft ook informatie over de pre-en postoperatieve stappen van dierenverzorging die nodig zijn om een dergelijke operatie succesvol uit te voeren. Tot slot toont dit protocol een voorbeeld van lokaal veld potentieel en Spike activiteit opnames in een vrijelijk gedragen Hapalomys 1 week na de chirurgische ingreep. Over het algemeen biedt deze methode de mogelijkheid om de hersenfunctie te bestuderen in wakker en vrij het gedragen van marmosets. Hetzelfde protocol kan gemakkelijk worden gebruikt door onderzoekers die met andere kleine primaten werken. Daarnaast kan het gemakkelijk worden aangepast om andere studies die implantaten vereisen, zoals stimulerende elektroden, micro injecties, implantatie van optroden of begeleiden cannulas, of ablatie van discrete weefsel regio's.
Inleiding
Gewone zijdeaapjes (Callithrix jacchus) krijgen erkenning als een belangrijk modelorganisme in veel onderzoeksgebieden, waaronder neurowetenschappen. Deze primaten van de nieuwe wereld vormen een belangrijk aanvullend diermodel voor zowel knaagdieren als andere niet-menselijke primaten (Nhp's), zoals de rhesus macaque. Net als knaagdieren zijn deze dieren klein, gemakkelijk te manipuleren en relatief zuinig om te verzorgen en te fokken1,2,3,4, in vergelijking met grotere nhp's. Bovendien hebben deze dieren een neiging tot jumelage e....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Dierproeven werden uitgevoerd in overeenstemming met de National Institutes of Health Guide voor de verzorging en het gebruik van proefdieren en goedgekeurd door het ethisch comité van het Santos Dumont Institute (protocol 02/2015AAS).
1. chirurgie voorbereiding
- Bevestig elke elektrode-array aan een elektrodehouder die compatibel is met het stereotaxic frame dat moet worden gebruikt.
- Sluit één elektrodehouder aan op de stereotaxic micromanipulator en stel één micro draad in op de interaurale coördinaten. Herhaal dit voor de extra elektrode arrays en houders, indien nodig.
Opmerking: de interaurale coördinaat van elke ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Het doel van deze studie was het beschrijven van een stereotaxic neurochirurgische ingreep voor implantatie van micro-elektrode arrays voor elektrofysiologische opnames in de gewone marmoset. Een typische operatie (van anesthesie inductie tot anesthesie herstel) zal duren ongeveer 5 − 7 h, afhankelijk van het aantal arrays geïmplanteerd. Hier werden twee arrays symmetrisch geïmplanteerd, één in elk hersen halfrond. Elke array bevatte 32 roestvrijstalen micro draden, gerangschikt in zeven bundels die gericht zijn op versc.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Dit werk geeft een gedetailleerde beschrijving van de procedures die betrokken zijn bij de implantatie van micro elektrode-opname arrays in de hersenen van de Hapalomys. Dit zelfde protocol kan gemakkelijk worden gebruikt bij het implanteren van elektroden, of het nu zelfgemaakte of commercieel beschikbaar is, in andere kleine primaten. Bovendien kan het gemakkelijk worden aangepast voor andere experimentele uiteinden die precieze targeting van hersenstructuren vereisen. Daarom is dit protocol doelgericht vaag met betrek.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
De auteurs willen Bernardo Luiz graag bedanken voor technische assistentie bij het filmen en bewerken. Dit werk werd gesteund door het Santos Dumont Institute (ISD), het Braziliaanse Ministerie van onderwijs (MEC) en Coordenação de Aperfeiçoamento de pessoal de nível Superior (CAPES).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Utrusting | |||
| 683 Small Animal Ventilator | Harvard Apparatus, Inc. | 55-0000 | |
| Anesthesiegebruiksset | BRASMED | COLIBRI | |
| Kapperschaar | Mundial | HC-SERIES | |
| Tandartsboor | Norgen | B07-201-M1KG | |
| Homeotherme verwarmingspad en monitor | Harvard Apparatus, Inc. | 50-7212 | |
| Stereotactische frame voor marmoset | Narishige Scientific Instrument Lab | SR-6C-HT | |
| Patiëntmonitor en pulsoximeter | Bionet Co., Ltd | BM3 | |
| Stereotactische micromanipulator | Narishige Scientific Instrument Lab | SM-15R | |
| Chirurgisch microscoop | Opto | SM PLUS IBZ | |
| Instrumenten | |||
| Allis weefseltang | Sklar | 36-2275 | |
| Alm retractor, afgeronde punt, 4x4 tanden | Rhosse | RH11078 | |
| Geboogde McPherson-tang | Oftalmologiabr | 11301A | |
| Geboogde chirurgische schaar | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8422 | |
| Geboogde weefseltang | Sklar | 47-1186 | |
| Fijne dissectietang | WPI | WP5015 | |
| Tandartsboorkop | Microdont | ISO.806.314.001.524.010 | |
| Essring weefseltang | Sklar | 19-2460 | |
| FG 1/4 tandartsboorkop | Microdont | ISO.700.314.001.006.005 | |
| Halsey naaldhouder | WPI | 15926-G | |
| Halstead muggentang | WPI | 503724-12 | |
| Hemostatische tang, recht | Sklar | 17-1260 | |
| Juweeltang | Sklar | 66-7436 | |
| McPherson-Vannas oofthalmische microschaartjes, 3 mm punt | Argos Instrumental | ARGOS-4004 | |
| Periostale rasp | Golgran | 38-1 | |
| Scalpelgreep | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8354 | |
| Schroevendraaiers | Eurotool | SCR-830.00 | |
| Loodbouter | Hikari | 21K006 | |
| Chirurgische schaar | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8400 | |
| Tang met tanden | WPI | 501266-G | |
| Voor eenmalig gebruik | |||
| 1 ml steriele spuit met 26 G naald | Descarpack | 7898283812785 | |
| Chirurgisch veld 130 cm x 140 cm, voorgesteriliseerde | ProtDesc | 7898467276344 | |
| 24G naald, voorgesteriliseerde | Descarpack | 7898283812846 | |
| Chirurgisch veld 50 cm x 50 cm, voorgesteriliseerde | Esterili-med | 110100236 | |
| Wattenstaafjes met katoenen punt, voorgesteriliseerde | Jiangsu Suyun Medical Materials Co. LTD | 23007 | |
| Wattenstaafjes met katoenen punt | Higie Topp | 7898095296063 | |
| Elektrodenarray | Zelf gemaakt | ||
| Endotracheale buis zonder cuff, binnendiameter 2,0 mm, buitendiameter 2,9 mm | Solidor | 7898913077201 | |
| Vertind koperdraad, 0,15 mm diameter | |||
| M1.4x3 roestvrijstalen schroeven | USMICROSCREW | M14-30M-SS-P | |
| Medische tape | Missner | 7896544910102 | |
| Nylon chirurgische hechtdraad | Shalon | N540CTI25 | |
| Scalpelmes, voorgesteriliseerde | AdvantiVe | 1037 | |
| Soldeertin | Kester | SN63PB37 | |
| Sterile zoutoplossing 0,9% | Isofarma | 7898361700041 | |
| Steriele chirurgische handschoenen | Maxitex | 7898949349051 | |
| Steriele chirurgische kleding | ProtDesc | 7898467281208 | |
| Chirurgisch gaas, 15 cm x 26 cm voorgesteriliseerde | Héika | 7898488470315 | |
| Gelfoam | Pfizer | ||
| Geneesmiddelen/Chemische stoffen | |||
| 0,25 mg/ml Atropine | Isofarma | ||
| 10% Lidocaine Spray | Produtos Químicos Farmacêuticos Ltda. | 7896676405644 | |
| 2,5% Enrofloxacino veterinair antibioticum | Chemitec | 0137-02 | |
| Dexametasona veterinair ontstekingsremmer | MSD | R06177091A-00-15 | |
| Waterstofperoxide | Farmax | 7896902211537 | |
| Isofluraan | BioChimico | 7897406113068 | |
| Jet acrylpolymerisatieoplossing | Artigos Odontológicos Clássico | ||
| Jet autopolymeriserende acryl | Artigos Odontológicos Clássico | ||
| Ketamine 10% | Syntec | ||
| Lidocaine en fenylefrine 1,8 ml lokaal verdovingsmiddel | SS White | 7892525041049 | |
| Povidon-jodiumoplossing | Farmax | 7896902234093 | |
| Riohex 2% chirurgische zeep | Rioquímica | 78977802 |
Referenties
- Okano, H., Hikishima, K., Iriki, A., Sasaki, E. The common marmoset as a novel animal model system for biomedical and neuroscience research applications. Seminars in Fetal and Neonatal Medicine. 17 (6), 336-340 (2012).
- Harris, R. A., et al.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
