कॉडल नस ग्लूकोज इंजेक्शन द्वारा पैराबायोटिक चूहों में साझा रक्त आपूर्ति की स्थापना का पता लगाना
Summary
यहां हम ग्लूकोज के एक कौडल नस इंजेक्शन के माध्यम से दो पैराबायोंट्स के साझा रक्त परिसंचरण की सफल स्थापना का पता लगाने की एक नई विधि का वर्णन करते हैं, जो न्यूनतम क्षति का कारण बनता है और पैराबायोंट्स के लिए घातक नहीं है।
Abstract
पैराबायोसिस शरीर की देशांतर धुरी के साथ दो समानांतर जानवरों के संयोजन के लिए शल्य चिकित्सा के लिए एक प्रयोगात्मक विधि है। हम ग्लूकोज के एक कौडल नस इंजेक्शन द्वारा पैराबायोंट्स में रक्त कल्पना की सफल स्थापना का पता लगाने के लिए एक प्रोटोकॉल पेश करते हैं। पैराबायोटिक चूहों का निर्माण किया गया था। ग्लूकोज पूंछ नस के माध्यम से दाता माउस में इंजेक्शन था, और रक्त ग्लूकोज के स्तर के उतार चढ़ाव दोनों चूहों में अलग समय बिंदुओं पर एक रक्त ग्लूकोमीटर का उपयोग कर मापा गया था । हमारे परिणामों से पता चला है कि ग्लूकोज इंजेक्शन के बाद, दाता चूहों में रक्त ग्लूकोज का स्तर 1 मिन के बाद तेजी से बढ़ा और उसके बाद धीरे-धीरे कम हो गया। इस बीच, प्राप्तकर्ता चूहों के रक्त ग्लूकोज का स्तर इंजेक्शन के बाद 15 min नुकीला । इसी तरह के परिणाम इवांस ब्लू के साथ प्राप्त किए गए थे, ग्लूकोज के लिए एक सकारात्मक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया । रक्त शर्करा के स्तर के समकालिक उतार-चढ़ाव से पता चलता है कि दोनों चूहों के बीच रक्त प्रवाह सफलतापूर्वक स्थापित किया गया था।
Introduction
पैराबायोसिस एक मॉडलिंग पद्धति है जिसमें दो जीवित जीवों को शल्य चिकित्सा से एक साथ मिलाया जाता है और एक साझा संचार प्रणाली के साथ एक एकल शारीरिक प्रणाली के रूप में विकसित किया जाता है1। इस तरह के मॉडलव्यापक रूप से लाभ है कि एक ही व्यक्ति द्वारा उत्पादित पदार्थों साझा संचार प्रणाली के माध्यम से एक ही समय में दोनों जानवरों पर कार्य कर सकते है के कारण शरीर विज्ञान का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है । 1800 के दशक के मध्य से जब पॉल बर्ट2द्वारा पैराबायोटिक प्रयोगों का बीड़ा उठाया गया था, पैराबायोटिक मॉडल के निर्माण के तरीके मानकीकृत हो गए हैं। हालांकि, रक्त कल्पना की सफल स्थापना की पुष्टि करने के लिए एक सीधा और सुविधाजनक तरीका गायब हो गया है । यह बताया गया है कि क्रॉस-सर्कुलेशन का सफलतापूर्वक मूल्यांकन किया जा सकता है, जो एक माइक्रोप्लेट रीडर3के साथ दोनों पैराबायोंट्स के रक्त में इवांस ब्लू के अवशोषण की माप के बाद पैराबायोंट्स में से एक में 0.5% इवांस ब्लू डाइ इंजेक्शन लगाकर। एक अन्य विधि के लिए एक विशिष्ट माउस नस्ल की आवश्यकता होती है जिसमें सीडी45.1+और सीडी45.2+– प्रत्येक पैराबायोंट में मोनोसाइट्स लेबल होते हैं। इसके बाद सेल साइटोमेट्री का उपयोग तिल्ली या रक्त4से मोनोसाइट्स में दो मार्कर की आवृत्ति को मापकर रक्त की कल्पना का निर्धारण करने के लिए किया जाता है। हालांकि, ये विधियां अक्सर जानवरों के लिए घातक या बोझिल होती हैं, और पैराबायोटिक मॉडल के त्वरित और विश्वसनीय सत्यापन के लिए एक सुरक्षित और सरल तरीका अत्यधिक वांछनीय है। इस अध्ययन में, हमने इस उद्देश्य के लिए एक नई विधि स्थापित की, जिसे पैराबायोसिस के माउस मॉडल में मान्य किया गया था। पूंछ की नस से तैयार रक्त नमूनों में ग्लूकोज एकाग्रता को ग्लूकोमीटर का उपयोग करके मापा जाता है, और दाता और प्राप्तकर्ता चूहों में ग्लूकोज के स्तर में परिवर्तन का पैटर्न परिसंचरण कल्पना का संकेत माना जाता है। हमने इस विधि को “ग्लूकोज उतार-चढ़ाव विधि” नाम दिया। इस सत्यापन विधि का अनुप्रयोग चूहों तक सीमित नहीं है, लेकिन ग्लूकोज चयापचय के गंभीर डिस्रेगुलेशन वाले लोगों को छोड़कर विविध रोग मॉडलों तक बढ़ाया जा सकता है। प्रक्रिया सरल, समय की बचत, और सुरक्षित है।
Protocol
Representative Results
Discussion
पैराबायोसिस में दो जीवित जानवरों को 6 ,7,8द्वारा एक सामान्य संवहनी प्रणाली स्थापित करने के लिए जोड़ने की शल्य चिकित्सा तकनीक को संदर्भित किया गयाहै. इस मॉडल का लाभ यह ह…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम को चीन के राष्ट्रीय प्रकृति विज्ञान फाउंडेशन (८१५७०३९९ और ८१७७३७३५), चीन के राष्ट्रीय प्रमुख अनुसंधान और विकास कार्यक्रम-पारंपरिक चीनी चिकित्सा आधुनिकीकरण अनुसंधान परियोजना (2017YFC1702003), और हे ई लांग जियांग द्वारा समर्थित किया गया था उत्कृष्ट युवा विज्ञान कोष (जेसी2017020) ।
Materials
| curved forceps | JZ surgical Instruments, China | J31340 | |
| fine scissors | JZ surgical Instruments, China | WA1030 | |
| needle forcep | JZ surgical Instruments, China | 60017961 | |
| 2.5 mL syringes | Agilent, USA | 5182-9642 | |
| Tribromoethano | Sigma-Aldrich, USA | T48402-5G | |
| penicillin | Solarbio, China | IP0150 | |
| tramadol | Yijishiye, China | YJT712520 | |
| glucometer | Roche Diabetes Care, Indiana | Accu-Chek Active test strips | |
| Evan's blue Counterstain | Solarbio, China | G1810 | |
| depilatory cream | Nair, USA | LL9161 | |
| Warming Blanket (Heating pad) | Kent Scientific Corp, USA | TP-22G | |
| Electrical shaver | Codos, China | CP-5000 | |
| 3-0,5-0 surgical suture |
Shanghai Medical Suture Needle Factory, China | SYZ 3-0#, SYZ 5-0# |
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