Een gemodificeerd twee nieren Een Clip Muis Model van Renine Regulatie in nierslagader Stenose

Summary

Een gemodificeerd 2 nier 1 clip (2K1C) Goldblatt muismodel werd ontwikkeld met behulp van polyurethaan tubing om nierslagaderstenose te initiëren, waardoor een toename van renine-expressie en nierbeschadiging werd geïnduceerd. Hier beschrijven we een gedetailleerde procedure voor het voorbereiden en plaatsen van de manchet op de nierslagader om een reproduceerbaar en consistent 2K1C-muismodel te genereren.

Abstract

Nierslagaderstenose is een veel voorkomende aandoening bij patiënten met coronaire of perifere vaatziekten waarbij het renine-angiotensine-aldosteronsysteem (RAAS) overactief is. In deze context is er een vernauwing van de nierslagaders die een toename van de expressie en afgifte van renine stimuleren, het snelheidsbeperkende protease in RAAS. De resulterende toename van renine-expressie is een bekende aanjager van renovasculaire hypertensie, vaak geassocieerd met nierbeschadiging en eindorgaanschade. Er is dus een grote interesse in het ontwikkelen van nieuwe behandelingen voor deze aandoening. Het moleculaire en cellulaire mechanisme van reninecontrole in nierslagaderstenose is niet volledig begrepen en rechtvaardigt verder onderzoek. Om nierslagaderstenose bij muizen te induceren, werd een gemodificeerd 2 nier 1 clip (2K1C) Goldblatt muismodel ontwikkeld. De rechter nier werd gestennoseerd bij wilde muizen en schijnmuizen werden gebruikt als controle. Na nierslagaderstenose bepaalden we renine-expressie en nierbeschadiging. Nieren werden geoogst en verse cortices werden gebruikt om eiwit- en mRNA-expressie van renine te bepalen. Dit diermodel is reproduceerbaar en kan worden gebruikt om pathofysiologische responsen, moleculaire en cellulaire routes te bestuderen die betrokken zijn bij renovasculaire hypertensie en nierbeschadiging.

Introduction

Nierslagaderstenose (RAStenose) is een hardnekkig probleem dat ongeveer 6% van de 65-plussers treft en bij maximaal 40% van de mensen met coronaire of perifere vaatziekten ^1,2. De huidige behandelingen voor de ziekte zijn beperkt; daarom is er een kritieke behoefte om nieuwe therapieën te ontwikkelen voor de behandeling van renovasculaire hypertensie of resistente hypertensie geïnduceerd door RAStenose. Renine-angiotensine-aldosteronsysteem (RAAS) is de belangrijkste route die betrokken is bij de pathogenese van door RAStenose geïnduceerde hypertensie of renovasculaire hypertensie ^....

Protocol

Muizen werden gehuisvest en verzorgd in de Vanderbilt University Medical Center (VUMC) Division of Animal Care volgens de richtlijnen van de National Institutes of Health (NIH) en de Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, US Department of Health and Human Services. Alle dierprocedures zijn goedgekeurd door de VUMC Institutional Animal Care and Use Committee voordat de experimenten werden gestart.

1. Bereiding en dissectie van dieren

1. Schakel de kiemkracht en waterpomp van het verwarmingskussen ongeveer 30 minuten voordat u met de operatie begint in.
2. Snijd 0,5 mm lange polyurethaan buis met een scherpe scalpel. ....

Results

Nierslagadervernauwing verhoogt de renine-expressie in de gestennoseerde nier terwijl de expressie in de contralaterale nier wordt onderdrukt. De twee nier een clip (2K1C) of Goldblatt model van stenose induceert verhoogde renine expressie en nierbeschadiging. Dit wordt erkend als het beste representatieve model van unilaterale nierslagaderstenose bij mensen.

Expressie van renine en prorenine (voorloper van renine) werden gemeten met behulp van immunoblotting. De gegevens tonen aan dat de expr.......

Discussion

Nierslagaderstenose is een belangrijke oorzaak van secundaire of resistente hypertensie en nierbeschadiging ^1,29. Het twee nier één clip (2K1C) Goldblatt-model is gebruikt om RAStenose geïnduceerde renovasculaire hypertensie te bestuderen 1,17,18,19. Een aantal eerdere studies met behulp van verschillende diermodellen hebben aangetoond .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Diet Gel	Clear H2O	Diet-Gel 76A	Surgery recovery diet
EMC Heated Hard pad	Hallowell	000A2788B	Heating pads were used to keep mice warm
Ethilon Nylon Suture	Ethicon	662G	4-0 (1.5 metric), This suture was used to close the peritoneum, and skin
Ethilon Nylon Suture	Ethicon	2815 G	8-0 (0.4 metric), This suture was used to close cuff to tie and constrict the artery
Germinator 500	Braintree Scientific Inc.	GER 5287	Sterilize surgical tools between surgeries
Ketoprofen	Zoetis	Ketofen	Painkiller
Polyurethane	Braintree Scientific Inc.	MRE-025	This tube was used to initiate stenosis
Povidone-iodine antiseptic swabsticks	Medline	MDS093901	It was applied after hair removal and surgery on the skin
Reflex 7 Clip Applier	Roboz Surgical Instrument Co	204-1000	This clip applier was used to apply clip in case one or more sutures went off
Sterile towel drapes	Dynarex	4410	It was used as a bedsheet for mice during surgery
Triple antibiotic ointment	Medi-First	22312
Water pump	Stryker	T/pump Professionals	Used to warm and circulate water in the heating hard pad to keep mice warm during and post-surgery