Detta manuskript beskriver en metod för kontinuerlig video EEG inspelningar med flera djup elektroder i neonatal möss genomgår hypoxi-ischemi.
Hypoxi ischemi är den vanligaste orsaken till neonatal beslag. Djurmodeller är avgörande för att förstå mekanismerna och fysiologin bakom neonatal beslag och hypoxi ischemi. Detta manuskript beskriver en metod för kontinuerlig video elektroencefalogram (EEG) övervakning i neonatal möss för att upptäcka beslag och analysera EEG bakgrund under hypoxi ischemi. Användning av video och EEG i samband med möjliggör beskrivning av beslag semiologi och bekräftelse av beslag. Denna metod tillåter också analys av effektspektrogram och EEG bakgrundsmönster trender under den experimentella tidsperioden. I denna hypoxi ischemi modell, metoden tillåter EEG registrering före skada att erhålla en normativ baslinje och under skada och återhämtning. Den totala övervakningstiden begränsas av oförmågan att skilja ungar från modern längre än fyra timmar. Även om vi har använt en modell av hypoxic-ischemic beslag i detta manuskript, denna metod för neonatal video EEG övervakning kan tillämpas på olika sjukdom och beslag modeller hos gnagare.
Hypoxic ischemisk encefalopati (HIE) är ett tillstånd som påverkar 1,5 hos 1000 nyfödda årligen och är den vanligaste orsaken till neonatal beslag1,2. Spädbarn som överlever löper risk för olika neurologiska funktionsnedsättningar som cerebral pares, intellektuell funktionsnedsättning och epilepsi3,4,5.
Djurmodeller spelar en avgörande roll för att förstå och undersöka patofysiologi av hypoxi ischemi och neonatal beslag6,7. En modifierad Vannucci-modell används för att inducera hypoxi ischemi (HI) på postnatal dag 10 (p10)7,8. Musvalpar i denna ålder översätter neurologiskt ungefär till hela termen människa neonate9.
Kontinuerlig video elektroencefalografi (EEG) övervakning som används i samband med denna skada modell möjliggör ytterligare förståelse och karakterisering av neonatal hypoxic skandinaviska beslag. Tidigare studier har använt olika metoder för att analysera neonatala anfall hos gnagare, inklusive videoinspelningar, begränsade EEG-inspelningar och telemetri-EEG-inspelningar10,11,12,13,14,15,16. I följande manuskript diskuterar vi ingående processen att spela in kontinuerlig video EEG i musvalpar under hypoxi-ischemi. Denna teknik för kontinuerlig video EEG övervakning i neonatal mus pups kan tillämpas på en mängd olika sjukdomar och beslag modeller.
Vi har presenterat en modell för kontinuerlig video-EEG övervakning i neonatal möss under hypoxic-skandinaviska beslag. Video analys i samband med EEG tillåter karakterisering av beslag semiologi. Analys av EEG möjliggör extraktion av effektspektrogram och bakgrunds amplitud analys.
Korrekt och noggrann placering av elektroder är avgörande i detta protokoll, eftersom skada under elektrodplacering eller felaktig placering kan påverka resultaten avsevärt. Bedömning av normal EEG-aktiv…
The authors have nothing to disclose.
Vi bekräftar följande finansieringskällor: NIH NINDS – K08NS101122 (JB), R01NS040337 (JK), R01NS044370 (JK), University of Virginia School of Medicine (JB).
SURGERY | |||
Ball Point Applicator | Metrex Research | 8300-F | i-bond applicator |
Cranioplast (Powder/Resin) | Coltene | H00383 | Perm Reline/Power |
I-Bond | Kulzer GmbH, Germany | ||
LOOK Silk Suture | Surgical Specialities Corporation | SP115 | LOOK SP115 Black Braided Silk Non absorbable surgical suture |
RS-5168 Botvin Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5168 | Forcep for surgery/ligation |
RS-5138 Graefe Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5138 | Forcep for surgery/ligation |
UV light for I-Bond | Blast Lite By First Media | BL778 | UV ligth for I-bond |
Vannas Microdissecting Scissor | Roboz Surgical Instrument | RS5618 | Scissor for ligation |
Vet Bond | 3M Vetbond | 1469SB | Vet Glue |
HYPOXIA | |||
Hypoxidial | Starr Life Science | ||
Oxygen sensor | Medical Products | MiniOxI- oxygen analyzer/sensor for hypoxia rig | |
EEG RECORDING | |||
Female receptacle connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 832-10-024-10-001000 | Ordered from Digikey |
Grass Amplifier | Natus Neurology Incorporated | Grass Product | |
LabChart Pro | ADI Instruments | Software to run the system | |
Male Socket Connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 833-43-024-20-001000 | Ordered from Digikey |
Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2274CD | TLC2274 Quad Low‐Noise Rail‐to Rail Operational Amplifier |
Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2272ACDR | TLC2274 Quad Low‐Noise Rail‐to Rail Operational Amplifier |
Stainless Steel wire | A-M Systems | 791400 | 0.005" Bare/0.008" Coated 100 ft |
Ultra-Flexible Wire | McMaster-Carr | 9564T1 | 36 Gauze wire of various color |