In deze studie werd een voedingssysteem ontwikkeld voor nimfen- en larvestadia van harde teek met behulp van een capsule die aan de laboratoriummuis is bevestigd. De voercapsule is gemaakt van flexibele materialen en blijft minstens een week stevig aan de muis vast zitten en maakt een comfortabele monitoring van het voeden van teek mogelijk.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Een capsule-gebaseerd model voor onrijpe Harde Tik Stadia Besmetting op Laboratoriummuizen
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Teken zijn verplichte bloedvoedingsparasieten in alle stadia van ontwikkeling (behalve eieren) en worden erkend als vectoren van verschillende ziekteverwekkers. Het gebruik van muismodellen in tekenonderzoek is van cruciaal belang voor het begrijpen van hun biologie en tick-host-pathogen interacties. Hier tonen we een niet-moeizame techniek voor het voeden van onrijpe stadia van harde teken op laboratoriummuizen. Het voordeel van de methode is de eenvoud, korte duur, en de mogelijkheid om te controleren of te verzamelen teken op verschillende tijdstippen van een experiment. Bovendien maakt de techniek het mogelijk om twee individuele capsules op dezelfde muis te bevestigen, wat gunstig is voor een verscheidenheid aan experimenten waarbij twee verschillende groepen teken nodig zijn om zich met hetzelfde dier te voeden. De niet-irriterende en flexibele capsule is gemaakt van gemakkelijk toegankelijke materialen en minimaliseert het ongemak van de proefdieren. Bovendien is euthanasie niet nodig, muizen herstellen zich volledig na het experiment en zijn beschikbaar voor hergebruik.
Inleiding
Teken zijn belangrijke vectoren van verschillende ziekteverwekkers en vormen een ernstig risico voor de gezondheid van mens en dier1. Het opzetten van een effectief voedingssysteem is cruciaal bij het bestuderen van hun biologie, tick-host-pathogen interacties, of het vaststellen van effectieve controlemaatregelen. Momenteel zijn verschillende kunstmatige voedersystemen, die het gebruik van levende dieren vermijden, beschikbaar voor teken2,,3,4 en deze moeten worden gebruikt wanneer experimentele omstandigheden dit toelaten. In verschillende experiment....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Houd er rekening mee dat dit protocol alleen kan worden toegepast wanneer alle welzijns- en veiligheidsmaatregelen in het laboratorium zijn genomen. Dit protocol kreeg toestemming om muizen te gebruiken voor het voeden van teek door de Ethics Committee for Animal ExperimentsComEth Anses/ENVA/UPEC, Permit Numbers E 94 046 08. Voor het eindpunt werden de dieren gedurende 9 minuten blootgesteld aan CO2 in twee fasen van elk 4 en 5 min.
1. Voorbereiding van de capsule
- Plak 2 mm dik EVA-schuim en het lijmdubbel plakkerig schuim aan elkaar(figuur 1A).
- Snijd met behulp van een 20 mm diam....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Wij stellen de gedetailleerde stapsgewijze methode voor voor het voeden van onrijpe harde tekenstadia in EVA-schuim capsules toegepast op de rug van een muis(figuur 2). Dit niet-moeizame protocol is geschikt voor verschillende soorten experimenten wanneer nauwkeurige tekenbewaking en -verzameling vereist is. De belangrijkste voordelen van deze methode zijn de eenvoud, gemakkelijk toegankelijke kosteneffectieve materialen, en korte duur. Bovendien zijn we erin geslaagd om twee capsules aan éé.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
De meest kritieke stap in het protocol is stevig lijmen van de capsule op de muishuid. Daarom moet de latexlijm homogeen worden aangebracht op het gehele EVA-schuimoppervlak van de capsule en moet constante druk gedurende 3 minuten worden uitgeoefend, vooral aan de linker- en rechterkant van de capsule. We raden ook aan om de capsule zo ver mogelijk naar voren te plaatsen op de rug om te voorkomen dat de muis met de achterste poten wordt verwijderd. In onze experimenten is alleen de hechting van het EVA-schuim en latex l.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Wij erkennen de technische bijstand van Alain Bernier French National Institute of Agricultural Research (INRAE) en Océane Le Bidel (ANSES). De studie werd ondersteund door de DIM One Health - Région Île-de-France (Acroniem van het project: NeuroPaTick). De muizen werden gekocht door ANSES. Dr. Jeffrey L. Blair wordt erkend voor het herzien van de eerdere versie van het manuscript.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| EVA-foam 2 mm dik, (lage dichtheid) | Cosplay Shop | EVA-45kg (950/450/2 mm) | Het kan ook worden besteld via Amazon (ref. nr. B07BLMJDXD) |
| Heat Shrink Tubing Electric Wire Wrap Sleeve 31mm/1.22 inch | Amazon | B0848S3S6T | Er zijn verschillende diameters van Heat Shrink Tubing verkrijgbaar via Amazon. |
| Mice BALB/cByJ | Charles River | Stamcode 627 | |
| Mice C57BL/6 | Charles River | Stamcode 664 | |
| Niet-toxisch latexlijm | Scheurpleister | Lijk- en lederen kleefstof | Ook verkrijgbaar via Amazon (ref. nr. B001RQCTUU) |
| Punch Tool Hand Art Tool | Amazon | B07QPWNGBF | Verkocht door Amazon als Leather Working Tools 1-25mm Round Steel Leather Craft Cutter Working voor riemgespen |
| PVC-bindcovers doorschijnend | Amazon | B078BNLSNP | Elke doorschijnende PVC-plaat met een dikte tussen 0,150 mm en 0,180 mm is geschikt |
| Zelfklevende pad sponsapplikations dubbelzijdig schuimtape | Amazon | B07RHDZ35J | Verkocht door Amazon als 2 rollen dubbelzijdige schuimtape, super sterke witte montagetape schuim |
| Transparante zegelstickers (cirkels met een diameter van 20 mm) | Amazon | B01DAA6X66 |
Referenties
- Sonenshine, D. E., Roe, M. Biology of Ticks. , Oxford University Press. (2014).
- Kröber, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).
- Bonnet, S., et al.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
