В этом исследовании, система кормления для нимфальных и личиночки этапов жесткого клеща была разработана с помощью капсулы прилагается к лабораторной мыши. Кормовая капсула изготовлена из гибких материалов и остается прочно прикрепленной к мыши в течение по крайней мере одной недели и позволяет комфортно контролировать кормление клещей.
Клещи являются обязательными паразитами для кормления крови на всех стадиях развития (кроме яйцеклеток) и признаются переносчиками различных патогенов. Использование моделей мышей в исследованиях клещей имеет решающее значение для понимания их биологии и взаимодействия тик-хозяина-патогена. Здесь мы демонстрируем нетязвую технику кормления незрелых стадий твердых клещей на лабораторных мышах. Преимущество метода заключается в его простоте, короткой продолжительности и способности контролировать или собирать клещей в разные моменты эксперимента. Кроме того, методика позволяет накрепление двух отдельных капсул на одной и той же мыши, что полезно для различных экспериментов, где две разные группы клещей должны питаться одним и тем же животным. Не раздражающая и гибкая капсула изготовлена из легкодоступных материалов и сводит к минимуму дискомфорт экспериментальных животных. Кроме того, эвтаназия не является необходимым, мыши полностью восстановить после эксперимента и доступны для повторного использования.
Клещи являются важными переносчиками нескольких патогенов и представляют серьезную опасность для здоровья животных и человека1. Создание эффективной системы питания имеет решающее значение при изучении их биологии, взаимодействия тик-хозяина и патогена или установлении эффективных мер контроля. В настоящее время несколько систем искусственного кормления, которые избегают использования живых животныхдоступны для клещей 2,3,4, и они должны быть использованы всякий раз, когда экспериментальные условия позволяют., Однако в различных экспериментальных условиях эти системы не могут надлежащим образом имитировать специфические физиологические особенности, и использование живых животных необходимо для достижения соответствующих результатов.
Лабораторные мыши обычно используются для изучения многих биологических систем и регулярно используются в качестве хозяев длякормления клещей 5,,6,,7,,8,,9. Два наиболее распространенных метода кормления незрелых клещей на мышах включают бесплатные заражения и использование камер заключения прилагается к мыши. Бесплатные заражения в основном используются для личинок этапов и engorged клещей может упасть в область, где они могут быть восстановлены. Камеры заключения обычно состоят из акриловых или полипропиленовых колпачков, которые приклеены к спине мыши. Первый метод является эффективной естественной системой для кормления клещей, но не позволяет внимательно следить во время эксперимента, потому что отдельные клещи рассредоточены в разных частях тела хозяина. Кроме того, engorged клещей, которые падают в области восстановления может стать загрязненныхкала и мочи 10,11,12,13,14, которые могут серьезно повлиять на тик фитнес или они могут быть повреждены или съедены мышью, если нет разделения между животным и восстановления области15.,, Камерные системы позволяют засовывать клещей в определенную область, однако процесс склеивания трудоемкий и колпачки часто слабо придерживаются клея и поэтому часто отсоединяются во время эксперимента16,,17,,18,,19. Крышки также жесткие, неудобно, и привести к кожным реакциям, которые препятствуют повторному использованию мышей и требует их эвтаназии после эксперимента.
В нашем предыдущем исследовании, мы успешно разработали эффективную систему с использованием камер из этилено-винилового ацетата (EVA) пены для кормления клещей на лабораторныхкроликов 20. В этом случае мы адаптировали эту систему к модели мыши и предлагаем простой и чистый метод подачи незрелых жестких тиковых стадий в закрытых капсулах из ЭВА-пены. В частности, наша система использует эластичные капсулы EVA-пены, приклеенные к бритым мышам обратно с быстрой сушкой (3 мин), не раздражающим латексным клеем. Этот метод позволяет твердое и длительное присоединение капсул к экспериментальной мыши, а также эффективное заражение клещей / сбор в течение всего эксперимента. Плоская капсула изготовлена из гибких материалов и не препятствует манипуляции мышью для сбора крови или других целей. Система подходит в основном для нимфальных стадий клеща, но с небольшим изменением она может быть использована для кормления личинок, а также. Метод может быть завершен одним опытным человеком и обширная подготовка не требуется.
Наиболее важным шагом в протоколе является твердое склеивания капсулы к коже мыши. Поэтому латексный клей следует однородно нанесите на всю поверхность капсулы ЭВА-пены и следует применять постоянное давление в течение 3 минут, особенно на левую и правую сторону капсулы. Мы также реком…
The authors have nothing to disclose.
Мы признаем техническую помощь Национального института сельскохозяйственных исследований имени Алена Бернье (INRAE) и Окан Ле Биделя (ANSES). Исследование было поддержано DIM One Health – Регион Иль-де-Франс (Акроним проекта: NeuroPaTick). Мыши были приобретены ANSES. Д-р Джеффри Л. Блэр признан за пересмотр более ранней версии рукописи.
EVA-foam 2 mm thick, (low density) | Cosplay Shop | EVA-45kg (950/450/2 mm) | It can be ordered also via Amazon (ref. no. B07BLMJDXD) |
Heat Shrink Tubing Electric Wire Wrap Sleeve | Amazon | B014GMT1AM | Different diameters of Heat Shrink Tubing are available via Amazon. |
Mice BALB/cByJ | Charles River | Strain code 627 | |
Mice C57BL/6 | Charles River | Strain code 664 | |
No-toxic Latex Glue | Tear mender | Fabric & Leather Adhesive | Also available also via Amazon (ref. no. B001RQCTUU) |
Punch Tool Hand Art Tool | Amazon | B07QPWNGBF | Saled by amazon as Leather Working Tools 1-25mm Round Steel Leather Craft Cutter Working for Belt Strap |
PVC Binding Covers Transparent | Amazon | B078BNLSNP | Any transparent PVC sheet of ticknes between 0.150 mm to 0.180 mm is suitable |
Self Adhesive Pad Sponge Double Coated Foam Tape | Amazon | B07RHDZ35J | Saled by amazon as 2 Rolls Double Sided Foam Tape, Super Strong White Mounting Tape Foam |
Transparent seal stickers (20 mm diameter circles) | Amazon | B01DAA6X66 |