В этом исследовании, система кормления для нимфальных и личиночки этапов жесткого клеща была разработана с помощью капсулы прилагается к лабораторной мыши. Кормовая капсула изготовлена из гибких материалов и остается прочно прикрепленной к мыши в течение по крайней мере одной недели и позволяет комфортно контролировать кормление клещей.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Капсула на основе модели для незрелых жесткий тик этапы заражения на лабораторных мышей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Клещи являются обязательными паразитами для кормления крови на всех стадиях развития (кроме яйцеклеток) и признаются переносчиками различных патогенов. Использование моделей мышей в исследованиях клещей имеет решающее значение для понимания их биологии и взаимодействия тик-хозяина-патогена. Здесь мы демонстрируем нетязвую технику кормления незрелых стадий твердых клещей на лабораторных мышах. Преимущество метода заключается в его простоте, короткой продолжительности и способности контролировать или собирать клещей в разные моменты эксперимента. Кроме того, методика позволяет накрепление двух отдельных капсул на одной и той же мыши, что полезно для различных экспериментов, где две разные группы клещей должны питаться одним и тем же животным. Не раздражающая и гибкая капсула изготовлена из легкодоступных материалов и сводит к минимуму дискомфорт экспериментальных животных. Кроме того, эвтаназия не является необходимым, мыши полностью восстановить после эксперимента и доступны для повторного использования.
Введение
Клещи являются важными переносчиками нескольких патогенов и представляют серьезную опасность для здоровья животных и человека1. Создание эффективной системы питания имеет решающее значение при изучении их биологии, взаимодействия тик-хозяина и патогена или установлении эффективных мер контроля. В настоящее время несколько систем искусственного кормления, которые избегают использования живых животныхдоступны для клещей 2,3,4, и они должны быть использованы всякий раз, когда экспериментальные условия позволяют., Однако в различных экспериментальных услов....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Пожалуйста, обратите внимание, что этот протокол может применяться только тогда, когда все меры по обеспечению благосостояния и безопасности будут выполнены в лаборатории. Этот протокол получил разрешение на использование мышей для кормления клещей Комитетом по этике для экспериментов на животныхComEth Anses/ENVA/UPEC, Номера разрешений E 94 046 08. Для конечной точки, животные подвергались воздействию CO2 в течение 9 минут в два этапа по 4 и 5 минут каждый из них.
1. Подготовка капсулы
- Stick 2 мм толщиной EVA-пены и клей двойной липкой пены вместе(рисунок 1A).
- Используя 20 мм диа....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Мы предлагаем подробный шаг за шагом метод для кормления незрелых жестких стадий тик в EVA-пены капсулы, применяемые к спине мыши(рисунок 2). Этот не трудоемкий протокол подходит для различных типов экспериментов, когда требуется точный мониторинг и сбор тиков. Основными преимуществами этого метода являются его простота, легкодоступные экономически эффективные материалы и короткая продолжительность. Кроме того, нам удалось прикрепить две капсулы к одной мышиного человека.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Наиболее важным шагом в протоколе является твердое склеивания капсулы к коже мыши. Поэтому латексный клей следует однородно нанесите на всю поверхность капсулы ЭВА-пены и следует применять постоянное давление в течение 3 минут, особенно на левую и правую сторону капсулы. Мы также рекомендуем размещение капсулы как можно дальше вперед на спине, чтобы избежать ее удаления мышью с помощью задних лап. В наших экспериментах, только приклеить EVA-пены и латексного клея к коже мыши была проверена, и мы не можем гарантировать до.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторов нечего раскрывать.
Благодарности
Мы признаем техническую помощь Национального института сельскохозяйственных исследований имени Алена Бернье (INRAE) и Окан Ле Биделя (ANSES). Исследование было поддержано DIM One Health - Регион Иль-де-Франс (Акроним проекта: NeuroPaTick). Мыши были приобретены ANSES. Д-р Джеффри Л. Блэр признан за пересмотр более ранней версии рукописи.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| EVA-пена толщиной 2 мм, (низкая плотность) | Магазин косплея | EVA-45kg (950/450/2 мм) | Его можно заказать также через Amazon (арт. No B07BLMJDXD) |
| Термоусадочная трубка Электрическая проволочная обмотка рукав 31 мм/1,22 дюйма | Amazon | B0848S3S6T | Различные диаметры термоусадочных трубок доступны через Amazon. |
| Мыши BALB/cByJ | Charles River | Код штамма 627 | |
| Мыши C57BL/6 | Charles River | Код штамма 664 | |
| Нетоксичный латексный клей | Tear mender | Ткань и Клей для кожи | Также доступен через Amazon (арт. No B001RQCTUU) |
| Инструмент для пробивки Инструмент для ручного искусства | Amazon | B07QPWNGBF | продается Amazon как инструменты для обработки кожи 1-25 мм Круглый стальной резак для кожи Ремешок для ремня |
| Чехлы для крепления ПВХ Прозрачные | B078BNLSNP | Подходит любой прозрачный лист ПВХ от 0,150 мм до 0,180 мм Подходит | |
| самоклеящаяся прокладка Губка с двойным покрытием Пенопластовая лента | Amazon | B07RHDZ35J | продается Amazon в виде двухсторонней пенопластовой ленты в 2 рулонах, сверхпрочной белой монтажной ленты Наклейки с прозрачным уплотнением из пенопласта |
| (круги диаметром 20 мм) | Amazon | B01DAA6X66 |
Ссылки
- Sonenshine, D. E., Roe, M. Biology of Ticks. , Oxford University Press. (2014).
- Kröber, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).
- Bonnet, S., et al.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
