Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

OP-IVM: שילוב של התבגרות במבחנה לאחר אחזור אוציט עם ניתוח גינקולוגי

Published: May 9, 2021 doi: 10.3791/61647
Automatic Translation
*1,2,3,4,5, *1,2,3,4,5, *1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5, 1,2,3,5, 1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5
1Center for Reproductive Medicine, Department of Obstetrics and Gynecology, Peking University Third Hospital, 2National Clinical Research Center for Obstetrics and Gynecology, 3Key Laboratory of Assisted Reproduction, Ministry of Education, 4Beijing Key Laboratory of Reproductive Endocrinology and Assisted Reproduction, 5Research Units of Comprehensive Diagnosis and Treatment of Oocyte Maturation Arrest, Chinese Academy of Medical Sciences
* These authors contributed equally

ERRATUM NOTICE

Summary

התבגרות חוץ גופית (IVM) לפני ניתוח גינקולוגי (OP-IVM) משלב IVM לאחר אחזור ביציות עם ניתוח גינקולוגי שגרתי ומשמש כהרחבה של יישומי IVM קונבנציונליים לשימור פוריות.

Abstract

השימוש בהבשלה במבחנה (IVM) לפני ניתוח גינקולוגי (OP-IVM) הוא הרחבה של IVM קונבנציונאלי המשלב IVM לאחר אחזור ביציות עם ניתוח גינקולוגי שגרתי. OP-IVM מתאים לחולים העוברים ניתוח גינקולוגי שפיר שיש להם צורך בשימור פוריות (FP) או טיפולי פוריות כגון הפריה חוץ גופית והעברת עוברים (IVF-ET). בחדר הניתוח, מטופלים העוברים ניתוח גינקולוגי שפיר הם תחילה מרדים ומקבלים טיפול בשאיפה זקיקית לא בוגרת מונחית אולטרסאונד (IMFA). כאשר הניתוח הגינקולוגי הבא מבוצע, מתחמי הקומולוס-ביציות (COCs) נבדקים, וה- COCs הלא בוגרים מועברים לבינוני IVM ומתורבתים במשך 28-32 שעות במעבדת ההפריה ההפריה הה גופית. לאחר הערכה, ביציות בוגרות בשלב MII ייבחרו ויוקפאו בחנקן נוזלי ל- FP או מופרות על ידי הזרקת זרע intracytoplasmic (ICSI) להפריה חוץ גופית-ET. על ידי שילוב IVM עם ניתוח גינקולוגי, ביציות לא בוגרות שהיו נזרקות ניתן לשמור ולהשתמש בהן לטכנולוגיית הרבייה בסיוע (ART). ההליך, המשמעות וההיבטים הקריטיים של OP-IVM מתוארים במאמר זה.

Introduction

IVM היא אמנות שבה ביוציטים אנושיים לא בוגרים מתורבתים במבחנה להבשלה של IVF-ET או FP. ב IVM, תרופות אינדוקציה הביוץ אינם משמשים, ובכך להפחית כאב, נטל כספי, וסיבוכים כגון תסמונת גירוי יתר השחלות (OHSS)1,2. בנוסף, IVM מתאים במיוחד ל- FP של חולי סרטן ולטיפול פוריות של חולים רגישים להורמונים אשר עשויים להיות מסוגלים או אין להם זמן לקבל טיפול אינדוקציה ביוץ3. לכן, למרות מספר הביציות שאוחזרו, שיעור ההריון הקליני (החייאה), ושיעור הילודה החיה (LBR) נמוכים מאלה של IVF4,5, IVM יש יתרונות ייחודיים משלה.

חולים עקרים עם נגעים רירית הרחם, הידרוסלפינקס, או ציסטות השחלות בדרך כלל יש ניתוח גינקולוגי לפני טיפול ART, ואת הביציות שלהם הם בדרך כלל לא בוגרים. OP-IVM משתמשת באולטרסאונד טרנסווגינלי מונחה כדי לאחזר את הביציות הלא בוגרות ולגדל אותם במבחנה עד ההבשלה של IVF-ET או FP. OP-IVM משלב IVM לאחר אחזור ביציות וניתוח גינקולוגי, ובכך מפחית סיבוכים הנפוצים במחזורי גירוי יתר של השחלות הנשלטות וחוסכים זמן וכסף. עבור חולים פוריים, OP-IVM יכול לשמש "ביטוח פוריות" תוך כדי ניתוח גינקולוגי שגרתי.

יתר על כן, נזקים הנגרמים על ידי ניתוחים גינקולוגיים, כגון electrocautery6,7 ו כריתת גידול השחלות, ניתן להפחית באמצעות אחזור ביציות לפני ניתוח גינקולוגי. לכן, בהשוואה לניתוח גינקולוגי שגרתי, OP-IVM יכול להפחית את מספר הניתוחים במהלך טיפול פוריות ולמנוע אובדן ביוצים פונקציונליים במהלך ניתוח השחלות.

מחקר קודם הראה כי ההליך הנוסף של אחזור הביצית לא יגביר סיבוכים כירורגיים ותוצאות הריון שליליות, ולא יאריך את שהות ביתהחולים 8. חלק מהחולים ילדו חיים באמצעות OP-IVM8, המציין את ההיתכנות של שיטה זו. מאמר זה מתאר מאפיינים של חולים שעשויים להפיק תועלת OP-IVM, כמו גם נהלים ונקודות קריטיות של OP-IVM ודן בהערכת בגרות oocyte אנושית.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

הערה: מחקרים הקשורים לשיטת OP-IVM אושרו על ידי ועדת הבדיקה המוסדית (IRB) של בית החולים השלישי של אוניברסיטת פקין וועדת האתיקה של אוניברסיטת פקין (2014S2004). סיכום של OP-IVM מוצג באיור 1. ההליך שלב אחר שלב יוצג בסעיף הבא.

1. מבוא OP-IVM לחולים מתאימים

  1. זהה מטופלים פוטנציאליים שעשויים להפיק תועלת מ- OP-IVM כגון אלה המתוארים בשלבים 1.1.1-1.1.3.:
    1. תסמונת השחלות הפוcystic (PCOS) חולים עם התנגדות clomiphene הזקוקים לניתוח קידוח שחלות לפרוסקופי.
    2. חולים עקרים הזקוקים לניתוחים גינקולוגיים שפירים, כגון מיומקטומיה היסטרוסקופית, פוליפקטומיה, כריתה טרנסצרבית של מחיצה וניתוח חצוצרות לפרוסקופי, ו כריתת אופורוסיסטה, לפני טיפול ART.
    3. חולים עם סרטן או מחלה המטולוגית המקבלים כימותרפיה או הקרנות.

2. הסכמה מדעת

  1. ספק מידע מלא למטופלים, כולל מדוע OP-IVM עשוי להיות מועיל, ההליך שלה, שימושים ביציות IVM (IVF-ET או cryopreservation), CPRs משוער ו LBRs, וסיבוכים אפשריים. בקש מהמטופלים לתת הסכמה מדעת על ידי חתימה על טופס ההסכמה.

3. הכנת תוויות וביציות IVM בינוניות

  1. הדפס תוויות זיהוי (ID) עם שם המטופל ותאריכי מנות תרבות וצינורות.
  2. יש להוסיף 0.5 מ"ל של בינוני IVM בתוספת 0.075 יב"ל/מ"ל של הורמון מגרה זקיק (FSH) ו-0.075 יחב"ל/מ"ל של הורמון מחלמן (LH) לכל באר של צלחת 4-well. מכסים את המדיום בשמן.
    הערה: בצע את כל ההליכים האלה בספסלים נקיים של זרימת למינאר.
  3. לפני המלחמה את צלחת 4-well עם IVM ביוציטים בינוני ב 37 °C (5 °F) באוויר לח המכיל 5% CO2 ו 5% O2 לפחות 6 שעות לפני השימוש.

4. מתן הרדמה בחדר ניתוח

  1. בדוק את שם המטופל לפני מתן הרדמה.
  2. באופן תוך ורידי מרדים את המטופל על ידי רופא מרדים.

5. בצע אחזור ביטי

  1. תייג את התוויות עם שם, תאריך ותעודת זהות על מנות התרבות והצינורות.
  2. מניחים את המטופל בתנוחת ליתום שלפוחית השתן; כל הזמן לחטא, לעטוף, ולשפשף את הנרתיק עם תמיסת מלח חמה.
  3. מניחים את בדיקת האולטרסאונד בתוך הנרתיק; לסרוק ולתעד את מספר הזקיקים בשתי השחלות. מצא את המיקום הקרוב ביותר לשחלה כאתר הדקירה, והימנע מהמעי, שלפוחית השתן וכלי הדם הגדולים.
  4. שאפו נוזל זקיק.
    1. לשטוף את המחט עם pH יציב טיפול בינוני לפני ניקוב (ראה שולחן של חומרים).
    2. הזריק את 19 G, מחט שאיפה לומן יחיד לתוך השחלות תחת הדרכתו של אולטרסאונד.
    3. לנקב זקיקים גדולים יותר עם גבולות ברורים הקרובים ביותר לגשוש. במצב נמוך, הזריקו במהירות את תמיסת השטיפה בתוספת 25 U/mL של הפרין. לשאוף נוזל זקיק עם המחט תחת לחץ של 80-90 מ"מ כ"ג, סיבוב המחט מעט לשאוף נוזל זקיקים רבים ככל האפשר. לנקב זקיקים אחרים מהצד הקרוב עד רחוק במטוס הזה.
      הערה: במהלך השאיפה, נוזל זקיקים המכילים oocytes יזרום לתוך מבחנה סטרילית 10 מ"ל תחת לחץ שלילי. הפרין יכול להפחית את צמיגות נוזל הזקיקים כדי להקל על תהליך השאיפה.
    4. הסר את המחט מן השחלה (לשמור את המחט בקיר הנרתיק). להתאים את הכיוון של בדיקת אולטרסאונד, ולנקב את הזקיקים הנותרים על מטוסים אחרים. נסה לשאוף את כל הזקיקים בקוטר של ~ 5-9 מ"מ.
      הערה: התאימו את מיקום הגשושית כדי לשמור אותה הקרובה ביותר לשחלות בכל עת. לחץ על פורניקס הנרתיק עם כוח מתאים כדי להפחית פציעה ודימום.
    5. שלפו את המחט לאחר סיום בשחלה אחת, שטפו את המחט במדיום הטיפול, ונקבו את הצד השני באותה שיטה.
      הערה: שאיפה זקיקית מלאה בתוך 25-30 דקות.
  5. העבירו את נוזל הזקיקים מחדר הניתוח למעבדת ההפריה ההפריה הה חוץ גופית תוך מספר דקות לאחר אישור שם המטופל ותעודת הזהות שלו.
    הערה: העבר נוזל זקיק שאפתני לספסל המעבדה IVF בהקדם האפשרי כדי למנוע קרישה.
  6. לזהות דימום פעיל בחלל האגן עם אולטרסאונד במצב B לאחר ניקוב כל הזקיקים. הכנס ספקולום, וכוון את הקצה לפוניקס האחורי כדי לזהות דימום פעיל באתר הדקירה.
    הערה: אין צורך לראות דימום פעיל באתר הדקירה בנרתיק אם תנוחת השחלה תקינה ואחזור הביצית מבוצע בקפידה. לדימום קל שנמשך גם לאחר דחיסה, לשמור על דחיסת גזה סטרילית בנרתיק במשך 2-4 שעות. שליטה דימום מוגזם מעורקים קטנים באמצעות מלחציים עם מלקחיים כלי דם עבור 2-4 שעות. דימום בחלל האגן או בשחלה, אשר קורה לעתים רחוקות, צריך להיות נשלט על ידי אלקטרוקולציה על ידי ניתוח לפרוסקופי.

6. ניתוח גינקולוגי

  1. בהתבסס על הצורך והמצב של המטופל, בצע ניתוח גינקולוגי מתאים לאחר אחזור ביוציטים.
    1. בצע ניתוח קידוח שחלות לפרוסקופי לחולי תסמונת השחלות הפוליטית (PCOS) עם עמידות לקלומיפן.
    2. בצע ניתוח גינקולוגי שפיר עבור חולים עקרים לפני טיפול ART, כגון מיומקטומיה היסטרוסקופית, פוליפקטומיה, כריתה טרנסצרבית של מחיצה וניתוח חצוצרות לפרוסקופי, ו כריתת oophorocystomy.
    3. בצע כריתת השחלות עבור קריופרציה פוריות של חולים עם סרטן או מחלה המטולוגית שצריכים לקבל כימותרפיה.
      הערה: ניתוחים גינקולוגיים אלה הם ניתוחים קליניים בסיסיים ומתוקניים. הנחיות המבצע במדינות ובתי חולים שונות צריכות להיות דומות יחסית.

7. לבצע IVM

הערה: בצע את כל התהליך של IVM על שטוח הומותרמי 37 °C.

  1. לסנן את נוזל הזקיק שאפתן עם מסננת תא ניילון 70 מיקרומטר. יש לשטוף שוב ושוב את צינור התרבות ואת המסננת עם מדיום טיפול יציב pH מחומם מראש. ודא שכל COCs לא בוגרים מועברים לחלוטין לצלחת התרבות. לאסוף את הנוזל המסונן, לשטוף, ותרבות בצלחת פטרי 100 x 15 מ"מ.
  2. בדוק את ה- COCs (איור 2) תחת הסטריאוסקופ עם הגדלה של פי 40. מעבירים במהירות את ההשמדה למדיום ביציוט IVM מחמם מראש.
    הערה: בחר הגדלה מתאימה בהתאם להרגל של המפעיל.
  3. תעד את מספר ה-COCs הלא בוגרים המתורבתים.
  4. ליידע את המטופל על מספר COCs תרבותית. לדון באיסוף הזרע עם המטופלים ובני זוגם. בצע מיצוי זרע בהתאם להליך הרגיל.
  5. תרבות COCs לא בוגרים ב 37 °C (5 °F) באוויר לח המכיל 5% CO2 ו 5% O2 עבור 28-32 שעות.
  6. להעריך את הבגרות של המוציט.
    1. להוקיע את התאים המצטברים על ידי צנרת חוזרת ונשנית באמצעות פיפטת פסטר זכוכית מתחת לסטריאוסקופ עם הגדלה של פי 40. לבחון את שחול של גוף הקוטב (PB) כדי לזהות את השלב ההתפתחותי של ביציות. ראו איור 2 לקבלת תמונות מייצגות של ביציות בקוקטיים, מטפאזה II (MII), מטפאזה I (MI) ושלל נבטים (GVs) בעלי מאפיינים מורפולוגיים ברורים.
      הערה: השתמש בלהבה אנכית (למשל, של מבער בונזן) כדי להתאים את קוטר פיפטת פסטר הזכוכית לגודל של ביצות.
    2. תספור את היציטים ותקליט את המספר.
    3. בחר ביוציטים בוגרים להפריה גופית או ל-vitrification.
      הערה: לאסוף זרע ביום הביציות להבשיל עבור IVF, אבל לא עבור vitrification ביוציטים.
    4. תרבות ביציות לא בוגרות בשלב GV ו- MI במדיום התרבות IVM המקורי עם תאי קומולוס לעוד 10-14 שעות. חזור על שלבים 7.6.2-7.6.3.

8. בצע ICSI או vitrification ביוטה

  1. בצע את ההליך הסטנדרטי של מרכז הרבייה8.

9. עוברים תרבותיים ולבצע הקפאה של העובר

  1. בצע את ההליך הסטנדרטי של מרכז הרבייה8.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

עד דצמבר 2019, OP-IVM שימש לשימור פוריות של 274 חולים. תוצאות עובריות ורבייה של 158 חולים בין 2014 ל -2016 פורסמו במאמר קודם8. הדוגמה הבאה דנה בהליך שלאחריו עבור חולה PCOS שקיבל OP-IVM בשנת 2016. החולה הוא בן 28 שאובחן עם פוריות ראשונית, ציסטה אדנקסלית שמאלית ו- PCOS. היא קיבלה כריתת ציסטת לפרוסקופית ו-OP-IVMב-28 בספטמבר 2016; 27 COCs לא בוגרים הושגו. לאחר תרבות של 28 שעות, 7 ביציות בשלב MII נבחרו והופרו על ידי ICSI. מספר 2 פרו-גרעינים באיכות טובה (2PNs) ביום 1 ועוברים ביום 3, וביום 5 היו 6, 6 ו -2, בהתאמה. הפסטוציסטים שהושגו ביום ה-5(4 באוקטובר 2016) הוקפאו. ב-14בפברואר 2017 הופשר בלסטוציסט אחד. הפיצוץ המפושיר היה חי והועבר לרחם ב-14בפברואר 2017. תוצאות בדיקת גונדוטרופין כוריוני אנושי בדם (hCG) היו חיוביות, ו ultrasonography הראה הריון מוקדם תוך רחמי. החולה יילד ילדה בריאה בניתוח קיסרי ב-2 בנובמבר2017.

Figure 1
איור 1: תרשים זרימה OP-IVM. לפני ניתוח גינקולוגי, תחת הדרכת אולטרסאונד transvaginal, נוזל זקיק הוא שאפתני באמצעות IMFA. נוזל הזקיק המתקבל מועבר למעבדת ההפריה ההפריתית, מסונן ושטוף. COCs לא בוגרים מועברים לפתרון תרבות IVM מחמם מראש ומתורבתים עבור 28-32 שעות. ביוציטים בוגרים עם PB משמשים לשימור קריופרה או IVF-ET. קיצורים: IMFA = שאיפה זקיקית לא בוגרת; הפריה חוץ גופית = הפריה חוץ גופית; IVF-ET = IVF והעברת עוברים; COCs = מתחמי קומולוס-ביציות; IVM = התבגרות במבחנה; OP-IVM = IVM לפני ניתוח גינקולוגי; GV = נצנת נבטים; MI = מטפאזה I; ICSI = הזרקת זרע intracytoplasmic; PB = גוף קוטבי; PN = פרו-גרעין; D1 = יום 1. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 2
איור 2: מאפיינים מורפולוגיים של תמונות מייצגות של ביציות. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV שלב. קיצורים: COCs = מתחמי קומולוס-ביציט; GV = נצנת נבטים; MI = מטפאזה I; MII = מטפאזה II. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

שיטת OP-IVM המתוארת במאמר זה משתרעת על יישומי IVM קונבנציונליים ומשלבת IVM לאחר אחזור ביציות עם ניתוח גינקולוגי שגרתי. אוציטים שהיו הולכים לאיבוד בניתוח הגינקולוגי יכולים כעת לשמש להפריה גופית או FP ללא סיכונים כירורגיים נוספים. OP-IVM שימש לראשונה לאחזור ביוציטים לפני קידוח השחלות בחולי PCOS. היישום שלה התרחב עד מהרה לחולים עקרים הזקוקים לניתוח גינקולוגי שפיר וסרטן או חולי מחלה המטולוגית הזקוקים לכימותרפיה. בגלל הסיכון הפוטנציאלי של גרורות, OP-IVM אינו מתאים או מומלץ עבור חולים עם גידולים ממאירים. מבוסס על OP-IVM, מצב סיני חדש של בנק ביצים עבור FP של חולים עקרים וחולים בסרטן הוקם במוסד זה.

עבור OP-IVM, יש לשקול הן את הדחיפות של ניתוח גינקולוגי והן את הפוטנציאל של קבלת מספר גבוה יותר של ביוצים יש לקחת בחשבון. באופן כללי, תוצאת IVM מתואמת באופן חיובי עם מספר הביציות הלא בוגרות המתקבלות במהלך אחזור הביצית9. זקיקים דומיננטיים עשויים לעכב את הצמיחה של זקיקים קטנים יותר שמסביב ולגרום atresia10, וכתוצאה מכך מספר מופחת של ביציות לא בוגרות. לכן, אם הניתוח הגינקולוגי אינו דחוף, החלון הטוב ביותר עבור OP-IVM הוא כאשר מספר גדול יותר של זקיקים קטנים עם מעט זקיקים דומיננטיים נצפים על ידי ultrasonography מצב B. בנוסף, הורמון אנטי מולרי (AMH) יכול לשמש כפרמטר לחזות עתודת השחלות כמו המספרים של ביוציטים שאוחזרו מתואמים באופן חיובי באופן משמעותי עם AMH11,12. במקרים שבהם הפעולה הגינקולוגית קיבלה עדיפות, יש לאחזר כמה שיותר ביציות לא בוגרות. בפעולות חירום, אחזור ביוט ו- IVM צריכים להיות מוערכים בקפידה על סמך מצבו וצפותו של המטופל.

IMFA תחת הדרכת אולטרסאונד transvaginal היא שיטה המשמשת לאחזור oocytes שיכול להפחית את הנזק לתפקוד השחלות13,14. ניקוב שחלות לפרוסקופי לשאוף ביציות לא בוגרות משמש גם במחקרים מסוימים15. עם זאת, בהשוואה ללפרוסקופיה, IMFA תחת אולטרסאונד transvaginal תופס פחות זמן, הוא פחות פולשני, קל יותר לבצע16,17, והוא יכול להשיג שאיפה זקיק ממוקדת יותר. לכן, כדי למזער את ההשפעה על עתודת השחלות ולהגדיל את דיוק השאיפה, IMFA תחת הדרכת אולטרסאונד transvaginal מומלץ כשיטה טובה יותר עבור אחזור ביוט ב- OP-IVM. עם זאת, מומלץ להפריה של ICSI. מחקרים קודמים הראו כי zona pellucida יהיה להקשיח לאחר להיות בתרבית במבחנה במשך תקופות ארוכות, וכתוצאה מכך שיעור מופחת של הפריה מוצלחת18. הוכח כי ICSI משפר ביעילות את קצב ההפריה של ביציות IVM במחזורים טבעיים19,20. למרות מחקרים אחרונים הראו שיעורי הפריה דומים עבור ICSI ו הפריה חוץ גופית21,22, ICSI מחזיק את היתרון של שימוש במחזורים טבעיים במקום גירוי השחלות. עוברים שנאספו מוקפאים בגלל רירית הרחם לא מוכנה, והעברת העובר יכולה להתבצע מאוחר יותר על פי ההליך הסטנדרטי בכל מרכז.

מטרת האמנות היא לטפל באי פוריות וליילד תינוקות בריאים. מחקרים קודמים על תוצאות הרבייה של OP-IVM הראו כי המספרים של ביציות שאוחזרו ושיעורי ההתבגרות של הביצית דומים לאלה שנצפו עבור מחזורי IVM קונבנציונליים באמצעות FSH ו- hCG. עם זאת, OP-IVM יש החייאה נמוכה יותר LBR נמוך יותר מאשר IVM קונבנציונאלי8,23,24,25. זה יכול להיות מוסבר על ידי התבגרות ביציות מוגבלת בשל פוטנציאל הפיתוח המסכן של ביציות לא בוגרות במחזורים טבעיים. עם זאת, גירוי הורמונלי אינו אופציה עבור חלק מהחולים שאינם מסוגלים או שאין להם את הזמן לקבל את הטיפול. בנוסף, vitrification עלול לפגוע הפוטנציאל ההתפתחותי של הביצים, וכתוצאה מכך CPRs נמוך LBRs26,27.

יתר על כן, gonadotropins עשוי להגדיל את השחלות ולהגדיל את הסיכון לדימום במהלך אחזור ביציות, להשפיע לרעה על החשיפה של שדות אופרטיביים לפרוסקופיה. ה- LBR של שיטת OP-IVM נמוך יחסית. דרושים מחקרים נוספים כדי לבחון את התזמון האופרטיבי הטוב ביותר ולשנות את מערכת התרבות IVM כדי לשפר את תוצאות OP-IVM. בסך הכל, OP-IVM משלב IVM עם ניתוח גינקולוגי, כך ביציות לא בוגרות כי היה פגום או נזרק ניתן לשמור ולהשתמש עבור אמנות. OP-IVM יש את היתרונות של הימנעות סיבוכים הנגרמים על ידי תרופות מגרה השחלות והפחתת מספר הניתוחים לטיפול פוריות. לכן, OP-IVM צריך להיחשב כשיטת טיפול בעלת ערך פוטנציאלי עבור חולים מסוימים ולמד לעומק כדי להבין טוב יותר את ההשפעות והתוצאות שלה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgments

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מתוכנית המו"פ הלאומית של סין (מס ' 2017YFC1002000, 2018YFC1004001, 2019YFA0801400), הקרן הלאומית למדע של סין (מס '81571386, 81730038), קרן החדשנות CAMS למדעי הרפואה (2019-I2M-5-001), ופרויקט המחקר המיוחד של פיתוח בריאות ההון הסיני (2018-2-4095).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
19 G single-lumen aspiration needles Cook, Australia K-OPS-7035-REH-ET
4-well plate Corning
70 μm nylon cell strainer Falcon, USA 352350
CO2 Incubator Thermo
Culture oil Vitrolife, Sweden 10029,OVOIL  Step 3.2.
FSH & LH Ferring Reproductive Health, Germany MENOPUR®
Glass Pasteur pipette Hilgenberg GmbH, Germany 3154102-26
G-MOPS medium pH-stable handling medium for washing the needle before puncturing
IVM medium Origio, Denmark ART-1600-B
Laminar Flow Clean Benches ESCO
Petri dish Thermo Fisher Scientific, Denmark 263991
pH stable handing media designed to support the handling and manipulation of oocytes and embryos outside the incubator Vitrolife, Sweden 10130, G-MOPS PLUS Step 7.1.
Rinse solution Cook, Australia K-SIFB-100
Stereoscope Nikon

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
  2. Yang, Z. Y., Chian, R. C. Development of in vitro maturation techniques for clinical applications. Fertility and Sterility. 108 (4), 577-584 (2017).
  3. Hatirnaz, S., et al. Oocyte in vitro maturation: A sytematic review. Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 15 (2), 112-125 (2018).
  4. Gremeau, A. S., et al. In vitro maturation or in vitro fertilization for women with polycystic ovaries? A case-control study of 194 treatment cycles. Fertility and Sterility. 98 (2), 355-360 (2012).
  5. Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
  6. Sahin, C., et al. Which should be the preferred technique during laparoscopic ovarian cystectomy. Reproductive Sciences. 24 (3), 393-399 (2017).
  7. Xiao, J., et al. Impact of hemostatic methods on ovarian reserve and fertility in laparoscopic ovarian cystectomy. Experimental and Therapeutic. 17 (4), 2689-2693 (2019).
  8. Song, X. -L., et al. Enhancing the scope of in vitro maturation for fertility preservation: transvaginal retrieval of immature oocytes during endoscopic gynaecological procedures. Human Reproduction. 35 (4), 837-846 (2020).
  9. Magnusson, Å, Källen, K., Thurin-Kjellberg, A., Bergh, C. The number of oocytes retrieved during IVF: a balance between efficacy and safety. Human Reproduction. 33 (1), 58-64 (2018).
  10. Larose, H., et al. Gametogenesis: A journey from inception to conception. Current Topics in Developmental Biology. Wellik, D. M., et al. 132, Academic Press. 257-310 (2019).
  11. Broer, S. L., Broekmans, F. J. M., Laven, J. S. E., Fauser, B. C. J. M. Anti-Müllerian hormone: ovarian reserve testing and its potential clinical implications. Human Reproduction Update. 20 (5), 688-701 (2014).
  12. Arce, J. C., La Marca, A., Mirner Klein, B., Nyboe Andersen, A., Fleming, R. Antimüllerian hormone in gonadotropin releasing-hormone antagonist cycles: prediction of ovarian response and cumulative treatment outcome in good-prognosis patients. Fertility and Sterility. 99 (6), 1644-1653 (2013).
  13. Katayama, K. P., et al. Ultrasound-guided transvaginal needle aspiration of follicles for in vitro fertilization. Obstetrics and Gynecology. 72 (2), 271-274 (1988).
  14. Dellenbach, P., et al. Transvaginal sonographically controlled follicle puncture for oocyte retrieval. Fertility and Sterility. 44 (5), 656-662 (1985).
  15. Hirata, T., et al. Concomitant ovarian drilling and oocyte retrieval by laparoendoscopic single-site surgery led to live birth using in vitro maturation of oocyte and transfer of frozen-thawed blastocyst in woman with polycystic ovary syndrome. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 40 (5), 1431-1435 (2014).
  16. Deutinger, J., et al. Follicular aspiration for in vitro fertilization: sonographically guided transvaginal versus laparoscopic approach. European Journal of Obstetrics, Gynecology, and Reproductive Biology. 26 (2), 127-133 (1987).
  17. Tanbo, T., Henriksen, T., Magnus, O., Abyholm, T. Oocyte retrieval in an IVF program. A comparison of laparoscopic and transvaginal ultrasound-guided follicular puncture. Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 67 (3), 243-246 (1988).
  18. Nagy, Z. P., et al. Pregnancy and birth after intracytoplasmic sperm injection of in vitro matured germinal-vesicle stage oocytes: case report. Fertility and Sterility. 65 (5), 1047-1050 (1996).
  19. Söderström-Anttila, V., Mäkinen, S., Tuuri, T., Suikkari, A. -M. Favourable pregnancy results with insemination of in vitro matured oocytes from unstimulated patients. Human Reproduction. 20 (6), 1534-1540 (2005).
  20. Hwang, J. L., Lin, Y. H., Tsai, Y. L. In vitro maturation and fertilization of immature oocytes: a comparative study of fertilization techniques. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 17 (1), 39-43 (2000).
  21. Walls, M., Junk, S., Ryan, J. P., Hart, R. IVF versus ICSI for the fertilization of in-vitro matured human oocytes. Reproductive Biomedicine Online. 25 (6), 603-607 (2012).
  22. Park, J. H., Jee, B. C., Kim, S. H. Comparison of normal and abnormal fertilization of in vitro-matured human oocyte according to insemination method. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 42 (4), 417-421 (2016).
  23. Ho, V. N. A., Pham, T. D., Le, A. H., Ho, T. M., Vuong, L. N. Live birth rate after human chorionic gonadotropin priming in vitro maturation in women with polycystic ovary syndrome. Journal of Ovarian Research. 11 (1), 70 (2018).
  24. Zheng, X., et al. Effect of hCG priming on embryonic development of immature oocytes collected from unstimulated women with polycystic ovarian syndrome. Reproductive Biology and Endocrinology. 10, 40 (2012).
  25. Tannus, S., et al. Predictive factors for live birth after in vitro maturation of oocytes in women with polycystic ovary syndrome. Archives of Gynecology and Obstetrics. 297 (1), 199-204 (2018).
  26. Cohen, Y., et al. Decreased pregnancy and live birth rates after vitrification of in vitro matured oocytes. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 35 (9), 1683-1689 (2018).
  27. Yazdanpanah, F., Khalili, M. A., Eftekhar, M., Karimi, H. The effect of vitrification on maturation and viability capacities of immature human oocytes. Archives of Gynecology and Obstetrics. 288 (2), 439-444 (2013).

Tags

רפואה גיליון 171 IVM שימור פוריות אחזור טרנסווגינלי הליכים גינקולוגיים אנדוסקופיים PCOS

Erratum

Formal Correction: Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery
Posted by JoVE Editors on 06/26/2023. Citeable Link.

An erratum was issued for: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. The Protocol and Representative Results sections were updated.

Step 3.2 of the Protocol was updated from:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

to:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

The legend for Figure 2 was updated from:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

to:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

OP-IVM: שילוב של התבגרות במבחנה לאחר אחזור אוציט עם ניתוח גינקולוגי
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Liu, T., Song, X., Zheng, X., Yan,… More

Liu, T., Song, X., Zheng, X., Yan, L., Ma, C., Li, R., Yan, J., Qiao, J. OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. J. Vis. Exp. (171), e61647, doi:10.3791/61647 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter