Summary
Yüksek bir platform, sıçanları kısıtlama olmadan düzeltebilir ve akupunktur manipülasyonu sırasında arkadaki keskin noktaları tamamen açığa çıkarabilir. Bu makalede, yüksek platformun imalatı için yöntemler açıklanmaktadır, bir sıçan astım modeli oluşturur ve noninvaziv ve gerçek zamanlı tüm vücut pletirmografisi (WBP) sistemi kullanarak solunum fonksiyonundaki değişiklikleri ölçmektedir.
Abstract
Yüksek bir platform, sıçanları kısıtlama olmadan düzeltebilir ve akupunktur manipülasyonu sırasında arkadaki keskin noktaları tamamen açığa çıkarabilir. Bu makalede, yüksek platformun imalatı için yöntemler açıklanmaktadır, bir sıçan astım modeli oluşturur ve noninvaziv ve gerçek zamanlı tüm vücut pletirmografisi (WBP) sistemi kullanarak solunum fonksiyonundaki değişiklikleri ölçmektedir.
Introduction
Astım, bronkokonstriksiyon ve hava yolu hiper duyarlılığı ile karakterize kronik bir hastalıktır1. Dünyada yaklaşık 339,4 milyon kişiye astım tanısı konur2. Astım prevalansı küresel olarak artmaktadır, önümüzdeki on yıl içinde 100 milyon yeni vaka bekleniyor3. Solunan kortikosteroidler ve uzun etkili β2agonistler tüm hastaların semptomlarını etkili bir şekilde kontrol etmez4. Bu nedenle, astım tedavisinde akupunktur gibi alternatif tedavilerin kullanımı artmıştır5. Astım tedavisinde etkili bir yöntem iğne GV14 (Dazhui), bilateral BL12 (Fengmen) ve bilateral BL13 (Feishu)6. Akupunktur, alerjik astımlı hastaların tükürük ve burun salgılarındaki salgı immünoglobulin A (SIgA) seviyelerini önemli ölçüde azaltır ve periferik kan eozinofili sayılarını toplam% 85 etkili bir oran ile azaltır6. Kronik astımlı farelerde BL13 ve ST36'da (Zusanli) akupunktur IL-17 seviyesini% 40 azaltır ve düz kas kalınlığını ovalbumin (OVA) grubuna kıyasla% 33 azaltır ve böylece iltihap semptomlarını hafifletir7,8. Ancak astım için akupunktur tedavisinin mekanizması tam olarak net değildir.
Hayvan modelleri astım araştırmaları için önemli bir araçtır9 çünkü hayvan modeli astım tedavisinin etkinliğini değerlendirmek için solunum fonksiyonunun sürekli ölçümü için kullanılabilir10. Bu arada, astım patofizyolojisi çalışmaları, kilit faktörlerin seviyelerindeki değişiklikleri doğrulamak için trakea, akciğer ve bronkoalveolar lavajdan örnekler de dahil olmak üzere test örnekleri gerektirir11. Astımın sıçan modelleri astım patofizyolojisini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılır, çünkü uzun süreli hava yolu yanıtları üretirler ve acil ve geç fazlı hava yolu yanıtları gösterirler12. Bununla birlikte, tekrarlanan deneysel stimülasyon nedeniyle, sıçanlar genellikle irritabl hale gelir. Bu nedenle, sıçanları düzeltmek için uygun bir yönteme ihtiyaç vardır. Sıçan fiksasyonu için yaygın olarak kullanılan yöntemler arasında anestezi ve bağlama13bulunur. Anestezi yöntemi aküpuyonların daha iyi maruz kalmasını sağlasa da, sinir iletimini etkileyebilir ve sonuçta deneysel sonuçları etkileyebilir14. Bağlama yöntemi anestezi ile aynı fizyolojik etkilere neden olmaz, ancak kısıtlanmış sıçanlar iskelet kas gerginliği yaşar. Ayrıca, iğne belirlenen konuma kolayca ulaşamaz15. Burada, sıçanları kısıtlamadan düzeltmek ve arkadaki keskin noktaları tamamen ortaya çıkarmak için kullanılabilecek yüksek bir platform sunuyoruz. Sıçanlar akupunkturun yönetimi sırasında yüksek platforma yerlenebilir. Yüksek platform sıçanı sadece ayaktayken barındırabilir ve yerden belirli bir mesafeye yerleştirildiği için, sıçanlar yükseklik korkusu nedeniyle hareket etmeyecektir16.
Bu makalede, yüksek platformun imalatı, bir sıçan astım modelinin kurulması, yüksek platformda bir sıçanın ihtiyatı operasyonu ve tüm vücut pletirmografisi (WBP) sistemi kullanılarak solunum fonksiyonunun ölçülması ayrıntılı olarak açıklanmaktadır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Tüm hayvan deneyleri, Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Hayvan Deneyleri Etik Komitesi (Etik boşluk numarası PZSHUTCM190308020) tarafından incelendi ve onaylandı.
1. Yüksek platformun imalatı
- Destek cihazının uzunluğunu ve genişliğini 86 cm x 17 cm olarak ayarlayın (Şekil 1).
- Bağlantı cihazını destekleyen cihaza dikey olarak sabitleyin. Bağlantı cihazı, sıçanın yüksek platformun üst yüzeyine koşmasını önlemek için yaklaşık 30 cm uzunluğunda ve 14 cm genişliğe sahip olmalıdır.
- Yatay pedalı (5 cm x 5 cm) bağlantı cihazına sabitleyin. Yatay pedalın altındaki asma yükseklik 50 cm'den büyük veya eşit olmalıdır.
NOT: Deneysel sıçanların sayısına bağlı olarak, her pedala bir sıçan yerleştirilmiş birden fazla yatay pedal kullanılabilir.
2. Astımın sıçan modelinin kurulması
- OVA ile sıçanları duyarlı hale
- 0. günde duyarlılık çözümünü hazırlayın. Hassaslaştırma çözeltisinin her 1 mL'sini 1 mg OVA ve 10 mg alüminyum hidroksit ile çözücü olarak normal salin ile hazırlayın.
- Intraperitoneally her sıçana 0 gün içinde 1 mL duyarlılık çözeltisi enjekte edin. Hassaslaştırıcı çözeltiyi daha sonra kullanmak için uygun bir şırınna ile çizin.
- Kuyruğu tutun ve sıçanı kaldırın, pürüzlü bir yüzeye yerleştirin ve kuyruğu yavaşça geri çekin. Kalan üç parmak ve avuç içi ile sırt derisini sıkıca tutarken sol başparmak ve işaret parmağı ile hem kulakların hem de boynun derisini kavrayın (sıçanı boğacak fazla kuvvet uygulamaktan kaçınmaya dikkat edin).
- Sağ elle, duyarlılık çözeltisinin 1 mL'si ile hazırlanan şırınna ile sıçanda intraperitoneal bir enjeksiyon gerçekleştirin.
- OVA ile zorlu sıçanlar
- Kapaklı bir kutu seçin (uzunluk, genişlik ve yükseklik 39 cm x 28 cm x 23 cm'dir) ve yan tarafta küçük bir delik açın. Kapalı kutuyu, nebulizasyon kabını ve sıkıştırma nebülizörünü bir kauçuk tüple bağlayın(Ek Şekil 1).
NOT: Sıkıştırılmış nebülizörün nebülizör boyutu 1 - 5 μm, nebülizasyon oranı 0,2 mL/dk'dan büyük ve nihai basınç 205 kPa'dır. - Duyarlılıktan sonraki 14. günde, ev yapımı kapalı kutunun kapağını açın ve sıçanı kutuya yerleştirin (kutu 5 sıçanı barındırabilir) ve ardından mühürlü kutuyu bir biyogüvenlik kabinine koyun.
- Meydan okuma çözümünü hazırlayın. 300 mg OVA'yı 30 mL normal salinle iyice karıştırın.
- Ultrasonik nebülizörü açın ve nebülizör kabına 30 mL meydan okuma çözeltisi ekleyin. Meydan okuma çözeltisinin dozajını ve sıçan sayısını ev yapımı kapalı kutunun hacmine göre ayarlayın.
- Nebulizasyonu birkaç kez (günde bir kez) tekrarlayın veya astım semptomlarının şiddetine göre prosedürü ayarlayın.
- Kapaklı bir kutu seçin (uzunluk, genişlik ve yükseklik 39 cm x 28 cm x 23 cm'dir) ve yan tarafta küçük bir delik açın. Kapalı kutuyu, nebulizasyon kabını ve sıkıştırma nebülizörünü bir kauçuk tüple bağlayın(Ek Şekil 1).
3. Akupunktur tedavisi
- Astım tedavisi için geleneksel Çin tıbbı teorisine göre GV14, bilateral BL12 ve bilateral BL13 dahil olmak üzere keskin noktaları seçin(Ek Şekil 2). 2. günde manuel akupunktur uygulayın ve toplam 7 seans boyunca günde bir kez gerçekleştirin (Şekil 2).
- Yedinci servikal omur ile ilk torasik omur (kürek kemiğinin oyuk) arasında yer alan GV14'ün arkanın orta hattında akupunktur (Şekil 3).
- Üçüncü torasik omurun altında, interkostal boşlukların her iki tarafında (kürek kemiğinin alt kenarı) bulunan BL13'ü akupunkturlayın.
- Akupunktur BL12, ikinci torasik omurun altında, interkostal boşlukların her iki tarafında bulunur (kürek kemiğinin altında, BL13'e göre tanımlanan pozisyon).
- Sıçanları kavrayın ve yüksek platforma yerleştirin.
- Tek kullanımlık paslanmaz çelik iğneyi (0,3 mm x 13,0 mm, Tamamlayıcı Şekil 3)sağ elin başparmağı ve işaret parmağıyla tutun ve farenin arkasına sağ elin avuç içiyle bastırın.
NOT: Tek kullanımlık iğneler yalnızca tek kullanımlık olmalıdır. Çünkü tekrarlanan kullanım iğneyi köreltir ve bu da sıçanlarda ağrının artmasına neden olur. - Üst kenarın (GV14) ortasındaki veya kürek kemiğinin (BL12 ve BL13) alt kenarındaki depresyona dokunun ve ardından keskin noktaları bulmak için farenin cildini iğne ucuyla hafifçe batırın.
- Kulakçık belirli konumunu belirledikten sonra iğneyi hızlı bir şekilde yerleştirin ve sağ eli hızla çıkarın.
- İğneleri 10 - 20 s için 60 kez / dakika oranında yaklaşık 360 ° eşit şekilde büktü, her 5 dakikada bir manipüle etti ve 20 - 30 dakika sonra geri çekti(Ek Şekil 4).
4. Penh ölçümü
- Metakolin hazırlayın: 5 mL santrifüj tüpüne 100 mg metakolin yerleştirin ve PBS'yi 2 mL (50 mg/mL mehakolin) hacmine ekleyin. Daha sonra, 50 mg/mL metakolin çözeltisini 25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 6,25 mg/mL ve 3,125 mg/mL'ye seyreltin.
- Alet muayenesi
- Sinyal amplifikatörünü açın (aerosol dağıtım sistemi ve kemirgen önyargı akış besleme sistemi tamamen kapalıdır ve nebülizasyon konektörü kapalıdır).
- Kanalları kontrol edin: Kalibre Et'i tıklatın, kaba ayarlama taban çizgisini 0'a döndürün ve doğru akım (DC) konumuna geçin. Taban çizgisine 0'a ince ayar yapın ve bir şırınna ile 5 mL gaz enjekte edin. Ardından, alternatif akım (AC) konumuna geçin.
- Kanalları kontrol ettikten sonra hata değerinin %0,5'ten az olduğundan emin olun.
- Parametreleri ayarlama
- Aerosol dağıtım sistemini ve kemirgen önyargı akış besleme sistemini açın. Cıva topundaki sıvı seviyesine göre akış hızını 4,5 mL olarak ayarlayın.
- Çalışma Seçenekleri Oluştur 'u tıklatın ve Doz Yanıt Çalışması'nın öğesini seçin, türlerin Faresi 'ni seçin ve İleri 'yitıklatın.
- Basit Doz Listesi'ni seçin, Doz Sayısını 6 olarak ayarlayın ve İleri 'yitıklatın.
- Penh ve Area parametrelerini seçin: Hayvan adaptasyon süresini 5 dakikaya, nebülizasyon süresini 2 dakikaya, yanıt süresini 3 dakikaya ve iyileşme süresini 2 dakikaya ayarlayın.
- Nebülizöre sırayla aşağıdaki çözümleri ekleyin (sıçan başına 200 μL): mehakolin (0 mg/mL, 3.125 mg/mL, 6.25 mg/mL, 12.5 mg/mL, 25 mg/mL ve 50 mg/mL). Penh'de gerçek zamanlı değişiklikler gözlenebilir (Şekil 4).
- Farklı konsantrasyonlara sahip 6 çözümün tümüne tepki verildikten sonra, denemeyi tamamlamak için Dosya ve Oturumu Sonlandır'ı tıklatın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
GV14,bilateral BL12 ve bilateral BL13 noktalarında akupunktur ile sıçan eğilimli bir pozisyon korur. Sıçan kafasını sadece dışarıya doğru bükebilir, iç tarafa değil, çünkü bir yön ahşap bir tahta ile engellenir (Şekil 5).
Metakolin konsantrasyonu arttıkça Penh artan bir eğilim gösterir ve büyüme hızı giderek artar. 3.125 mg/mL, 6.25 mg/mL, 12.5 mg/mL, 25 mg/mL ve 50 mg/mL konsantrasyonlarında Penh %18.40 ± %10.70 arttı, %27,55 ± %26,30, %88,10 ± %45,63, %427,60 ± %172,92 ve %882,27 ± %121,97 oranında artan dozla artan bir etki göstermektedir (Şekil 6).
Şekil 1. Yüksek platformun imalatı. Yüksek platform bir destek cihazı, üç bağlantı cihazı ve üç pedaldan oluşur. Destek cihazının uzunluğu ve genişliği 86 cm x 17 cm, bağlantı cihazının uzunluğu ve genişliği 30 cm x 14 cm, pedalın uzunluğu ve genişliği 5 cm x 5 cm'dir. Her bağlantı cihazı 20 cm ile ayrılmıştır.
Şekil 2. Astımın bir sıçan modelini oluşturmak için protokol. 0. günde duyarlılık, 2.günden 14. güne kadar yüksek platformda iki günde bir akupunktur yapılır. Meydan okumadan sonra Penh'deki değişim ölçülür. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3. Sıçanlar üzerinde GV14 (Dazhui), BL12 (Fengmen)ve BL13 (Feishu) anatomik pozisyonları . (A) Kürek kemiği, birinci kaburga, ikinci kaburga, üçüncü kaburga ve ikinci torasik omur (T2) gösteren bir sıçanın arkasında anatomik diseksiyon. (B) Kaburgaların ve torasik omurların sagittal düzlemi. (C) Kürek kemiğinin kesit. (D) GV14: Kürek kemiğinin oyuğunda, sırtın orta hattında bulunur; BL13: Kürek kemiğinin alt kenarında bulunur; BL12: Kürek kemiğinin altında, BL13'e göre yerleştirilmiştir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 4. Solunum fonksiyonlarında gerçek zamanlı değişiklikler. Mavi eğri Penh'deki gerçek zamanlı değişiklikleri gösterir. Yeşil eğri, belirli bir süre boyunca gelgit hacmindeki (TVb) toplam değişimi gösterir. Mor eğri, Penh'deki belirli bir dönemdeki toplam değişimi gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 5. Yüksek platformdaki sıçanlarda GV14 (Dazhui), BL12 (Fengmen)ve BL13 (Feishu) akupunktur. (A) Sıçanlarda GV14, BL12 ve BL13 pozisyonlarının en iyi görünümü. (B) Yüksek bir platformda akupunkturlu bir sıçanın yanal görünümü. Sıçan platforma yerleştirilir ve akupunktur sırasında eğilimli pozisyonda tutulur. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 6. Penh ölçümü. WBP normal sıçanın Penh'ini ölçmek için kullanılır. Metakolin konsantrasyonu arttıkça, Penh de yavaş yavaş artar. Veriler ortalama ± SEM (n = 3) olarak sunulur. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Tamamlayıcı Şekil 1. Nebülizör özellikleri. Sıkıştırılmış nebülizörün nebülize parçacık boyutu 1 - 5 μm, nebülizasyon oranı 0,2 mL / dk'dan büyüktür ve nihai basınç 205 kPa'dır. Bu dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.
Tamamlayıcı Şekil 2. GV14 (Dazhui) ,BL12 (Fengmen)ve BL13 (Feishu) şematik konumları rat. Bu dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayın.
Tamamlayıcı Şekil 3. İğne özellikleri. İğnenin uzunluğu 13 mm ve çapı 0,3 mm'dir. Bu dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.
Tamamlayıcı Şekil 4. Akupunktur manipülasyonunun şeması. İğneyi yerleştirdikten sonra, iğneleri farklı yönlerde yaklaşık 360 ° eşit şekilde büktü. Bu dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu çalışmada kullanılan GV14, bilateral BL12 ve bilateral BL13 acupoints arka tarafta bulunur ve bu nedenle yüksek platform sıçanları sabitlemek için uygundur. Diğer çalışmalarda, acupoints konumuna göre yeterli bir fiksasyon yöntemi seçilmelidir15. Karın üzerindeki keskin noktalar için, sıçan siyah bir koni içine aşağı doğru yerlenebilir (fırıncılar tarafından kullanılan bir pasta torbasına benzer)17. Sabitleme için kısıtlama konisine bir zincir tutturulur ve sıçanın arka bacağı da sabitlenir. Bu şekilde, hayvanın vücudunun önü koniye sıkıca sabitlenirken, karın ve sırt açığa çıkar. Bacaktaki keskin noktalar için, sıçan özel şeffaf bir kovaya dikey olarak yerlenebilir, kuyruk ve arka bacakları doğal olarak kovanın dışında bırakabilir18. Şeffaf varil sıçanın vücudunu kaplar, ancak bacakta akupunktur için uygundur.
Bu yöntemleri gerçekleştirirken birkaç kritik adım göz önünde bulundurulmalıdır. Akupunktur tedavisinden önce, sıçanlar sessiz olana ve yüksek platformda sorunsuz nefes alana kadar birkaç gün önceden eğitim için yüksek platforma yerleştirilmelidir. Akupunktur manipülasyonu için, sağ elin avuç içi sıçanı geriye ne kadar sert bastırırsa, iğneyi yerleştirmek o kadar kolay olur. Solunum fonksiyon ölçümü için WBP sistemi, Penh'de sıçanların akciğer direncindeki değişiklikleri noninvaziv bir şekilde yansıtan değişiklikleri ölçer ve psikolojik stresin etkilerini en aza indirir19,20. Dış ortamın sıçanlar üzerindeki etkisi en aza indirilmelidir. Sıçan test odasına yerleştirilecek ve daha sonra dış ortamdan kaynaklanan tahrişi azaltmak için test odasını plastik bir torba ile (havalandırma için sırt tarafında 1cm x 1cm delik ile) kapatılmalıdır.
Bu deneyin sınırlaması, sıçan akupunktur sırasında sallanırsa iğnenin düşebileceğidir. Bu nedenle, derinliği ayarlamak için ihlas her 5 dakikada bir manipüle edilmelidir. Ek olarak, yüksek platform sıçanlar için uygundur, ancak fareler gibi daha küçük hayvanlar için uygun değildir.
Özetle, akupunktur sırasında kısıtlama olmadan sıçanları sabitlemek için yüksek bir platformun üretimi için ayrıntılı bir yöntem açıklaması sunuyoruz. Yüksek platform, sıçanın sırtındaki keskin noktaları tamamen açığa çıkarabilir. Astım tedavisi olarak yüksek platform ve noninvaziv solunum fonksiyon ölçümlerinin kullanılması akupunkturun analizini kolaylaştırabilir. Sırtta akupunkturun terapötik mekanizmasının incelenmesi astım ve kronik obstrüktif akciğer hastalığı gibi solunum yolu hastalıklarına yeni tedaviler getirebilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.
Acknowledgments
Bu çalışma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No. 81922076, 81973951, 81873373), Şanghay'ın işbirliğine dayalı inovasyon projesi (Hayır. ZYJKFW201811010, ZYJKFW201701005).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.3 mm x 13.0 mm acupuncture needle | China Suzhou Medical Device Factory | ||
| Al(OH)3 | American Thermo | 77161 | |
| Compression nebulizer | Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd. | NB-212C | |
| Fine Pointe V2.0 | American Buxco | ||
| Laboratory gas drying unit | American Drierite | 26800 | |
| Methacholine | American Sigma | MKCF6054 | |
| Ovalbumin | American Sigma | A5503-25G | |
| Phosphate Buffer solution (1x) | Gelifesciences | SH30256.01 | |
| Seal box | IRIS Corporation of Japan | ||
| Whole-body plethysmography respiratory function measurement system | American Buxco |
References
- Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K.
- Global Initiative for Asthma, 2019. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2019).
- Enilari, O., Sinha, S. The Global Impact of Asthma in Adult Populations. Annals of Global Health. 85 (1), (2019).
- Global Initiative for Asthma, 2020. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2020).
- Zhuang, Y., Xing, J. J., Li, J., Zeng, B. Y., Liang, F. R.
- Yang, Y. Q., et al. Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma. Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).
- Nurwati, I., et al. Reduction of interleukin-17 level by acupuncture at Feishu (BL13) is strengthened by acupuncture at Zusanli (ST36) in a mouse model of chronic asthma: An experimental study. Medical Acupuncture. 27 (4), 278-282 (2015).
- Nurwati, I., et al. Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma. Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).
- Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. Murine model of allergen induced asthma. Journal of Visualized Experiments. (63), e3771 (2012).
- Zhou, D. D., et al. Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation. Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785 (2020).
- Yin, L. M., et al. Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance. Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).
- Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. Understanding asthma using animal models. Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).
- Cui, K. M., et al. Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats. Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).
- Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase. Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).
- Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. Method of rat immobilization during experimental acupuncture. Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).
- Aguilar, R., et al. emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains. Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).
- Lai, X., et al. Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats. PloS One. 7 (9), 44216 (2012).
- Niu, C., et al. A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879 (2011).
- McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks. Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).
- Savov, J. D., et al. Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).
