चूहों में ट्रांसगर्भाशय भ्रूण श्वासनली ऑक्क्लुसेशन मॉडल
Summary
जन्मजात डायाफ्रामेटिक हर्निया और भ्रूण श्वासनली ऑक्लसियन के विभिन्न पशु मॉडल नैतिक मुद्दों, लागत, शल्य चिकित्सा कठिनाई, आकार, जीवित रहने की दर और आनुवंशिक उपकरणों की उपलब्धता के बारे में लाभ और नुकसान मौजूद हैं। यह मॉडल फेफड़ों के विकास पर दोनों श्वासनली ऑक्स्यूल और बढ़े हुए चमकदार दबाव के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए एक नया उपकरण प्रदान करता है।
Abstract
भ्रूण श्वासनली ऑक्स्यूलस (TO), एक स्थापित उपचार मोडलेंसी, गंभीर जन्मजात डायाफ्रामेटिक हर्निया (सीडीएच) में भ्रूण फेफड़ों के विकास और अस्तित्व को बढ़ावा देता है। इसके बाद, स्रावित एपिथेलियल तरल पदार्थ को बनाए रखने से चमकदार दबाव बढ़ता है और फेफड़ों के विकास को प्रेरित करता है। सीडीएच और टू के पैथोफिजियोलॉजी को समझने के लिए विभिन्न पशु मॉडलों को परिभाषित किया गया है। सभी के अपने फायदे और नुकसान हैं जैसे तकनीक की कठिनाई, जानवर का आकार, लागत, उच्च मृत्यु दर, और आनुवंशिक उपकरणों की उपलब्धता। इसके साथ ही, मुरीन भ्रूण के एक उपन्यास ट्रांसगर्भाशय मॉडल का वर्णन किया गया है। गर्भवती चूहों को एनेस्थेटाइज्ड किया गया था, और गर्भाशय एक मिडलाइन लेप्रोटॉमी के माध्यम से उजागर हुआ था। चयनित भ्रूणों के श्वासनली को श्वासनली के पीछे रखे एक ट्रांसगर्भाशयी सीवन, एक कैरोटिड धमनी और एक जुगुलर नस के साथ लिगा किया गया था। बांध को बंद कर उसे ठीक करने की अनुमति दे दी गई। भ्रूण को परिध से ठीक पहले एकत्र किया गया था। भ्रूण में फेफड़ों से शरीर के वजन अनुपात नियंत्रण भ्रूण में है कि अधिक से अधिक था । यह मॉडल शोधकर्ताओं को फेफड़ों के विकास पर दोनों के प्रभाव और बढ़े हुए चमकदार दबाव का अध्ययन करने के लिए एक नया उपकरण प्रदान करता है।
Introduction
जन्मजात डायाफ्रामेटिक हर्निया (सीडीएच) 1:2500 गर्भधारण में होता है और इसके परिणामस्वरूप फेफड़े के हाइपोप्लासिया और नवजात फेफड़े के उच्च रक्तचाप1,2,3, 4,5,6होते हैं । भ्रूण श्वासनली ऑक्सीकरण (TO) गंभीर सीडीएच रोगियों में एक स्थापित प्रसव पूर्व चिकित्सा है जिसमें 26-30 वें गर्भावधि सप्ताह में फेटोस्कोपी शामिल है जिसमें एक गुब्बारा कैरिना के ठीक ऊपर रखाजाता है और फिर 32 वें गर्भावधि सप्ताह में हटा दियाजाता है। यह भ्रूण फेफड़ों के विकास को प्रेरित करता है और अस्तित्व में सुधार करता है। जन्मजात हाई एयरवे रुकावट सिंड्रोम फेफड़ों के हाइपरप्लासिया से जुड़ी एक घातक स्थिति है, जिसने सर्जनों को स्रावित एपिथेलियल तरल पदार्थ की अवधारण को बढ़ावा देने के लिए श्वासनली के कृत्रिम ऑक्स्यूलसेशन को करने के लिए प्रेरित किया। इस ऑक्लूज़न ने ल्यूमिनल प्रेशर बढ़ाया और फेफड़ों की वृद्धिकोप्रेरित किया । हालांकि, एपिथेलियल सेल परिपक्वता को सक्षम करने के लिए ऑक्सक्लूजन को उलट दिया जाना चाहिए।
सीडीएच और टू – ओवाइन, खरगोश, चूहा और माउस के विभिन्न पशु मॉडल – सीडीएच और टू के रोगविज्ञान को समझने के लिए विकसित किए गए हैं। सभी के अपने फायदे और नुकसान हैं जैसे तकनीक की कठिनाई, जानवर का आकार, लागत, उच्च मृत्यु दर, और आनुवंशिक उपकरणों की उपलब्धता। हालांकि शल्य चिकित्सा तकनीक ovine मॉडल के लिए इस्तेमाल किया बहुत है कि मनुष्यों में इस्तेमाल किया और उलट जा सकता है के समान है, इस मॉडल की प्रमुख कमियां जानवर की कीमत, लंबी गर्भावधि, और सर्जरी की सीमित संख्या संभव हैं । खरगोश मॉडल में एक छोटा गर्भावधि अवधि है और भेड़ मॉडल की तुलना में कम महंगा है। हालांकि, खरगोश मॉडल अपरिवर्तनीय8,9है । मुरीन मॉडल में सबसे कम लागत है, गर्भावस्था के प्रति भ्रूण की सबसे अधिक संख्या, सबसे अच्छी विशेषता वाले जीनोम, और सेलुलर और आणविक विश्लेषण के लिए व्यापक रूप से उपलब्ध उपकरण हैं। हालांकि, एक प्रमुख खामी करने के लिए की प्रतिवर्तीता की कमी है, करने के प्रभाव की पूरी समझ को रोकने । इसके साथ, एक विधि प्रस्तुत की जाती है जो पहले उल्लिखित मॉडल के सभी फायदों को जोड़ती है और मॉडल के लिए एक आसान, संभावित रूप से रिवर्सिबल और न्यूनतम आक्रामक कृंतक बनाती है।
Protocol
Representative Results
Discussion
यह विधि चूहों में भ्रूण श्वासनली ऑक्सक्यूशन की एक शल्य प्रक्रिया और फेफड़ों के विकास पर इसके प्रभाव का वर्णन करती है। प्रोटोकॉल में कुछ महत्वपूर्ण कदम हैं जिन्हें सफल करने के लिए सावधानीपूर्वक किया ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस शोध को सार्वजनिक, वाणिज्यिक, या गैर-लाभकारी क्षेत्रों में वित्तपोषण एजेंसियों से कोई विशिष्ट अनुदान प्राप्त नहीं हुआ । सभी लेखकों ने अध्ययन, अधिग्रहण, विश्लेषण और डेटा की व्याख्या, लेख का मसौदा तैयार करने और इसे महत्वपूर्ण बौद्धिक सामग्री और संस्करण के अंतिम अनुमोदन के लिए प्रस्तुत करने के लिए संशोधित करने के लिए अवधारणा और डिजाइन में पर्याप्त योगदान दिया है। लेखकों का शुक्रिया अदा कर सकते है शल्य चिकित्सा तकनीक की कलाकृति के उत्पादन पर अपनी तरह के प्रयासों के लिए Sabuncuoğlu ।
Materials
| Buprenorphine | Par Pharmaceutical | NDC 42023-179-05 | For regional anesthesia |
| Isoflurane | Halocarbon Life Sciences | NDC 66794-017-25 | For general anesthesia |
| Magnification glasses | USA Medical-Surgical | SLR-250LBLK | At least 2.5x |
| Nikon 90i microscope | Nikon | 3417 | Motorized Fluorescence |
| Nucleospin Tissue Kit | Macherey-Nagel, Düren, Germany | 740952.5 | DNA isolation |
| Pierce BCA Protein Assay Kit | Thermo Fisher, IL, USA | 23225 | Protein quantification |
| Polyglactin suture | Ethicon | VCP451H | 4-0, 24 mm, cutting |
| Polylysine slides | VWR | 48382-117 | Microscope adhesion slides |
| Polypropylene suture | Ethicon | Y432H | 6-0, 13 mm 1/2c Taperpoint |
| RIPA buffer | Sigma-Aldrich, Missouri, USA | R0278-50ml | Protein isolation |
| Silk suture | Ethicon | VCP682G | 4-0, 24 mm, cutting |
| Trizol | Invitrogen | 15596026 | RNA isolation |
References
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