新生児早産ウサギにおける経皮的気管内薬物送達の簡素化

サマリー

経皮的気管内注射は、自発呼吸中に効果的な肺内薬物送達を可能にします。単回注射と複数回注射は忍容性が高く、生存率に影響を与えません。この技術は簡単に実行でき、新生ウサギの肺の発達と肺損傷の予防に対する物質の影響を調べることができます。

要約

気管内(IT)薬物送達は、医薬品を肺に直接送達することを可能にし、潜在的な肺の利点を最大化し、全身の薬物曝露を最小限に抑えます。経皮的技術は簡単で、出生直後に早産のウサギの肺に物質をITで送達することができます。新生児の子犬は、首を伸ばして仰臥位に置かれる前に、吸入されたイソフルランで麻酔されます。喉頭は、26 ゲージ (G) カテーテルを気管に経皮的に留置する前に、特定され、安定化されます。気管のカテーテル挿入後、ハミルトンシリンジに取り付けられた30Gの鈍い針がITカテーテルに導入され、自発呼吸中に気管に正確な量を送達するために使用されます。IT注射が完了したら、針とカテーテルを抜いて、子犬を麻酔から回復させます。経皮的IT注射は、注入された物質の大部分を肺に送達し、介入後3時間で大多数が肺に残ります。注射は出生日から忍容性が高く、生存に影響を与えることなく、数日間連続して繰り返すことができます。この技術は、早産ウサギの肺の発達や新生児の肺損傷の予防に対する医薬品の影響を調査するために使用できます。

概要

早産後の慢性新生児肺疾患(CNLD)は、かなりの数の乳児に発生し続けています¹。現代の新生児ケアの改善により、生存率が大幅に向上し、早産後の重大な合併症の大部分が減少しました。神経学的、胃腸内、眼科的な合併症は減少していますが、呼吸器系の合併症は過去20年間でほとんど変化せず、妊娠28週未満で生まれた乳児のほぼ2人に1人が肺疾患を発症しています。

未熟児、炎症、酸化的損傷、および人工呼吸器関連の損傷はすべて、CNLDの病態生理学と早産後の呼吸器転帰不良に関与しています^2,3,4。現代の新生児医療の大幅な進歩にもかかわらず、CNLDの発症を治療または予防するための効果的な治療法は限られています^5,6。

CNLDを予防および治療するための治療法を開発するには、新しいアプローチと介入が必要です。肺内薬物送達は、薬物を肺に送達するための魅力的な介入であり、新生児の呼吸器疾患の経過を変える可能性があります。肺内薬物療....

プロトコル

ITインジェクションを含むすべての実験については、ルーヴェン・カトリック大学の動物倫理委員会に許可を求め、ルーヴェン・カトリック大学の動物福祉とケアに関するすべてのガイドラインが遵守されました。

1. 事前準備

1. ITインジェクションを完了するために必要なすべての材料を収集します(表1)。
2. 麻酔チャンバーの排気が開いており、研究者がイソフルランにさらされるのを防ぐためにスカベンジャーに接続されていることを確認してください。

2.子犬の出産

注:ウサギの子犬(ニュージーランドの白とフランドルの巨大雑種)は、私たちのグループ¹⁷によって以前に説明されたように、肺の発達の嚢状段階で妊娠28日目(学期31日)に子宮切開術によって分娩されました。子犬は、早産後の肺の発達を研究するために正常酸素症に配置するか、急性肺損傷を研究するために高酸素症のいずれかに配置することができます。

1. 1 mL ケタミン (100 mg/mL) と 1 mL キシラジン (2%) の筋肉内注射を 2 mL シリンジと 26 G 針で大腿四頭筋に送達した鎮静ダム。深く鎮静した....

結果

1 回および 1 回および 1 回の経皮的 IT 注射の手法の代表的な結果が発表されており、生存率は IT 注射 (1 回または複数回の注射) の影響を受けず、プラセボ (生理食塩水) による IT 注射は対照と比較して肺機能または肺構造を変化させなかったことを示しています¹⁸。

さらに、放射性トレーサー (2-デオキシ-2-[18F]フルオロ-D-グルコース (FDG)) と陽電子放出断層撮影/コンピューター断層撮影 (PET-CT) スキャンを使用して、通常の生理食塩水と界面活性剤の肺送達を調査した一連の実験でこの技術を検証しました 2 つの時点 (注射後 10 分と 150 分) で、経皮的 IT 注射を使用して注射された物質の分布と肺送達を定量化しました¹⁸.この論文に記載されている経皮的IT注射は、注入されたトレーサー全体の大部分(>82%)を肺に送達しました。さらに、トレーサーの大部分は、妊娠28日目の分娩後1日目と分娩後7日目の両方で、分娩後3時間後に肺に留まった(<.......

ディスカッション

ITインジェクションを正常に実行するには、いくつかの重要な手順に従う必要があります。経皮的IT注射法は、正しく実施されれば、早産ウサギにおける効果的かつ信頼性の高い肺内薬物送達を可能にします。新生児の子犬は低体温になりやすく、生存に悪影響を与える可能性があるため、温度制御は重要です。子犬を誘導チャンバーに入れる前に、常温状態を維持するために温度制御を確保する必要があります。誘導チャンバーの下に配置された加熱マットにより、子犬は暖かく保たれます。子犬が誘導チャンバーに配置されるかなり前に、加熱パッドがオンになって、チャンバーがゆっくりと加熱されるようにしました。誘導室で使用されるパースペックスの導電率が低いため、高温加熱ランプは、チャンバーの内部が必要な温度(36°C)に達する前に誘導室の壁を溶かす可能性があるため、避ける必要があります。

動物の拘束と痛みのない注射を可能にするには、適切な麻酔が必要です。過度に深い麻酔や低換気、無呼吸を避けることが重要です。動物が鎮静剤を投与された後、IT注射のための適切な麻酔レベル.......

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
麻酔
麻酔中の			1
酸素供給			1
イソフルラン (Iso-Vet; 1000 mg/g)	Dechra Veterinary Products NV、ベルギー		2% 2リットル/分
排気とスカベンジャー付きプレキシガラス誘導チャンバー	自社製		1
<ストロング>インジェクション
マウントステージ	自社製(柔軟なポジショニング		麻酔
回路			1
スカベンジャーシステム
足を拘束するためのテープ	つ 任意		1ロール
<ストロング>ストロング気管内注射
アリス組織鉗子			1
19mm長26ゲージカテーテル	BDバイオサイエンス	391349	1
ミルトンシリンジ(10µl 20 mm 鈍い 30 ゲージ針付き	ハミルトン カンパニー	7638-01	1
プロトコル生理
			l 動物
あたり動物飼育
湿度および温度制御インキュベーター	Okolab Srl. カスタムメイドのケージインキュベーター。あるいは、自社製のケージインキュベーターを使用することもできます

冷却を防ぐための加熱マット 付きイソフルラン気化器 を可能にする発泡スチロール製 に接続されたノーズコーン 手1本ハ食塩水 (0.9% NaCl) 5 & マイクロに従って選択の医薬品;