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Article de méthode

Hémorragie pontine massive par double injection de sang autologue

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DOI :

10.3791/62089

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29 mai 2021

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* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Nous présentons un protocole pour établir un modèle massif d’hémorragie de pontine chez un rat par l’intermédiaire de la double injection du sang autologous.

Résumé

Nous fournissons un protocole pour établir un modèle massif d’hémorragie pontine chez un rat. Des rats pesant environ 250 grammes ont été utilisés dans cette étude. Cent microlitres de sang autologous ont été pris de la veine de queue et stereotaxically injectés dans le pont. Le processus d’injection a été divisé en 2 étapes: Premièrement, 10 μL de sang ont été injectés dans un endroit spécifique, en position antéropostérieure (AP) -9,0 mm; latéral (Lat) 0 mm; vertical (Vert) -9,2 mm, suivi d’une deuxième injection du sang résiduel situé à AP -9,0 mm; Lat 0 mm; Vert -9,0 mm avec un intervalle de 20 minutes. L’essai de faisceau d’équilibre, l’essai de placement de membre, et le neuroscore modifié de Voestch ont été utilisés pour évaluer la fonction neurologique. La formation image de résonance magnétique (MRI) a été employée pour évaluer le volume de l’hémorragie in vivo. Les symptômes de ce modèle étaient en ligne avec des patients présentant l’hémorragie massive de pontine.

Introduction

L’hémorragie intracérébrale représente un cinquième des patients ayant subi un AVC. Le pronostic de l’hémorragie intracérébrale dépend de la vitesse, du volume et de l’emplacement du saignement1,2. Par rapport à l’hémorragie du cerveau avant, l’hémorragie du tronc cérébral a une mortalité et une morbidité plus élevées3. Environ 40% de l’hémorragie du tronc cérébral se produit dans le pont4. L’étiologie et la physiopathologie de l’hémorragie pontine sont assez différentes et moins étudiées que l’hémorragie du cerveau avant5.

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Protocole

Le protocole a été examiné et approuvé par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux du deuxième hôpital affilié de l’Université médicale de Guangzhou. Des rats ont été fournis par le centre animal de l’université médicale du Sud. Le plan expérimental est illustré à la figure 1.

1. Animal et instruments

  1. Utilisez des rats Sprague-Dawley mâles âgés de 8 semaines pesant 250 ± 10 g.
  2. Loger les rats pendant au moins 7 jours avant la chirurgie dans des conditions environnementales contrôlées avec une température ambiante de 25 °C, une humidité relative de 65 % et un cycle lumiè....

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Résultats

Au total, 25 animaux ont été utilisés, 3 pour des injections de sang de contrôle, 6 pour 30 μL, 6 pour 60 μL et 10 pour des injections sanguines de 100 μL. Un rat qui a reçu une injection de sang autologue de 100 μL (1/10) est décédé dans les 24 heures suivant la chirurgie.

Des tests comportementaux ont été effectués le jour 1, le jour 3, le jour 7 et le jour 14 après chirurgie. Les scores pour le groupe témoin et les groupes d’.......

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Discussion

Dans la présente étude, nous avons fourni un protocole pour générer un modèle massif de rat d’hémorragie de pontine. Ce modèle peut être utilisé pour la recherche sur le mécanisme physiopathologique et le pronostic de l’hémorragie pontine massive.

Tout au long de l’expérience, 25 rats ont été utilisés, dont un seul est mort. La vérification de MRI, d’anatomie brute, et de la souillure IL a indiqué que cette méthode a eu un taux de mortalité très bas et un taux de réussite élevé. Pour établir l.......

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Déclarations de divulgation

Pas de conflits d’intérêts.

Remerciements

Cette étude a été soutenue financièrement par la National Science Foundation of China (81471181 et 81870933) et le programme d’ouverture de l’Université médicale de Guangzhou (0506308) à Y Jiang, et par la National Science Foundation of China (81701471) et le programme scientifique de la Commission municipale de la santé de Guangzhou (20191A011083) à Z Qiu, et par la National Science Foundation of China (81501009) à L Wu.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
100ml Solution salineGuangdong yixiang191222201 C1Préparation du diluant à l’héparine
100&mu ; l Micro-injecteurShanghai GaogeInjection de sang autologue
1ml SeringueJiangsu Zhiyu20191014Retirer le sang autologue de la veine de la queue
75 % AlcoolShandong LierkangDésinfection de la queue de rat
Ruban adhésifShanghai JinzhongSurgicl instruments
d’anesthésie animaleRWDR510-31S-6Induction et maintien de l’anesthésie
Poutre d’équilibreJiangsu SaiangsiPour les scores de déficit neurologique
Lames ShanghaiFeiying74-CPour l’anatomie macroscopique
Ciment osseuxShanghai Xinshiji20180306Instruments surgicliques
Réservoir cérébralShenzhen LEIYEA Pour l’anatomiemacroscopique
Butorphanol tartrateJiangsu HengruiPour la gestion de la douleur
Foret crânien électriqueNanjing  ; Darwin biotechnologie20180090018Faire un trou de bavure sur le crâne
Tube EPNantong SuruiTransfert de sang autologue
Crème pour les yeux à l’érythromycinePharmacieProtection des yeux
Liqueur de colorant HESolarbioG1120Pour la coloration
HE Chauffage  ; padDangerous JungleJR01Rester au chaud
Injection d’héparine sodiqueChengdu Haitong Pharmacal Company190701Préparation du diluant à l’héparine
IndoPhorsGuoyao de ChineStérilisation
IsofluraneRWD20080701Induction et maintien de l’anesthésie
Boîte sombre claireJiangsu SaiangsiPour scores de déficit neurologique
Pompe à micro-injectionBaoding LeifuTFD03-01-CInjection d’un système d’IRM de sang autologue
PhilipsConfirmation de l’infarctus in vivo
Porte-aiguilleShanghai Jinzhong J32020Instruments surgicl
PénicillineGuoyao de ChinePrévention des infections
Q-tipsJiangxi SongheInstruments surgicl
Scalp heedleJiangxi Hongda20200313Retirer le sang autologue de la veine de la queue
ScalpelShanghai Kaiyuan170902Instruments surgicl
Ciseaux de cisaillementShanghai JinzhongY00040Instruments surgicl
Appareil stéréotaxiqueRWD900-00001-00pour chirurgie positionnement
Serviette chirurgicaleXinxiang Huakangweicai20070601Instruments surgicl
Aiguille de sutureShanghai JinzhongInstruments surgicl
Ciseaux de sutureShanghai Jinzhong J25041Instruments surgicls
Forcepts de maintien des tissusShanghai Jinzhong J31080Instruments surgicl
Système du Yunnan

Références

  1. Charidimou, A., et al. Brain hemorrhage recurrence, small vessel disease type, and cerebral microbleeds: A meta-analysis. Neurology. 89 (8), 820-829 (2017).
  2. Tao, C., et al.

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Réimpressions et autorisations

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