Summary

스레드 색전증 방법을 통해 우수한 처상 부비동 폐색의 쥐 모델 설립

Published: July 04, 2021
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Summary

여기서, 우리는 나사 색전 방법을 통해 우수한 처상 부비동 (SSS) 혈전증의 새로운 Sprague-Dawley (SD) 쥐 모델을 확립하고, 모델의 안정성과 신뢰성을 검증하였다.

Abstract

대뇌 정맥 부비동 혈전증 (CVST)의 자연적인 개시에 기여하는 기계장치는 주로 알려지지 않으며, 각종 통제할 수 없는 요인은 임상 연구에 있는 중대한 한계귀착되, 질병의 과정에 관련됩니다. 따라서, 통제 할 수없는 혼란 요인의 다양한 표준화 할 수있는 안정적인 CVST 동물 모델의 설립은 임상 연구에서 단점을 회피하는 데 도움이되었습니다. 최근 수십 년 동안 다양한 CVST 동물 모델이 제작되었지만 이러한 모델을 기반으로 한 결과는 일관되지 않고 불완전했습니다. 따라서 CVST의 병리학적 메커니즘을 더 탐구하기 위해서는 CVST의 진단 및 치료에 중요한 실질적인 가치와 과학적 중요성을 갖는 새로운 호환되는 동물 모델을 수립할 필요가 있습니다. 본 연구에서는, 우수한 처상 부비동(SSS) 혈전증의 새로운 스프라그-Dawley(SD) 쥐 모델이 나사 색전화 방법을 통해 확립되었으며, 모델의 안정성과 신뢰성을 검증하였다. 추가적으로, 우리는 CVST의 형성 후에 쥐에 있는 뇌 정맥 혈류에 있는 변경을 평가했습니다. 총체적으로, SD-rat SSS-혈전증 모델은 쉽게 확립되고, 외상을 최소화하며, 좋은 안정성을 산출하며, 허혈성 타이밍과 위치를 정확하게 제어할 수 있는 새로운 CVST 동물 모델을 나타냅니다.

Introduction

대뇌 정맥 부비동 혈전증(CVST)은 뇌졸중의 모든 원인의 0.5-1.0%만을 차지하지만 어린이와 젊은 성인1에서상대적으로 높은 발생률을 가지는 대뇌 정맥 시스템의 희귀 질환이다. 부검 중 CVST는 뇌혈관 질환 사망 의 10%의 원인으로밝혀졌다 2. 혈전증은 두개 내 정맥 시스템의 어느 부분에서나 발생할 수 있습니다. 우수한 처상 부비동 (SSS)은 CVST에서 가장 일반적으로 영향을받는 지역 중 하나이며 여러 혈관을 포함 할 수 있습니다. 정맥 부비동의 협착 또는 폐색으로 인해 두개 내 정맥 복귀가 차단되어 종종 두개 내 압력3을증가시킵니다. CVST의 임상 표현은 복잡하고 시간이 지남에 따라 다릅니다. 증상의 특이성이 부족하지만 가장 흔한 증상으로는 두통(77.2%), 발작(42.7%), 신경결핍(39.9%)이 가장 많다. 심한 경우에는 혼수 상태에, 심지어 사망까지4,5가발생할 수 있습니다. 최근 몇 년 동안 의료 및 건강 기준및 공중 보건 의식의 전반적인 개선으로 인해 관련 위험 요소의 비율이 변경되고 외상 및 감염의 비율이 감소했으며 임신, 푸에페리움, 경구 피임약 및 기타 이유로 인한 CVST의 비율이 점차증가하여 5.

현재 CVST의 발병은 아직 잘 이해되지 않습니다. 깊이 있는 CVST를 탐구하기 위하여는, 추가 병학 연구가 필요합니다. 그러나, 이러한 연구 방법의 대부분은 침략 적이 고 임상적으로 구현 하기 어려운. 임상 연구의 많은 한계로 인해 동물 모델은 기본 및 번역 연구 측면에서 대체할 수없는 장점이 있습니다.

CVST의 원인은 초기 발병이 종종 인식되지 않고 혈전 형성의 위치가 매우 가변하기 때문에 복잡합니다. 다행히도 동물 모델은 이러한 요인을 더 잘 제어 할 수 있습니다. 지난 수십 년 동안 다양한 CVST 동물 모델이 설립되었으며 각 모델에는 고유한 단점이 있습니다. 다른 생산 방법에 따르면, 그들은 대략 다음과 같은 범주로 나눌 수 있습니다 : 간단한 SSS-리그레이션 모델6,7; SSS 내부 사출 가속기 모델8; 페리-염화물 유도 SSS 혈전증 모델9; 광화학 유발 SSS 혈전증모델(10); 및 자수색전성-폐색S모델(11) 그러나, 이 모형의 대부분은 동물의 대뇌 피질에 침략적인 손상을 회피할 수 없습니다 정확하게 허혈성 시간 및 위치를 통제할 수 없습니다. 일부 모델에서는, 혈전은 자발적으로 재canalize 것입니다; 다른 모델에서는 SSS가 영구적으로 가려집니다. 또한 복잡한 수술 및/또는 심각한 부상은 이러한 모델의 후속 병리학 적 발견에 영향을 미칠 수 있습니다.

본 연구에서는 스프라그-Dawley(SD) 쥐의 SSS에 스레드 플러그를 삽입하여 손상을 최소화하고 정밀한 제어기능을 가능하게 하며 안정성이 좋은 CVST 모델을 성공적으로 확립했습니다. 또한, 작은 동물 자기 공명 영상 (MRI) 및 레이저 반점 혈류 이미징모델의 효과를 확인하기 위해 결합되었다. 우리는 우리의 모형의 설치 전후에 대뇌 혈류량에 있는 변경을 평가하고, CVST의 발생, 발달 및 관련 병리생리학 기계장치를 탐구하는 추가 연구 결과를 위한 기초를 마련하는 우리의 모형의 안정성을 평가했습니다.

Protocol

동물 과목과 관련된 절차는 원저우 의과 대학의 의료 규범 및 윤리위원회에 의해 승인되었으며 실험실 동물의 사용 및 치료에 대한 중국 법률에 따라. 1. 스레드 플러그, SD 쥐 및 실험 장비의 준비 직경 0.28mm의 나일론 실을 스레드 플러그의 본체로 사용합니다.참고: 나일론 실의 부드러움과 경도는 적당해야 합니다. 나일론 실의 한쪽 끝을 실리콘 소재로 덮습…

Representative Results

봉합방법을 통해 SD-랫트 SSS-혈전증 모델을 확립하려면 봉합사(도1A)를사전에 제조해야 하며, 실험에 필요한장비(도 1B)를준비해야 한다. 수술의 섬세한 특성으로 인해 모델의 준비는 해부 현미경으로 완료되어야합니다. 주요 단계는 그림 2에표시됩니다. 모델의 혈류 관찰의 특정 세부 사항에 대한 설명을 용이하게 하기 위해 <strong…

Discussion

이 연구에서는 SD 쥐의 SSS에 자체 수제 스레드 플러그를 삽입하여 새로운 유형의 CVST 모델을 성공적으로 확립했습니다. 또한, 레이저 반점 혈류 영상과 작은 동물 MRI는 허혈성 타이밍과 위치를 표준화하기 위해 색전 전후에 SD 쥐의 뇌 표면에 혈류의 변화를 모니터링하기 위해 결합되었다.

1989년, Longa 외.는쥐(12)의외부 경동맥에 자체 만든 나일론 봉합사를 역?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 연구는 높은 수준의 특성에 대한 과학 연구 재단에 의해 지원되었다, 전통 중국 의학푸젠 대학 (X2019002 재능).

Materials

2 mL syringe Becton,Dickinson and Company 301940
brain stereotaxic instrument Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd 68025
dissecting microscope Wuhan SIM Opto-technology Co. SIM BFI-HR PRO
high-speed skull drill Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd 78046
laser-speckle blood-flow imaging system Wuhan SIM Opto-technology Co. SIM BFI-HR PRO
needle holder Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F31022-12
needle thread Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F33303-08
scissors Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd S13029-14
silica gel Heraeus Kulzer 302785
small animal anesthesia machine Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd R540
small-animal MRI Bruker Medical GmbH Biospec 94/30 USR
tweezers Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F11029-11
vascular forceps Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F22003-09

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Jiang, W., Jin, C., Xu, W., Li, Y., Lin, Y., Liang, S., Wang, W. Establishment of a Rat Model of Superior Sagittal-Sinus Occlusion via a Thread-Embolism Method. J. Vis. Exp. (173), e62118, doi:10.3791/62118 (2021).

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