디메틸디옥타데실암모늄 브로마이드 껍질로 개발된 데카플루오로펜탄 미세방울은 탁월한 콜로이드 안정성과 활성성 생체 계면을 나타냈습니다. DDAB-MD는 인간 삼중음성 유방암(MDA-MB-231) 3D 모델에 대한 독소루비신의 향상된 흡수 및 항종양 활성과 함께 원형질막에 대한 높은 친화력을 특징으로 하는 효율적인 약물 저장소임이 입증되었습니다.
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디메틸디옥타데실암모늄 브로마이드 껍질로 개발된 데카플루오로펜탄 미세방울은 탁월한 콜로이드 안정성과 활성성 생체 계면을 나타냈습니다. DDAB-MD는 인간 삼중음성 유방암(MDA-MB-231) 3D 모델에 대한 독소루비신의 향상된 흡수 및 항종양 활성과 함께 원형질막에 대한 높은 친화력을 특징으로 하는 효율적인 약물 저장소임이 입증되었습니다.
방대한 테라노스틱 시나리오에서 상변화 과플루오로카본 미세방울(MD)의 현저한 개선은 합성 효율, 안정성 및 약물 전달 능력과 관련하여 MD 조성의 최적화를 통해 이루어집니다. 이를 위해 디메틸디옥타데실암모늄 브로마이드(DDAB) 양이온성 계면활성제 쉘로 안정화된 데카플루오로펜탄(DFP) MD를 설계했습니다. 펄스 고출력 절연에 의해 몇 초 내에 고농도의 DDAB-MD를 쉽게 얻을 수 있어 1μm 크기의 낮은 다분산 방울이 생성되었습니다. DDAB 쉘의 긴 포화 탄화수소 사슬과 함께 매우 긍정적인 ζ-전위는 액적과 그 안의 약물 화물을 안정화하는 핵심 요소입니다. DDAB 쉘과 세포 원형질막의 높은 친화력은 종양 세포 계면에서 약물 농도를 증가시키고 흡수를 촉진하여 국소 화학요법제 전달을 가능하게 합니다. 이를 통해 DDAB-MD는 매우 낮은 약물 투여량에서 높은 항종양 활성을 나타내는 관련 약물 전달 도구로 바뀔 수 있습니다.
이 연구에서 이러한 접근법의 효능은 포유류 종양 세포의 3D 스페로이드인 MDA-MB-231에 대한 독소루비신의 효과를 획기적으로 향상시키는 것으로 나타났습니다. 다세포 종양 스페로이드(즉, 구형 형태로 빽빽하게 밀집된 세포) 형태로 개발된 3차원(3D) 세포 배양액을 사용하면 2D 세포 배양에 비해 많은 이점이 있습니다: 기존의 체외 연구와 동물 실험 사이의 격차를 해소할 수 있는 잠재력이 있을 뿐만 아니라 보다 예측 가능한 체외 검사를 수행할 수 있는 능력을 향상시킬 것입니다 전임상 약물 개발을 위한 스크리닝 분석 또는 오프라벨 약물 및 새로운 공동 표적화 전략의 잠재력을 평가합니다.
높은 항종양 효능을 보장하고 부작용을 줄일 수 있는 약물 전달 벡터는 심각한 화학-약학적 과제로 남아 있는 동시에 주요 목표입니다 1,2. 현재까지 이들의 진전은 처음에는 불충분한 현장 약물 방출과 임계 수준의 비특이적 독성 3,4,5의 대조로 인해 제한적이었습니다. 최근 몇 년 동안 리포좀, 고분자 미셀, 폴리머솜 6,7,8,9,10을 포함한 항암제의 투여를 개선하기 위해 여러 약물 전달 시스템이 구현되었습니다. 이러한 시스템은 약물의 순환 시간과 선택성을 증가시키는 동시에 건강한 장기 및 조직의 분포 및 축적을 줄일 수 있는 잠재력을 보여줍니다. 어쨌든, ....
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참고: 모든 시약과 기기는 재료 표에 나열되어 있습니다.
1. 미세방울의 제작 및 특성화
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Dox@DDAB-MD는 그림 1에 개략적으로 설명된 대로 프로토콜(섹션 1)에 따라 개발되었습니다. 얻어진 MD는 DFP 코어를 캡슐화하는 DDAB의 단층으로 만들어집니다(그림 1A). DDAB의 양이온 전하 및 초음파 처리 절차는 DFP 및 물 계면23에 적층 된 DDAB 다층 층의 형성을 방지합니다.
CLSM 현미경 사진(그림 1B)은 1.5 x 1010 MDs/mL의 농도, 평균 직경이 약 1μm인 농축된 구형 액적의 생성을 보여줍니다. Dox의 적색 형광은 MD에서 약물 화물의 안정적인 캡슐화 및 감금을 나타냅니다. DLS 측정은 MD의 크기 분포가 0.1의 다분산 지수(PDI)± 평균값 1.1 0.1 μm로 좁다는 것을 .......
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항종양제로서 안트라사이클린의 효능을 향상시키기 위해 본 연구에서는 화학요법제인 독소루비신(Dox)을 캡슐화한 DDAB 껍질 PFC 방울의 형성 및 이러한 제형이 공격적인 삼중음성 유방암 세포인 MDA-MB-231과 상호 작용하는 효과를 제시합니다.
DOX@DDAB-MD 구축
Dox 로드 MD는 매우 빠르고, 재현성이 뛰어나며, 사용자 친화적이고, 효율적인 프로토콜을 사용하여 insonation 방법에 의해 공식화되었습니다. 이 방법을 사용하면 약 1μm를 중심으로 하는 매우 좁은 크기 분포를 가진 MD를 얻을 수 있고 상당한 양의 약물을 캡슐화할 수 있습니다. 프로토콜의 다음 단계는 특별한 주의가 필요합니다: a) 1.1.3단계: MD의 약물 로딩 및 보관을 최대화합니다. Dox 알코올 용액은 물 상태에서 상당한 양의 Dox가 분할되는 것을 피하기 위해 .......
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이해 상충: 저자는 이해 상충이 없음을 선언합니다.
인간/동물의 권리: 이 논문에는 저자가 인간 또는 동물을 대상으로 수행한 연구가 포함되어 있지 않습니다.
이 작업은 보조금 계약 AMPHORA(766456)에 따라 European Union Horizon 2020 연구 및 혁신 프로그램에서 자금을 지원받았습니다.
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| &마이크로;-페트리 접시 | Ibidi | 81156 | 35mm 높이, IbiTreat |
| 1,1,1,2,3,4,4,5,5,5-Decafluoropentane | Sigma-Aldrich | 138495-42-8 | b.p. 55° C |
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| 15 ml 원심분리기 튜브 | Falcon | 89039-664 | |
| 3D-페트리 접시 12:256 | 마이크로 티슈 (Sigma-Aldrich) | Z764000-6EA | 소형 |
| 3D-페트리 접시 12:81 | 마이크로 티슈 (Sigma-Aldrich) | Z764019-6EA | 대형 |
| 5%CO2 배양 인큐베이터, 37° C | Thermo Scienific | HERAcell 150i | |
| 50ml 원심분리기 튜브 | Falcon | 352070 | |
| 생물 안전 캐비닛, II 레벨 | |||
| Calcein | Sigma-Aldrich | ||
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| 원심분리기 Hettich Universal 320R | Hettich Lab. 기술 | ||
| DAPI | SIGMA-Aldrich | ||
| Dimethyldioctadecylammonium bromide powder | Sigma-Aldrich | 3700-67-2 | |
| DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) | Corning | 15-013-CV | |
| Doxorubicin hydrochloride | Sigma-Aldrich | 25316-40-9 | |
| DPBS (Dulbecco의 변형 된 PBS) | 코닝 | 21-030-CV | pH 7,4 |
| 에탄올 70 % | 시그마 - 알드리치 | ||
| EZ-C1 디지털 ecliplse | 니콘 악기 | 실버 버전 3.91 | |
| 소 태아 혈청 (FBS) | 코닝 | 35-079-CV | |
| 고니오미터 BI-200SM | Brookhaven Instruments Corporations | ||
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| 레이저 He-Ne | Melles-Griot | ||
| L-글루타민 | Corning | 25-005-CI | |
| Mcroscope Nikon Eclipse Ti | Nikon Instruments | ||
| MDA-MB 231 세포주 | ATCC | ||
| Microsoft Excel | Microsoft | ||
| Microplates 리더 Spark | Tecan 그룹 | ||
| NanoZetaSizer ZS | Malvern Instruments Ltd | ||
| Neubauer 개선 챔버 | 718605 | ||
| NIS 요소 소프트웨어 | Nikon Instruments | AR 4.30 | |
| Pen/Strepto | Corning | 30-002-CI | |
| Photocorrelator BI-9000 AT | Brookhaven Instruments Corporations | 62927-1 | |
| 광도계 HC120 | Brookhaven Instruments Corporations | N° 1275 | |
| 피펫터 및 팁, 다양한 크기의 | Gilson | ||
| Propidium Iodide | SIGMA-Aldrich | ||
| 혈청학적 피펫, 다양한 크기의 | Corning | ||
| 고체 상태 레이저 | Suwtech 레이저 | N° 22368 | |
| T25 플라스크 | Sarstedt | 83.3910.002 | |
| T75 플라스크 | Sarstedt | 83.3911.002 | |
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