Small-Scale Plasma Membrane Preparation for the Analysis of <em>Candida albicans</em> Cdr1-mGFPHis

Golnoush Madani; Erwin Lamping; Hee Ji Lee; Masakazu Niimi; Alok K. Mitra; Richard D. Cannon

doi:10.3791/62592

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Preparação de membrana plasmática em pequena escala para a análise de cânbicas cânbicas cdr1-mGFPHis

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Small-Scale Plasma Membrane Preparation for the Analysis of Candida albicans Cdr1-mGFPHis

Preparação de membrana plasmática em pequena escala para a análise de cânbicas cânbicas cdr1-mGFPHis

DOI:

10.3791/62592-v

•

09:44 min

•

June 13, 2021

•

Golnoush Madani*¹, Erwin Lamping*¹, Hee Ji Lee, Masakazu Niimi², Alok K. Mitra, Richard D. Cannon

¹Sir John Walsh Research Institute, Faculty of Dentistry,University of Otago, ²Department of Microbiology, Faculty of Medicine,Chulalongkorn University, ³School of Biological Sciences,University of Auckland

Chapters

00:04Introduction
00:57Growing and Harvesting Yeast Cells
02:26Isolation of Plasma Membranes
04:14Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE)
06:22Results: Analysis of Cdr1-mGFPHis Isolated from Plasma Membranes of Saccharomyces cerevisiae
09:06Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este artigo apresenta um protocolo de isolamento de membrana plasmática de pequena escala para a caracterização da proteína Cdr1 (cassete de ligação ATP) da Candida ABC (fita adesão a ATP), superexpressa em Saccharomyces cerevisiae. Uma mGFPC terminal de protease com um linker de 16 resíduos entre o Cdr1 e a tag foi projetada para facilitar a purificação e o detergente-triagem do Cdr1.

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