In vivo Méthodes d’évaluation de la fonction et de la structure des cellules ganglionnaires rétiniennes et du nerf optique chez les grands animaux

Résumé

Nous démostosons ici plusieurs tests in vivo (potentiel évoqué visuel flash, électrorétinogramme de motif et tomographie par cohérence optique) chez le macaque caprin et rhésus pour comprendre la structure et la fonction du nerf optique et de ses neurones.

Résumé

Le nerf optique recueille les signaux axones des cellules ganglionnaires de la rétine et transmet le signal visuel au cerveau. Les grands modèles animaux de lésion du nerf optique sont essentiels pour traduire de nouvelles stratégies thérapeutiques des modèles de rongeurs à l’application clinique en raison de leurs similitudes plus étroites avec les humains en taille et en anatomie. Nous décrivons ici quelques méthodes in vivo pour évaluer la fonction et la structure des cellules ganglionnaires rétiniennes (CGR) et du nerf optique (ON) chez les grands animaux, y compris le potentiel évoqué visuel (VEP), l’électrorétinogramme de motif (PERG) et la tomographie par cohérence optique (OCT). Des primates caprins et non humains ont été utilisés dans cette étude. En présentant ces méthodes in vivo étape par étape, nous espérons augmenter la reproductibilité expérimentale entre différents laboratoires et faciliter l’utilisation de grands modèles animaux de neuropathies optiques.

Introduction

Le nerf optique (ON), qui est constitué d’axones des cellules ganglionnaires de la rétine (RGC), transmet le signal visuel de la rétine au cerveau. Les maladies onéreuses, comme le glaucome, la neuropathie optique traumatique ou ischémique, ont souvent causé une dégénérescence irréversible de l’ON/RGC et une perte visuelle dévastatrice. Bien qu’il existe actuellement de nombreuses percées dans la régénération des ON et la protection RGC dans les modèles de rongeurs1,2,3,4,5,6, les traitements cliniques pour la plupart des maladies on sont restés essentiellement les mêmes au cours du dernier demi-siècle avec des résultats insatisfaisants7,8

Protocole

Les expériences ont été menées en stricte conformité avec les directives ARRIVE et le guide des National Institutes of Health pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire, et respectent les protocoles approuvés par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’Université médicale de Wenzhou (WMU) et du laboratoire Joinn (Suzhou). Les chèvres Saanen mâles, âgées de 4 à 6 mois et pesant de 19 à 23 kg, étaient hébergées dans l’animalerie de l’UMM. Les macaques rhésus mâles, âgés de 5 à 6 ans et pesant de 5 à 7 kg, étaient logés dans l’animalerie joinn. Tous les animaux ont été maintenus dans une pièce climatisée à température contrôlée (....

Résultats

La figure 1A montre des résultats représentatifs du FVEP chez la chèvre. Bien que les formes d’onde de même intensité de flash aient une similitude relative, nous recommandons toujours d’examiner les formes d’onde deux fois. Les ondes électromagnétiques générées par les appareils électroniques interféreront avec les signaux électriques collectés, ce qui entraînera un bruit de base élevé et une mauvaise répétabilité de la forme d’onde. Par conséquent, il est recommandé de s’assurer qu’il n’y .......

Discussion

Dans cette étude, nous présentons un protocole de VEP, PERG et OCT chez le macaque de chèvre et de rhésus. Ces méthodes in vivo peuvent être appliquées dans de grands modèles animaux de diverses neuropathies optiques, telles que le glaucome, la neuropathie optique ischémique ou traumatique et la névrite ^optique9.

Le PVEP est plus stable et sensible que le ^FVEP17 ; cependant, il ne peut pas être obtenu chez la ^chèvre9

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Moniteurs 47,6 x 26,8 cm	DELL Inc.	E2216HV	Les stimuli visuels de l’inversion de contraste, les damiers noir-blanc ont été affichés sur les écrans
trachéal de 6,0 mm	Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd	PVC 6.0	assurent les voies respiratoires
pince
atropine	Guangdong Jieyang Longyang Animal pharmaceutical Co., Ltd.		réduire la sécrétion bronchique et protéger le cœur de l’activation du nerf vague
Carbomer Eye Gel	Fabrik GmbH Filiale de Bausch & Lomb		humidifier la cornée et stabiliser les électrodes d’enregistrement
ERG-Jet électrodes d’enregistrement	Roland Consult Stasche& Finger GmbH	2300 La Chaux-De-Fonds	ERG enregistrement
spéculum oculaire	Shanghai Jinzhong Medical Device Co., Ltd	ZYD020	fissure palpébrale ouverte
Heidelberg Spectralis système OCT Heidelberg Engineering			Système OCT
Imagerie			( https://www.heidelbergengineering.com/media/e-learning/Totara-US/files/pdf-tutorials/2238-003_Spectralis-Training-Guide.pdf)
isoflurane	RWD Life Science Co., Ltd	R510-22	isoflurane anesthésie
chèvres Saanen mâles	Caimu Livestock Company, pays (Hangzhou, Chine)		Les chèvres Saanen mâles, âgées de 4 à 6 mois avec un poids de 19&ndash ; Électrode aiguille de 23 kg
	Roland Consult Stasche& Finger GmbH	U51-426-G-D	utilisation pour l’électrode de sol FVEP et les électrodes de référence PERG
cathéter veineux périphérique par voie intraveineuse	BD shanghai Medical Device Co., Ltd	383019	accès intraveineux pour l’atropine et le propofol
propofol	Xian Lipont Enterprise Union Management Co., Ltd.		induire une anesthésie à l’isoflurane chez la chèvre
Tropicamide Gouttes ophtalmiques à la phényléphrine	SANTEN OY, Japon		5 % de tropicamide et 5 % de chlorhydrate de phényléphrine
dispositif d’électrophysiologie visuelle	Gotec Co., Ltd	GT-2008V-III	utilisation pour FVEP & PERG
xylazine	Huamu Animal Health Products Co., Ltd.		anesthésie xylazine : injection intramusculaire de xylazine 3mg/kg
zoletil50	Virbac		induit une anesthésie à l’isoflurane chez le singe

tube alligator