JoVE Journal > Neuroscience
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Results
Discussion
Disclosures
Acknowledgements
Materials
References
Automatic Translation
Neuroscience

Den 6-hydroxydopamin rotte model af Parkinsons sygdom

Published: October 27, 2021
doi:
10.3791/62923
, , , , ,
1Department of Psychology, Faculty of Philosophy, Sciences and Letters of Ribeirão Preto,University of São Paulo

Summary

6-hydroxydopamin (6-OHDA) modellen er blevet brugt i årtier til at fremme forståelsen af Parkinsons sygdom. I denne protokol demonstrerer vi, hvordan man udfører ensidige nigrostriatale læsioner hos rotten ved at injicere 6-OHDA i det mediale forhjernebundt, vurdere motoriske underskud og forudsige læsioner ved hjælp af trintesten.

Abstract

Motoriske symptomer på Parkinsons sygdom (PD) – bradykinesi, akinesi og tremor i hvile – er konsekvenser af neurodegeneration af dopaminerge neuroner i substantia nigra pars compacta (SNc) og dopaminerg striatal underskud. Dyremodeller er blevet brugt i vid udstrækning til at simulere human patologi i laboratoriet. Gnavere er de mest anvendte dyremodeller til PD på grund af deres lette håndtering og vedligeholdelse. Desuden er anatomien og molekylære, cellulære og farmakologiske mekanismer af PD ens hos gnavere og mennesker. Infusionen af neurotoksinet, 6-hydroxydopamin (6-OHDA), i et medialt forhjernebundt (MFB) af rotter reproducerer den alvorlige ødelæggelse af dopaminerge neuroner og simulerer PD-symptomer. Denne protokol viser, hvordan man udfører den ensidige mikroinjektion af 6-OHDA i MFB i en rottemodel af PD og viser de motoriske underskud induceret af 6-OHDA og forudsagte dopaminerge læsioner gennem trintesten. 6-OHDA forårsager betydelig svækkelse i antallet af trin, der udføres med det kontralaterale forben.

Introduction

De vigtigste neuropatologiske egenskaber ved PD er den kroniske progressive neurodegeneration af dopaminerge neuroner i substantia nigra pars compacta (SNc) og tilstedeværelsen af Lewy-kroppe, der indeholder α-synucleinprotein1. Da SNc dopaminerge neuroner projicerer deres axoner ind i striatum gennem den nigrostriatale vej, resulterer neurodegeneration af neuroner i SNc i et dopaminergt underskud i striatum2. Fraværet af dopamin i striatum forårsager en ubalance i aktiviteterne i de direkte og indirekte motoriske kontrolveje, som er ansvarlig for de vigtigste motoriske symptomer på PD: akinesi (langsom bevægelse), bradykinesi (vanskeligheder med at starte bevægelser), muskelstivhed og rysten i hvile3,4,5.

Da de molekylære og fysiologiske mekanismer, der er involveret i begyndelsen af PD, stadig ikke er fuldt ud forstået, søger de aktuelt tilgængelige hovedbehandlinger at lindre de motoriske symptomer gennem farmakoterapier, dyb hjernestimulering6,7, genetiske terapier8 og celletransplantation9. Derfor er præklinisk forskning grundlæggende for at belyse de mekanismer, der er involveret i starten af PD og opdage nye metoder til tidlig diagnose og nye terapier til forebyggelse eller stop af degenerering af neuroner, der er ramt af PD10.

Dyremodeller er blevet brugt i vid udstrækning til at simulere human patologi i laboratoriet, hvilket bidrager til fremskridt inden for medicin og videnskab11,12,13,14. Det er dog vigtigt at understrege, at det korrekte valg af dyremodel er grundlæggende for undersøgelsens succes. Derfor skal dyremodellen valideres i tre hovedaspekter: i) ansigtsgyldighed, hvor dyremodellen skal have karakteristika som human patologi; ii) konstruktiv gyldighed, hvor dyremodellen skal have et solidt teoretisk grundlag og iii) prædiktiv validitet, hvor dyremodeller skal reagere på behandlinger på samme måde som klinisk behandling.

I øjeblikket anvendes flere dyr som dyremodeller for PD. Hovedgrupperne omfatter pattedyr, såsom gnavere, primater, minigrise, hunde og katte og andre grupper som drosophila og zebrafisk. Gnavere er den mest klassiske dyremodel til PD og den mest anvendte på grund af deres lette håndtering og vedligeholdelse. Derudover er PD’s anatomi og molekylære, cellulære og farmakologiske mekanismer ens hos gnavere og mennesker15.

En gennemgang offentliggjort af Kin og kolleger i 2019 analyserede de vigtigste dyremodelmetoder, der blev anvendt til PD i 2000’erne, og fandt ud af, at den mest anvendte dyremodel involverede neurotoksiner såsom 6-hydroxydopamin (6-OHDA) og 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridin (MPTP). Begge neurotoksiner forårsager mitokondriel dysregulering i dopaminerge neuroner i den nigrostriatale vej, hvilket fører til celledød16. En anden meget anvendt model involverer genetisk manipulation gennem mutation i specifikke gener, der er involveret i begyndelsen af PD, hvilket forårsager mitokondriel dysregulering17. Neurotoksinmodeller bruges almindeligvis til at evaluere og sammenligne terapi, mens genetiske modeller bruges til at studere udviklingen af forebyggende terapier og idiopatisk PD15.

Neurotoksinet MPTP blev opdaget at forårsage parkinsonisme i midten af 1980’erne, efter at syv patienter brugte stoffet og udviste alvorlige PD-symptomer. Ud over symptomerne reagerede patienterne på behandling med L-DOPA, hvilket fik forskerne til at forbinde molekylet direkte med PD. Efter at sagen blev offentliggjort i 1986, begyndte flere forskere at bruge MPTP i præklinisk PD-forskning18. Forskere har fundet ud af, at MPTP som et lipofilt molekyle kan krydse blod-hjerne-barrieren (BBB) og omdannes til MPP + 19. Dette giftige stof akkumuleres inde i neuroner og forårsager skade på kompleks 1 i mitokondriekæden, hvilket fører til dopaminerge neuroners død20.

6-OHDA neurotoksinmodellen blev først brugt til at inducere degenerering af monoaminneuroner i den nigrostriatale vej i 196821. 6-OHDA-modellen bruges almindeligvis til at forårsage neurodegeneration i nigrostriatalvejen, da den er en dopaminanalog og giftig for catecholaminholdige celler. Efter 6-OHDA kommer ind i hjernen, kan det blive optaget af dopamintransportøren (DAT) i dopaminerge neuroner, hvilket fører til degeneration af den nigrostriatale vej22. Da 6-OHDA ikke trænger ind i BBB, skal det administreres direkte gennem intracerebral stereotaxisk injektion23. En noradrenalin-genoptagelseshæmmer kombineres ofte med 6-OHDA-mikroinjektion for at bevare noradrenerge fibre og give en mere selektiv degeneration af dopaminerge neuroner24.

Når DAT optager 6-OHDA, akkumuleres det i cytosolen af neuroner, hvilket producerer reaktive iltarter (ROS) og fører til celledød15. Tre forskellige læsioner modeller af 6-OHDA anvendes ofte: i) læsioner til SNc25,26; ii) læsioner i striatum27,28 iii) læsioner til MFB29,30. Læsioner forårsaget i striatum resulterer i en langsom og retrograd degeneration af dopaminerge neuroner i SNpc. I modsætning hertil resulterer læsioner forårsaget i SNpc og MFB i hurtig og total degeneration af neuroner, hvilket fører til mere avancerede parkinsoniske symptomer31.

Ensidig eller bilateral injektion af 6-OHDA kan forårsage neurodegeneration i dopaminerge neuroner. 6-OHDA forårsager ikke altid alvorlig skade på neuronerne; nogle gange resulterer injektionen i delvis skade, som også bruges til at simulere de tidlige stadier af PD32. Den ensidige injektion anvendes mere almindeligt på grund af modellens evne til at vurdere dyrets motoriske underskud og forudsige celletab gennem tests som amfetamin/apomorphinduceret rotation og trintest29. Bilaterale injektioner bruges mest til at evaluere rumlig hukommelse og genkendelse33.

Den amfetamin / apomorphin-inducerede rotationstest er en adfærdsmæssig test, der almindeligvis anvendes til at forudsige celletab i den nigrostriatale vej. Det defineres som en proces, hvor gentagen administration af dopaminagonister fører til en intensivering af rotationsadfærd hos 6-OHDA-læsionerede dyr34. Rotationsadfærd består i at kvantificere amfetamin-induceret ipsilateral rotation eller apomorphin-induceret kontralaterale vendinger i ensidigt læsionerede gnavere. Lægemiddelinduceret rotationsadfærd er blevet kritiseret, fordi rotation ikke svarer til PD-symptomer hos mennesker og kan påvirkes af variabler som tolerance, sensibilisering og “priming”35.

Priming er en af de mest kritiske faktorer i disse adfærdsmæssige tests. Der er rapporteret om nogle tilfælde, hvor en enkelt dosis L-DOPA førte til en fejl i rotationsadfærd36. Derudover er en anden kritisk faktor i forbindelse med den kombinerede anvendelse af den amfetamininducerede test og apomorphinducerede test til parallel anvendelse, at de måler forskellige endepunkter på grund af forskellige virkningsmekanismer, hvilket afspejler inaktiveringen af forskellige signalmekanismer og -veje. Desuden er den amfetamininducerede test mere præcis til at måle nigrostriatale læsioner over 50-60%, mens den apomorphinducerede test er mere nøjagtig for læsioner over 80% 37.

Stepping testen er opstået som en adfærdsmæssig test, der indikerer underskud relateret til dopaminerg neuron degeneration og terapeutiske virkninger. Det muliggør analyse af akinesi forårsaget af en 6-OHDA læsion i dopaminerge neuroner uden en lægemiddelinduceret procedure. Desuden har testen været veletableret og almindeligt anvendt siden 1995, da den først blev beskrevet af Olsson et al.35. I 1999 analyserede og sammenlignede Chang et al.38 også rotternes ydeevne i trintesten med niveauet af degeneration forårsaget af 6-OHDA og fandt ud af, at dyr, der klarede sig dårligere i trintesten, også havde en mere signifikant degeneration af dopaminerge neuroner.

Stepping testen er en glimrende metode til at forudsige alvorlig dopaminerg nigrostriatal skade hos 6-OHDA-læsionerede rotter. Beviser tyder på, at motoriske underskud forekommer i det kontralaterale forben af 6-OHDA-infusionen under trintesten, når graden af dopaminerg tab i SNc er >90%39. Dette papir beskriver de protokoller, metoder og materialer, der bruges til at udføre stereotaksisk kirurgi til ensidig infusion af 6-OHDA i MFB af rotter, og hvordan man forudsiger de dopaminerge læsioner forårsaget af toksinet gennem trintesten.

Protocol

Alle forsøg, der involverede dyr, fulgte de etiske principper fra Det Nationale Råd for Kontrol med Dyreforsøg (CONCEA) og Arouca-loven (lov 11.794/2008) og blev godkendt af den lokale etiske komité (CEUA-FFCLRP/USP (18.5.35.59.5). 1. Fremstilling af lægemidler Anæstesi med ketamin/xylazinBEMÆRK: Den anvendte dosis ketamin er 70 mg/kg, og dosis af xylazin er 10 mg/kg. For at fremstille 1 ml bedøvelsesmiddel under anvendelse af ketamin 100 mg/ml op…

Representative Results

Dopaminerg læsion vurderingTrintesten muliggør vurdering af akinesi af det forreste lem kontralateralt til læsionen og udvælgelse af dyr med en mulig læsion af den nigrostriatale vej induceret ved 6-OHDA infusion (figur 1). Sammenligningen af udførelsen af den kontralaterale forbenstrinstest før operationen og 2 uger og 4 uger efter operationen afslørede interaktion (F2,74 = 93,63; p < 0,0001; tovejs gentagne målinger ANOVA) mellem tid (før, 2 og 4 u…

Discussion

Dette papir beskriver en protokol til udførelse af kirurgi for ensidig mikroinfusion af 6-OHDA i MFB, der er i stand til at forårsage robuste læsioner i neuronerne i den nigrostriatale vej og generere akinesi i dyret. Også beskrevet er protokollen til udførelse af trintesten, en let anvendelig og ikke-invasiv test, der kan bruges til at bevise læsionernes succes og vurdere forbenskændi. Som præsenteret i de repræsentative resultater viste dyr, der fik 6-OHDA, en reduktion i antallet af justeringstrin, der var ko…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dette arbejde blev støttet af São Paulo Research Foundation (FAPESP, bevilling 2017/00003-0). Vi er taknemmelige for koordineringen til forbedring af personale på videregående uddannelser (CAPES). Vi takker Dr. Anthony R. West, Dr. Heinz Steiner og Dr. Kuei Y. Tseng for støtte og mentorskab.

Materials

6-OHDA Sigma Aldrich H4381 https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/h4381?lang=pt&region=BR&cm_sp=Insite-_-caSrpResults_srpRecs_srpModel
_6-ohda-_-srpRecs3-1
70% Alcohol
Ascorbic acid Sigma Aldrich 795437 https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/795437?lang=pt&region=BR&gclid=
Cj0KCQjw4cOEBhDMARIsAA3XD
RipyOnxOxkKAm3J1PxvIsvw09
_kfaS2jYcD9E5OyuHYr4n89kO
6yicaAot6EALw_wcB
Cotton
Drill or tap
Gauze
Hamilton syringe 50 uL Hamilton 80539 https://www.hamiltoncompany.com/laboratory-products/syringes/80539
Imipramine Alfa Aeser J63723 https://www.alfa.com/pt/catalog/J63723/
Infusion pump Insight EFF-311 https://insightltda.com.br/produto/eff-311-bomba-de-infusao-2-seringas/
Ketamine (Dopalen) Ceva https://www.ceva.com.br/Produtos/Lista-de-Produtos/DOPALEN
Machine for trichotomy
Meloxicam (Maxicam 2%  Ourofino) Ourofino https://terrazoo.com.br/produto/maxicam-injetavel-2-50ml-ouro-fino/
Metal Disposal
Paper towels
Pentabiotic Zoetis https://www.zoetis.com.br/pentabiotico-veterinario.aspx
Plastic waste garbage can
Poly-antibiotic Pentabiotic (Wealth)
Povidone-iodine
Scalpel and blades
Scissors
Scraper
Stereotaxic apparatus Insight EFF-331 https://insightltda.com.br/produto/eff-331-estereotaxico-1-torre/
Sterile saline solution
Swabs
Temperature probe
Timer
Tweezers
Xylazine (Anasedan) Ceva https://www.ceva.com.br/Produtos/Lista-de-Produtos/ANASEDAN
DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gibb, W. R., Lees, A. J. The relevance of the Lewy body to the pathogenesis of idiopathic Parkinson’s disease. Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 51 (6), 745-752 (1988).
  2. Albin, R. L., Young, A. B., Penney, J. B. The functional anatomy of basal ganglia disorders. Trends in Neurosciences. 12 (10), 366-375 (1989).
  3. Dexter, D. T., Jenner, P. Parkinson disease: from pathology to molecular disease mechanisms. Free Radical Biology & Medicine. 62, 132-144 (2013).
  4. Obeso, J. A., et al. Functional organization of the basal ganglia: therapeutic implications for Parkinson’s disease. Movement Disorders. 23, 548-559 (2008).
  5. Tysnes, O. -. B., Storstein, A. Epidemiology of Parkinson’s disease. Journal of Neural Transmission. 124 (8), 901-905 (2017).
  6. Karachi, C., et al. Clinical and anatomical predictors for freezing of gait and falls after subthalamic deep brain stimulation in Parkinson’s disease patients. Parkinsonism & Related Disorders. 62, 91-97 (2019).
  7. Sudhakar, V., Richardson, R. M. Gene therapy for Parkinson’s disease. Progress in Neurological Surgery. 33, 253-264 (2018).
  8. Baizabal-Carvallo, J. F., et al. Combined pallidal and subthalamic nucleus deep brain stimulation in secondary dystonia-parkinsonism. Parkinsonism & Related Disorders. 19 (5), 566-568 (2013).
  9. Morizane, A. Cell therapy for Parkinson’s disease with induced pluripotent stem cells. Clinical Neurology. 59 (3), 119-124 (2019).
  10. Jankovic, J., Tan, E. K. Parkinson’s disease: etiopathogenesis and treatment. Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 91 (8), 795-808 (2020).
  11. Cenci, M. A., Whishaw, I. Q., Schallert, T. Animal models of neurological deficits: how relevant is the rat. Nature Reviws. Neuroscience. 3 (7), 574-579 (2002).
  12. Tronci, E., Francardo, V. Animal models of l-DOPA-induced dyskinesia: the 6-OHDA-lesioned rat and mouse. Journal of Neural Transmission. 125 (8), 1137-1144 (2018).
  13. Lane, E., Dunnett, S. Animal models of Parkinson’s disease and L-dopa induced dyskinesia: How close are we to the clinic. Psychopharmacology. 199 (3), 303-312 (2008).
  14. Meredith, G. E., Sonsalla, P. K., Chesselet, M. -. F. Animal models of Parkinson’s disease progression. Acta Neuropathologica. 115 (4), 385-398 (2008).
  15. Kin, K., Yasuhara, T., Kameda, M., Date, I. Animal models for Parkinson’s disease research: trends in the 2000s. International Journal of Molecular Sciences. 20 (21), 5402 (2019).
  16. Schober, A. Classic toxin-induced animal models of Parkinson’s disease: 6-OHDA and MPTP. Cell and Tissue Research. 318 (1), 215-224 (2004).
  17. Smith, G. A., Isacson, O., Dunnett, S. B. The search for genetic mouse models of prodromal Parkinson’s disease. Experimental Neurology. 237 (2), 267-273 (2012).
  18. Langston, J. W., Ballard, P., Tetrud, J. W., Irwin, I. Chronic Parkinsonism in humans due to a product of meperidine-analog synthesis. Science. 219 (4587), 979-980 (1983).
  19. Langston, J. W., Irwin, I., Langston, E. B., Forno, L. S. 1-Methyl-4-phenylpyridinium ion (MPP+): identification of a metabolite of MPTP, a toxin selective to the substantia nigra. Neuroscience Letters. 48 (1), 87-92 (1984).
  20. Ramsay, R. R., Salach, J. I., Singer, T. P. Uptake of the neurotoxin 1-methyl-4-phenylpyridine (MPP+) by mitochondria and its relation to the inhibition of the mitochondrial oxidation of NAD+-linked substrates by MPP+. Biochemical and Biophysical Research Communications. 134 (2), 743-748 (1986).
  21. Ungerstedt, U. 6-Hydroxy-dopamine induced degeneration of central monoamine neurons. European Journal of Pharmacology. 5 (1), 107-110 (1968).
  22. Blandini, F., Armentero, M. -. T. Animal models of Parkinson’s disease. FEBS Journal. 279 (7), 1156-1166 (2012).
  23. McDowell, K., Chesselet, M. -. F. Animal models of the non-motor features of Parkinson’s disease. Neurobiology of Disease. 46 (3), 597-606 (2012).
  24. Luthman, J., Fredriksson, A., Sundström, E., Jonsson, G., Archer, T. Selective lesion of central dopamine or noradrenaline neuron systems in the neonatal rat: motor behavior and monoamine alterations at adult stage. Behavioural Brain Research. 33 (3), 267-277 (1989).
  25. Casarrubea, M., et al. Effects of Substantia Nigra pars compacta lesion on the behavioral sequencing in the 6-OHDA model of Parkinson’s disease. Behavioural Brain Research. 362, 28-35 (2019).
  26. Wang, R., Shao, M. L-DOPA-elicited abnormal involuntary movements in the rats damaged severely in substantia nigra by 6-hydroxydopamine. Annals of Palliative Medicine. 9 (3), 947-956 (2020).
  27. Hernandez-Baltazar, D., Mendoza-Garrido, M. E., Martinez-Fong, D. Activation of GSK-3β and caspase-3 occurs in Nigral dopamine neurons during the development of apoptosis activated by a striatal injection of 6-hydroxydopamine. PLoS One. 8 (8), 70951 (2013).
  28. Bagga, V., Dunnett, S. B., Fricker, R. A. The 6-OHDA mouse model of Parkinson’s disease – Terminal striatal lesions provide a superior measure of neuronal loss and replacement than median forebrain bundle lesions. Behavioural Brain Research. 288, 107-117 (2015).
  29. Iancu, R., Mohapel, P., Brundin, P., Paul, G. Behavioral characterization of a unilateral 6-OHDA-lesion model of Parkinson’s disease in mice. Behavioural Brain Research. 162 (1), 1-10 (2005).
  30. Boix, J., Padel, T., Paul, G. A partial lesion model of Parkinson’s disease in mice – Characterization of a 6-OHDA-induced medial forebrain bundle lesion. Behavioural Brain Research. 284, 196-206 (2015).
  31. Blesa, J., Phani, S., Jackson-Lewis, V., Przedborski, S. Classic and new animal models of Parkinson’s disease. Journal of Biomedicine & Biotechnology. 2012, 845618 (2012).
  32. Breit, S., et al. Effects of 6-hydroxydopamine-induced severe or partial lesion of the nigrostriatal pathway on the neuronal activity of pallido-subthalamic network in the rat. Experimental Neurology. 205 (1), 36-47 (2007).
  33. More, S. V., Kumar, H., Cho, D. -. Y., Yun, Y. -. S., Choi, D. -. K. Toxin-induced experimental models of learning and memory impairment. International Journal of Molecular Sciences. 17 (9), 1447 (2016).
  34. Schwarting, R. K. W., Huston, J. P. The unilateral 6-hydroxydopamine lesion model in behavioral brain research. Analysis of functional deficits, recovery and treatments. Progress in Neurobiology. 50 (2-3), 275-331 (1996).
  35. Olsson, M., Nikkhah, G., Bentlage, C., Björklund, A. Forelimb akinesia in the rat Parkinson model: differential effects of dopamine agonists and nigral transplants as assessed by a new stepping test. Journal of Neuroscience. 15 (5), 3863-3875 (1995).
  36. Lindgren, H. S., Rylander, D., Ohlin, K. E., Lundblad, M., Cenci, M. A. The ‘motor complication syndrome’ in rats with 6-OHDA lesions treated chronically with l-DOPA: Relation to dose and route of administration. Behavioural Brain Research. 177 (1), 150-159 (2007).
  37. Björklund, A., Dunnett, S. B. The amphetamine induced rotation test: A re-assessment of its use as a tool to monitor motor impairment and functional recovery in rodent models of Parkinson’s disease. Journal of Parkinson’s Disease. 9 (1), 17-29 (2019).
  38. Chang, J. W., Wachtel, S. R., Young, D., Kang, U. J. Biochemical and anatomical characterization of forepaw adjusting steps in rat models of Parkinson’s disease: studies on medial forebrain bundle and striatal lesions. Neuroscience. 88 (2), 617-628 (1999).
  39. Jayasinghe, V. R., Flores-Barrera, E., West, A. R., Tseng, K. Y. Frequency-dependent corticostriatal disinhibition resulting from chronic dopamine depletion: role of local striatal cGMP and GABA-AR signaling. Cerebral Cortex. 27 (1), 625-634 (2017).
  40. Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury. Neuropharmacology. 39 (5), 777-787 (2000).
  41. Paxinos, G., Watson, C. . The rat brain in stereotaxic coordinates. , (2006).
  42. Padovan-Neto, F. E., et al. Selective regulation of 5-HT1B serotonin receptor expression in the striatum by dopamine depletion and repeated L-DOPA treatment: relationship to L-DOPA-induced dyskinesias. Molecular Neurobiology. 57 (2), 736-751 (2020).
  43. Prasad, E. M., Hung, S. -. Y. Behavioral tests in neurotoxin-induced aAnimal models of Parkinson’s disease. Antioxidants. 9 (10), 1007 (2020).
  44. Lundblad, M., Picconi, B., Lindgren, H., Cenci, M. A. A model of L-DOPA-induced dyskinesia in 6-hydroxydopamine lesioned mice: Relation to motor and cellular parameters of nigrostriatal function. Neurobiology of Disease. 16 (1), 110-123 (2004).
  45. Masini, D., et al. A guide to the generation of a 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson’s disease for the study of non-motor symptoms. Biomedicines. 9 (6), 598 (2021).
  46. Francardo, V., et al. Impact of the lesion procedure on the profiles of motor impairment and molecular responsiveness to L-DOPA in the 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson’s disease. Neurobiology of Disease. 42 (3), 327-340 (2011).
  47. Thiele, S. L., Warre, R., Nash, J. E. Development of a unilaterally-lesioned 6-OHDA mouse model of Parkinson’s disease. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (60), e3234 (2012).
  48. Fish, R., Danneman, P., Brown, M., Karas, A. . Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals. , (2008).
  49. Buitrago, S., Martin, T. E., Tetens-Woodring, J., Belicha-Villanueva, A., Wilding, G. E. Safety and efficacy of various combinations of injectable anesthetics in BALB/c mice. Journal of the American Association for Laboratory Animal Sciences. 47 (1), 11-17 (2008).
  50. Struck, M. B., Andrutis, K. A., Ramirez, H. E., Battles, A. H. Effect of a short-term fast on ketamine-xylazine anesthesia in rats. Journal of the American Association for Laboratory Animal Sciences. 50 (3), 344-348 (2011).
  51. Jiron, J. M., et al. Comparison of isoflurane, ketamine-dexmedetomidine, and ketamine-xylazine for general anesthesia during oral procedures in rice rats (Oryzomys palustris). Journal of the American Association for Laboratory Animal Sciences. 58 (1), 40-49 (2019).

Tags

Keywords: 6-hydroxydopamineParkinson’s DiseaseRat ModelNigrostriatal LesionsMedial Forebrain BundleStepping TestMotor DeficitsDopaminergic NeuronsSubstantia NigraNeurodegeneration
check_url/62923?article_type=t

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Cite This Article
Guimarães, R. P., Ribeiro, D. L., dos Santos, K. B., Godoy, L. D., Corrêa, M. R., Padovan-Neto, F. E. The 6-hydroxydopamine Rat Model of Parkinson’s Disease. J. Vis. Exp. (176), e62923, doi:10.3791/62923 (2021).
Download Citation
Reprints and Permissions

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image