הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

שיטת חיסון יעילה עבור Phytophthora capsici על צמחי פלפל שחור

3.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/63002

⸱

16 בספטמבר 2022

 ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

הצמדת הראש הבסיסי של צמח הפלפל השחור היא שיטה קצרה וחסכונית בזמן כדי לפגוע בו. כאן סיפקנו שלבים מפורטים עם סרטון להדבקת צמחי פלפל שחור.

תקציר

פייפר ניגרום ל. (פלפל שחור) הוא גפן עצית טיפוסית שהיא גידול תבלינים חשוב מבחינה כלכלית ברחבי העולם. ייצור הפלפל השחור מושפע באופן משמעותי ממחלת ריקבון השורשים הנגרמת על ידי Phytophthora capsici, אשר השפיעה קשות על התפתחות התעשייה כבעיית "נקודת חנק". עם זאת, המנגנון הגנטי המולקולרי של עמידות בפלפל שחור אינו ברור, מה שמוביל להתקדמות איטית בפיתוח זנים חדשים של פלפל שחור. חיסון יעיל ומערכת דגימה מדויקת עבור Phytophthora capsici על צמחי פלפל שחור חיוניים לחקר האינטראקציה הזו בין צמחים לפתוגנים. המטרה העיקרית של מחקר זה היא להדגים מתודולוגיה מפורטת שבה הראש הבסיסי של פלפל שחור מחוסן עם Phytophthora capsici, תוך מתן התייחסות גם לחיסון של צמחי גפן עציים. הראש הבסיסי של צמח הפלפל השחור ננעץ כדי לפגוע בו, וכדורי תפטיר כיסו את שלושת החורים כדי לשמור על הלחות כדי שהפתוגן יוכל להדביק את הצמח היטב. שיטה זו מספקת דרך טובה יותר לפתור את חוסר היציבות הנגרם על ידי שיטות חיסון מסורתיות כולל סחף אדמה או טבילת שורשים. הוא גם מספק אמצעי מבטיח לחקר אופן הפעולה בין צמחים לבין פתוגנים צמחיים אחרים הנישאים בקרקע בגידול חקלאי מדויק.

מבוא

פלפל שחור (Piper nigrum L.) הוא מטפס עצי ואחד מגידולי התבלינים החשובים ביותר. הוא ידוע בשם "מלך התבלינים"1 והוא מעובד ביותר מ -40 מדינות ואזורים ברחבי אסיה, אפריקה ואמריקה הלטינית. ריקבון שורש פיטופתורה הוא המחלה ההרסנית ביותר של פלפל שחור, והוא נגרם על ידי oomycete Phytophthora capsici. פתוגן זה מדביק גם קוקורביטים, חצילים, פלפלי צ'ילי ועגבניות 2,3. עם פלפל שחור, יבול שלם יכול לפעמים להיות מרוסק על ידי מחלה זו. התרחבות אזורי שתילת הפלפלים מוגבלת כתוצאה מחוסר זמינותם של זנים עמידים, מה שעיכב משמעותית את התפתחות תעשיית הפלפל השחור הסינית. חיסון יעיל ומערכת דגימה מדויקת ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. הכנת צמחי חיתוך פלפל שחור לזיהום

  1. יש לבצע חיתוך של חמישה צמתים, באורך של כ-40 ס"מ בקוטר של 0.5 ס"מ, מענף אורתוטרופי בריא וצומח במרץ של פלפל שחור באמצעות סכין גיזום מחוטאת או פרשיות. גוזמים את שלושת הצמתים התחתונים של הענפים הפלגיוטרופיים, כאשר שני הצמתים העליונים נותרו עם כ-10 עלים שלמים.
  2. הכינו מצע השתרשות המכיל אדמה וזבל בעלי חיים (גללי פרות או גללי כבשים) ביחס של 1:1. Autoclaveed את מצע ההשתרשות ב 121 °C (66 °F) למשך 20 דקות.
  3. הכנס את החיתוכים למצע ההשתרשות בזווית של כ-50°, כאשר הצומת השלישי רק נוגע במשטח המצע ובניצן בית השחי בצומת זה מעל המצע.
    הערה: התיק המשמש כאן הוא בעל המידות הבאות: גובה של 40-60 ס"מ, קוטר של 25....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

איור 1 מראה את הסימפטומים של עלי פלפל שחור בעקבות חיסון P. capsici . איור 2 מראה את הסימפטומים של גבעולי פלפל שחור לאחר חיסון P. capsici . הפתוגן הדביק את הפלפל השחור בגזע הבסיס; תסמינים הכוללים הצהבת עלים, הופעת רטט, השחמה של קסילם והשחרת כלי דם המופיעים בהדרגה. איור 3 מראה שרוב הגנים באים לידי ביטוי באופן שונה לאחר החיסון עם Phytophthora capsici בהשוואה לקבוצת הביקורת. איור 4

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

במחקר זה, ראש הבסיס ננעץ כדי לגרום נזקים ולספק מערכת חיסונים יעילה בצמח הפלפל השחור. לאחר מכן כיסו כדורי התפטיר את שלושת החורים כדי לשמור על הלחות ולאפשר לפתוגן להדביק את הצמח היטב. לאחר החיסון, העלים הפכו צהובים ונשרו והצמחים המחוסנים מתו. לא התפתחו נגעים בצמחי הבקרה. רוב הגנים התבטאו באופן שונה לאחר חיסון עם Phytophthora capsici בהשוואה לקבוצת הביקורת. מחלות פטרייתיות אחראיות להפרעות מבניות ופיזיולוגיות במספר משמעותי של גידולים, מה שמוביל לירידה בפריון ולהפסדים כלכליים עבור היצרנים שלהן. מחקרים מבניים המשתמשים.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תודות

עבודה זו נתמכה כספית על ידי תוכנית המחקר והפיתוח הלאומית של סין (2020YFD1001200), מערכת המחקר החקלאית של סין (CARS-11), קרן המחקר הספציפית של פלטפורמת החדשנות לאקדמאים של מחוז האינאן (YSPTZX202154), הקרן למדעי הטבע של מחוז האינאן בסין (321RC652), והקרן למדעי הטבע של סין (מס '31601626).

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אבקת אגרSolarbioA8190
ספסל נקיHaier
DextroseXilong Scientific15700501
תנור עיקור בטמפרטורה גבוההZaelway
צלחות צלחתפטרי BiosharpBS-90-D

מקורות

  1. Gordo, S. M., et al. High-throughput sequencing of black pepper root transcriptome. BMC Plant Biology. 12 (1), (2012).
  2. Leonian, L. H. Stem and fruit blight of Peppers caused by Phytophthora capsici sp. Nov. Phytopathology. 12 (9), 401-408 ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

מחלת ריקבוב השורשיםאינטראקציה בין פתוגן לצמחחיסון באמצעות דקירהכדורי מיצליוםאגר פוטטו-דקסטרוזפתוגנים מועברי קרקערבייה מדויקת