वर्तमान प्रोटोकॉल सचेत चूहों में गुर्दे के रक्त प्रवाह के दीर्घकालिक निरंतर माप का वर्णन करता है और साथ ही प्रत्यारोपित कैथेटर (द्रव से भरे या टेलीमेट्री द्वारा) के साथ रक्तचाप रिकॉर्ड करता है।
गुर्दे शरीर के तरल पदार्थों के होमियोस्टैसिस को बनाए रखने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। गुर्दे के रक्त प्रवाह (आरबीएफ) का विनियमन गुर्दे के कार्य में निस्पंदन और चयापचय के महत्वपूर्ण कार्यों के लिए आवश्यक है। गुर्दे के छिड़काव के नियमन के लिए जिम्मेदार तंत्र निर्धारित करने के लिए विभिन्न परिस्थितियों में आरबीएफ को मापने के लिए एनेस्थेटाइज्ड जानवरों में कई तीव्र अध्ययन किए गए हैं। हालांकि, तकनीकी कारणों से, लंबे समय तक अनियंत्रित अनियंत्रित चूहों में आरबीएफ को लगातार (24 घंटे / दिन) मापना संभव नहीं है। ये विधियां कई हफ्तों तक आरबीएफ के निरंतर निर्धारण की अनुमति देती हैं, जबकि साथ ही साथ प्रत्यारोपित कैथेटर (द्रव से भरे या टेलीमेट्री द्वारा) के साथ रक्तचाप (बीपी) को रिकॉर्ड करती हैं। आरबीएफ निगरानी एक गोलाकार सर्वो-नियंत्रित चूहे पिंजरे में रखे गए चूहों के साथ की जाती है जो पूरे अध्ययन में चूहे के अनियंत्रित आंदोलन को सक्षम बनाता है। इसी समय, प्रवाह जांच और धमनी कैथेटर से केबलों की उलझन को रोका जाता है। चूहों को पहले बाईं गुर्दे की धमनी पर एक अल्ट्रासोनिक प्रवाह जांच प्लेसमेंट और दाईं ऊरु धमनी में प्रत्यारोपित धमनी कैथेटर के साथ यंत्रीकृत किया जाता है। इन्हें गर्दन की झपकी तक चमड़े के नीचे रूट किया जाता है, और आरबीएफ और बीपी को मापने के लिए क्रमशः फ्लोमीटर और प्रेशर ट्रांसड्यूसर से जोड़ा जाता है। सर्जिकल आरोपण के बाद, चूहों को तुरंत पिंजरे में रखा जाता है ताकि कम से कम एक सप्ताह तक ठीक हो सकें और अल्ट्रासोनिक जांच रिकॉर्डिंग को स्थिर किया जा सके। इस प्रणाली में मूत्र संग्रह भी संभव है। निरंतर निगरानी के लिए सर्जिकल और पोस्ट-सर्जिकल प्रक्रियाओं को इस प्रोटोकॉल में प्रदर्शित किया गया है।
गुर्दे शरीर के वजन का केवल 0.5% हैं, लेकिन रक्त प्रवाह में समृद्ध हैं, कुल कार्डियक आउटपुट1 का 20% -25% प्राप्त करते हैं। गुर्दे के रक्त प्रवाह (आरबीएफ) का विनियमन गुर्दे के कार्य, शरीर के तरल पदार्थ और इलेक्ट्रोलाइट होमियोस्टैसिस के लिए केंद्रीय है। गुर्दे में रक्त प्रवाह विनियमन के महत्व को एकतरफा नेफरेक्टोमी 2,3,4 के बाद शेष गुर्दे में आरबीएफ की पर्याप्त वृद्धि और गुर्दे की विफलता 5,6,7 में होने वाली आरबीएफ की कमी से अच्छी तरह से चित्रित किया गया है। क्या आरबीएफ में इस तरह के परिवर्तन गुर्दे के कार्य में परिवर्तन के जवाब में होते हैं या आरबीएफ की कमी के कारण कार्य में कमी होती है, एनेस्थेटाइज्ड शल्य चिकित्सा से तैयार जानवरों या मानव विषयों में पता लगाना चुनौतीपूर्ण रहा है। अस्थायी अध्ययन की आवश्यकता होती है जिसमें घटनाओं को परिभाषित परिवर्तन से पहले और बाद में निर्धारित किया जा सकता है और घटनाओं की प्रगति के दौरान एक ही जानवर में देखा जा सकता है। पशु और मानव अध्ययनों में, आरबीएफ का अनुमान अप्रत्यक्ष रूप से पैरा-एमिनो हिप्पुरिक एसिड (पीएएच) 8,9,10 की निकासी द्वारा और हाल के समय में अल्ट्रासाउंड 9,11,12, एमआरआई 4,13 और पीईटी-सीटी 14,15 जैसी इमेजिंग तकनीकों द्वारा लगाया गया है। जो प्रत्येक गुर्दे की सहायक स्नैपशॉट छवियां देते हैं और जो रोग की प्रगति का पालन कर सकते हैं। संज्ञाहरण के बिना अल्ट्रासाउंड या एमआरआई स्कैन द्वारा छोटे जानवरों में आरबीएफ का मूल्यांकन करना चुनौतीपूर्ण है। लंबे समय तक एक ही चूहे में सचेत परिस्थितियों में आरबीएफ को लगातार मापना असंभव रहा है।
इसलिए, वर्तमान प्रोटोकॉल ने ऐसी तकनीकें विकसित कीं जो आरबीएफ के एक साथ निरंतर 24 घंटे / दिन माप को सक्षम करती हैं, जिसे स्वतंत्र रूप से चलने वाले चूहों के लिए निरंतर रक्तचाप माप विधियों के साथ जोड़ा गया है जैसा कि पहले वर्णित 16,17,18,19,20,21 . यह तकनीक भविष्य में विभिन्न गुर्दे विकारों में कारण-प्रभाव संबंधों का अध्ययन करने के लिए चूहों के विभिन्न मॉडलों में आरबीएफ के अस्थायी मूल्यांकन की अनुमति देती है।
वर्तमान प्रोटोकॉल एक ऐसी तकनीक का वर्णन करता है जो कई हफ्तों में लगातार आरबीएफ और धमनी दबाव को रिकॉर्ड करने के लिए व्यावसायिक रूप से उपलब्ध इंस्ट्रूमेंटेशन का उपयोग करता है। इसके अलावा, चरण 1.1 में वर्ण?…
The authors have nothing to disclose.
इस अध्ययन को वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए अनुदान (पी 01 एचएल 116264, आरओ 1 एचएल 137748) द्वारा समर्थित किया गया था। लेखक अपनी सलाह के लिए थेरेसा कुर्थ को धन्यवाद देना चाहते हैं और प्रयोगशाला प्रबंधक के रूप में प्रयोगात्मक वातावरण को बनाए रखने में मदद करते हैं।
1RB probe | Transonic | 1RB | ultrasonic flow probe |
Betadine | Avrio Health | povidone-iodine | |
Buprenorphine SR-LAB | ZooPharm | Buprenorphine | |
Cefazolin | APOTEX | NDC 60505 | Cefazolin |
Crile Hemostats | Fine Surgical Instruments | 13004-14 | Hemostats for blunt dissection |
Isoflurane | Piramal | NDC 66794 | Isoflurane |
Medium Clear PVC cement | Oatey | PVC cement | |
Mersilene polyester fiber mesh | Ethicon | polyester fiber mesh | |
MetriCide28 | Metrex | SKU 10-2805 | 2.5% glutaraldehyde |
Micro-Renathane 0.025 x 0.012 | Braintree Scientific | MRE 025 | use for catheter |
MINI HYPE-WIPE | Current Technologies | #9803 | 1% sodium hypochlorite |
Oatey Medium Clear PVC Cement | Oatey | #31018 | PVC cement |
PHD2000 syringe pump | Harvard apparatus | 71-2000 | syringe pump |
Ponemah software | DSI | recording software | |
Precision 3630 Tower | Dell | Computer for recording | |
Raturn Stand-Alone System | BASi | MD-1407 | a movement response caging system |
RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025 | Braintree Scientific | RPT 040 | use for catheter |
Silicone cuff | Transonic | AAPC102 | skin button |
Surgical lubricant sterile bacteriostatic | Fougera | 0168-0205-36 | gell for flow probe |
Tergazyme | Alconox | protease contained anionic detergent | |
TS420 Perivascular Flow Module | Transonic | TS420 | perivascular flow module |
Vetbond | 3M | 1469SB | tissue adhesive |
WinDaq software | DATAQ | recording software |