يصف البروتوكول هنا طرق تقييم أنماط الاستعمار الفطري المفصلي والاستراتيجية في الجذور لنوعين: Zea mays و Festuca rubra. يسمح استخدام طريقة MycoPatt بحساب المعلمات ، وتحويل الهياكل الفطرية إلى بيانات رقمية ، ورسم خرائط لموقعها الحقيقي في الجذور.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
خرائط Mycorrhizal كأداة لاستكشاف أنماط الاستعمار والاستراتيجيات الفطرية في جذور Festuca rubra و Zea mays
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الفطريات الفطرية المفصلية هي متكافلات في جذور النباتات. ويتمثل دورها في الحفاظ على تنمية المضيف والحفاظ على التوازن الغذائي في النظم الإيكولوجية. تعتمد عملية الاستعمار على عدة عوامل مثل بيئة التربة ، والتنوع الجيني للفطريات والمضيف ، والممارسات الزراعية. يؤدي عملها المتزامن إلى تطوير شبكة واصلة معقدة ويؤدي إلى التطور الثانوي للحويصلات والمفصليات في الخلايا الجذرية. كان الهدف من هذا البحث هو تحليل كفاءة طريقة أنماط الميكوريزال (MycoPatt) لتحديد مواقع الهياكل الفطرية في جذور Festuca rubra و Zea mays. كان الهدف الآخر هو استكشاف استراتيجية الاستعمار الفطري كما كشفت عنها الخرائط الفطرية لكل نوع. يسمح الحصول على صور مجهرية متعددة وتجميعها بتقييم الاستعمار الفطري في كل من نباتات الذرة والبراز الأحمر لتوفير معلومات عن الوضع الواقعي للهياكل المتقدمة. تسلط أنماط الميكوريزال المرصودة الضوء على الكفاءة المتغيرة لكل نبات من حيث تطوير الروابط مع الفطريات التكافلية للتربة ، الناجمة عن العلاجات التطبيقية ومرحلة النمو. الخرائط التفصيلية Mycorrhizal التي تم الحصول عليها من خلال طريقة MycoPatt مفيدة للكشف المبكر عن كفاءة النبات في الاستحواذ التكافلي من التربة.
المقدمة
فطريات الميكوريزا المفصلية (AM) هي فئة من النباتات الداخلية التي تنقلها التربة والتي تعد باستمرار مجالا لاهتمام الباحثين. وجودها في جذور معظم النباتات ومشاركتها في دورات المغذيات يجعلها مكونات حيوية في استقرار كل نظام بيئي حيث توجد النباتات العشبية 1,2. من خلال الميسيليوم خارج الجذر ، يعمل AM كامتداد فطري لجذور النباتات ، خاصة في المناطق التي يصعب الوصول إليها3. النشاط الرئيسي هو في جذور النباتات المضيفة ، حيث تقوم AM بتطوير شبكات hyphae كبيرة وهياكل محددة داخل الخلايا تسمى arbuscules. يسمح عدم وجود خصوصية للمضيف للتكافل باستعمار أنواع متعددة في نفس الوقت. توفر هذه القدرة ل AM دور تخصيص....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. اختيار المواد البيولوجية ، وأخذ عينات الجذر ، والتخزين
- جمع الجذر الكامل للنباتات مع مجرفة (الشكل 1A) بشكل منفصل لكل متغير وتكرارها. إزالة بلطف ، باليد ، مجاميع التربة الكبيرة من الجذور. اغسل نظام الجذر بأكمله وقم بقياسه على مقياس بخلايا 1 سم × 1 سم (الشكل 1B). قطع الجذور بشكل منفصل لكل نبات ، ووضعها في كيس بلاستيكي.
- جمع جميع الجذور النظيفة من كل نبات في كيس بلاستيكي ، وجمع جميع العينات من متغير واحد في كيس واحد أكبر. اكتب على كل حقيبة اسم المرحلة / البديل وتاريخ أخذ العينات. قم بتخزين الجذور في ثلاجة أو فريزر عند درجة حرارة تتراوح بين -4 درجة مئوية و -20 درجة مئوية حتى ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
يوفر الاستخدام الصحيح لطريقة التكسير اللطيفة للجذور بعد إجراءات التلطيخ تفاصيل جيدة عن الهياكل الفطرية ، لكل من Zea mays (الشكل 8A-C) و Festuca rubra (الشكل 9A-E) ، والتباين الجيد بين الهياكل الفطرية والخلايا الجذرية ، وتأكيد اللوح بسبب اللون الأزرق. إذا فشلت إجراءات التطهير والتلطيخ في النجاح ، فمن الصعب سحق عينات الجذر ولا تظهر بوضوح هياكل الميكوريزال (ال.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الدراسات حول الاستعمار الفطري حيوية لتطوير استراتيجية جديدة في المجال الزراعي. إن قدرة النباتات المزروعة المتعددة على تكوين ارتباط تكافلي مع الميكوريزا المفصلية جعلتها مكونا مهما في التنمية المستدامة للنظام الإيكولوجي الزراعي والحفاظ على صحته16،17،18،19،20. وبالتالي ، هناك حاجة إلى فهم أفضل لآلية الاستعمار والاستراتيجيات الفطرية ، والتي توفر بيانات أساسية حول .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ويعلن صاحبا البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
تستخدم هذه الورقة البيانات الناتجة عن دراستين للدكتوراه في المجال المواضيعي "أنماط الذرة الفطرية المدفوعة بالمدخلات الزراعية" ، التي أجرتها فيكتوريا بوب مولدوفا ، و "حالة الميكوريزال وتطور الاستعمار في الأنواع المهيمنة في الأراضي العشبية الجبلية" ، التي أجرتها لاريسا كوركوز ، بتنسيق من الأستاذة الدكتورة روكسانا فيديكان.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| خل التفاح 5٪ | فابريكا دي كونسيرف رويريني S.R.L. | O?ET DE MERE | |
| Blue Ink | Pelikan | 4001 | https://www.pelikan.com/pulse/Pulsar/ro_RO.Store.displayStore.224848./cerneal%C4%83-4001-de-la-pelikan |
| غطاء زلات | Menzel-Glaser | D 263 M | https://si.vwr.com/store/product/20545757/cover-glasses-menzel-glaser |
| ملقط ، PMP | Vitalab | 9.171 411 | http://shop.llg.de/info881_Forceps_PMP_lang_UK.< / > HTM؟ UID = 55005bf838d8000000000000 & امبير; OFS = 33 |
| جرة زجاجية 47 مل | بطاقات نيلي | BORCAN 47 مل أكياس تصفيح https://indigo.com.ro/borcan-47-ml-hexagonal سداسية | |
| الخوخ | PP525-08 | بطاقة عمل (60 × 90 مم) / https://supremoffice.ro/folie-laminare-60x90mm-125mic-carte-vizita-100-top-peach-pp525-08-510328 | |
| Microflow من الفئة الثانية ABS خزانة | Bioquell UK Ltd | Microflow Class II ABS مجلس الوزراء | http://www.laboratoryanalysis.co.uk/graphics/products/034_11%20CLASS%202BSC%20(STD).pdf |
| المجهر | دلطالب | D100001 | https://distrimed.ro/lame-microscop-matuite-la-un-capat-26x76-mm-deltalab/?utm_source=Google%20Shopping&utm_campaign= google٪20shopping٪20distrimed& utm_medium = CPC & utm_term = 1647 & gclid = CjwKCAjwu YWSBhByEiwAKd_n_odzr8CaCXQ hl9VQkAB3p-ODo2Ssuou9cnoRtz1Gb xsjqPY7F05HmhoCj6oQAvD_BwE |
| Microsoft Office 365 | Office 365 | Excel و Powerpoint ؛ جدول البيانات والعرض التقديمي | |
| NaOH | Oltchim | 01-2119457892-27-0065 | http://www.sodacaustica.com.ro/pdf/fisa-tehnica-soda-caustica.pdf |
| قفازات النتريل | SemperGuard | 816780637 | https://www.sigmaaldrich.com/RO/en/product/aldrich/816780637?gclid=CjwKCAjwuYWSBhByEiwAKd _n_rmo4RRt8zBql7ul8ox AAYhwhxuXHWZcw4hlR x0Iro_4IyVt69aFHRoCmd wQAvD_BwE |
| كاميرا | Optika OPTIKA | CP-8 ؛ كاميرا P8 Pro ، 8.3 ميجابكسل CMOS ، USB 3.0 | https://www.optikamicroscopes.com/optikamicroscopes/product/c-p-series/ |
| Optika Microscope | OPTIKA | B383pL | https://www.optikamicroscopes.com/optikamicroscopes/product/b-380-series/ |
| قناع واقي FFP3 | Hermes | هدية HERMES000100 | EN 149-2001 + A1: 2009 / https://www.emag.ro/set-10-masti-de-protectie-respiratorie-hermes-gift-ffp3-5-straturi-albe-hermes000100/pd/DTZ8CXMBM/#specification-section |
| مشرط | 9409814 | https://shop.thgeyer-lab.com/erp/catalog/search/search.action;jsessionid=C258CA 663588CD1CBE65BF 100F85241B?model.query=9409809 | |
| خل النبيذ الأبيض 9٪ | FABRICA DE CONSERVE RAURENI S.R.L. | O?ET DE VIN ALB |
المراجع
- Trivedi, P., Leach, J. E., Tringe, S. G., Sa, T., Singh, B. K. Plant-microbiome interactions: From community assembly to plant health. Nature Reviews Microbiology. 18 (11), 607-621 (2020).
- Jeffries, P., Barea, J. M. 4 Arbuscular Mycorrhiza: A Key Component of Sustainable Plant-Soil Ecosystems. The Myco....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
