Méthodologie pour tester les agents de contrôle et les insecticides contre l’agrile du café Hypothenemus hampei
Summary
Une méthode utilisant des fruits de café vert (GF) a été développée pour tester la toxicité des insecticides contre l’agrile du café (CBB). Des insecticides ou des substances toxiques ont été appliqués sur des GF désinfectés avant ou après l’infestation de CBB. La mortalité, la répulsion et la capacité de reproduction des insectes, en plus d’autres paramètres, ont été évaluées.
Abstract
Avant de recommander des insecticides pour traiter l’agrile du café (CBB) Hypothenemus hampei, il est utile de connaître la mortalité et la répulsion de ces insecticides contre les insectes adultes ou leur impact sur la production reproductive. Cependant, les méthodes actuellement disponibles évaluent uniquement la mortalité adulte, ce qui limite la sélection de nouveaux insecticides ayant un mode d’action différent. Dans ce travail, différentes méthodes expérimentales ont été examinées pour identifier les divers effets sur le CBB dans des conditions de laboratoire. Pour cela, les fruits du café vert (GF) ont été collectés et désinfectés par immersion dans une solution d’hypochlorite de sodium suivie d’une irradiation par la lumière UV. En parallèle, les adultes CBB d’une colonie ont été désinfectés par immersion dans une solution d’hypochlorite de sodium. Pour évaluer la protection des fruits (préinfestation), les fruits ont été placés dans des boîtes en plastique et les insecticides ont été appliqués. Ensuite, les adultes CBB ont été libérés à un taux de deux CBC par GF. Les GF ont été laissés dans des conditions contrôlées pour évaluer l’infestation de CBB et la survie après 1, 7, 15 et 21 jours. Pour évaluer l’efficacité de l’insecticide après une infestation de CBB (post-infestation), des adultes de CBB ont été relâchés dans les GF dans un rapport de 2:1 pendant 3 h à 21 °C. Les fruits infestés montrant des adultes CBB avec leur abdomen partiellement exposé ont été sélectionnés et placés dans des grilles de 96 puits, et les CBC forant dans les fruits ont été traités directement. Après 20 jours, les fruits ont été disséqués et les étapes biologiques CBB à l’intérieur de chaque fruit ont été enregistrées. Les GF ont servi de substrats qui imitent les conditions naturelles pour évaluer les insecticides toxiques, chimiques et biologiques contre le CBB.
Introduction
L’agrile des baies de café (CBB), Hypothenemus hampei, a été détecté pour la première fois en 1988 en Colombie et est depuis devenu l’espèce de ravageur la plus importante de la culture du café. Les femelles CBB quittent le fruit natal déjà fécondé, à la recherche de nouveaux fruits guidés par les produits chimiques volatils qu’elles émettent 1,2. Un cycle complet est accompli dans les 23 jours3 à une température de 25 °C. Le cycle commence avec la femelle fondatrice pénétrant dans la graine et pondant des œufs dans l’endosperme du fruit. Les larves écloses mangent la graine. Si les fruits sont disséqués à ce stade, il serait possible d’observer à la fois la femelle fondatrice et sa progéniture. Après 14 jours, les larves deviennent des nymphes – généralement, le stade des nymphes dure 5 jours. Au stade adulte, les femelles copulent avec leurs frères et sœurs, et les femelles nouvellement fécondées s’envolent loin des fruits endommagés à la recherche de nouveaux fruits de café pour commencer un nouveau cycle4.
Le processus de pénétration et le résultat de l’alimentation larvaire endommagent la graine de café, diminuant la qualité de la boisson au café et réduisant considérablement les revenus; une infestation supérieure à 5 % dans les plantations de café est généralement considérée comme le seuil économique.
La lutte contre la CBB est fondée sur une stratégie de lutte intégrée contre les ravageurs (LAI), y compris la lutte culturelle et les pratiques agronomiques, les agents biologiques naturels et l’utilisation d’insecticides chimiques, ce qui nécessite des conditions de sécurité et une application en temps opportun4.
Pour évaluer de nouveaux insecticides pour la lutte contre le CBB, des méthodologies peu coûteuses sont nécessaires pour permettre d’obtenir des résultats rapides. Des procédures de laboratoire et de terrain sont actuellement utilisées, y compris des régimes artificiels contenant du café dans lesquels les insecticides sont incorporés 5,6, ou la pulvérisation des insecticides sur du café parchemin sec 7,8,9. En outre, des expériences menées sur le terrain à l’aide de branches de café recouvertes de manchons entomologiques ont été rapportées10,11; cependant, ces méthodes nécessitent un travail intense et de longues périodes d’évaluation.
Une condition ressemblant aux conditions naturelles du champ, qui est également rapide et peu coûteuse, est l’utilisation de fruits de café verts ou mûrs. Cependant, ces fruits doivent être maintenus dans des conditions propices au développement du CBB, en évitant les altérations et les contaminants par les micro-organismes pour maintenir leur qualité et leurs propriétés. À cette fin, différents désinfectants ont été utilisés, ainsi que des procédures impliquant la chaleur et le rayonnement 7,9,12,13,14,15,16.
De plus, les méthodes d’évaluation des insecticides par rapport au CBB nécessitent des simulations de femelles adultes volant à la recherche de fruits ou pénétrant dans ces fruits17,18. Pour cela, des infestations artificielles de fruits ont été effectuées sur le terrain 8,11,19, bien que ce processus nécessite beaucoup de main-d’œuvre et dépende des conditions environnementales.
Nous décrivons ici une méthodologie normalisée pour l’évaluation des produits qui peuvent avoir des effets différents sur le CBB dans des conditions environnementales contrôlées qui ressemblent à des conditions de terrain.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dans ce protocole, la désinfection des fruits ainsi que des insectes sont des étapes critiques. Lorsque les fruits des champs sont utilisés en laboratoire, ils présentent fréquemment une contamination et une déshydratation élevées, car des micro-organismes et des acariens sont présents dans l’épiderme 7,15,16. Par conséquent, l’utilisation de fruits ou d’insectes qui ne sont pas désinfectés entraînera la mort…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs expriment leurs remerciements à la Fédération nationale des producteurs de café de Colombie, aux assistants du Département d’entomologie (Diana Marcela Giraldo, Gloria Patricia Naranjo), à la station expérimentale Naranjal et à Jhon Félix Trejos.
Materials
| Beaker with spout, low form 500 mL | BRAND PP | BR87826 | |
| Benchtop Shaker | New Brunswick Scientific Innova 4000 Incubator Shaker | ||
| Dishwashing liquid soap-AXION | Colgate-Palmolive | AXION | |
| Hood; Horizontal Laminar Flow Station | Terra Universal | Powder-Coated Steel, 1930 mm W x 1118 mm D x 1619 mm H, 120 V (https://www.terrauniversal.com/hood-horizontal-laminar-flow-station-9620-64a.html) | |
| Insects CBB | BIOCAFE | (http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html). | |
| Multi Fold White paper towels | Familia | 73551 | |
| Preval Spray unit | Preval Merck | Z365556-1KT | https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/z365556?gclid=Cj0KCQiAweaNBhDEARIsAJ 5hwbfZOy1TWGj6huatFtRQt AzOyHe5-oBiKnOUK2T1exuuk WwJLdvxkvsaAjoYEALw_wcB |
| Reversible Racks 96-Well | heathrowscientific | HEA2345A | https://www.heathrowscientific.com/reversible-racks-96-well-i-hea2345a |
| Scalpel blades N 11 | Merck | S2771-100EA | |
| Scalpel handles N3 | Merck | S2896-1EA | |
| Sodium Hypochloride | The clorox company | Clorox | |
| Stereo Microscope | Zeiss | Stemi 508 | https://www.zeiss.com/microscopy/int/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-508.html |
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