हृदय रोगों के लिए बड़े पशु मॉडल में विच्छेदन तकनीक और हृदय का हिस्टोलॉजिकल नमूनाकरण
Summary
जटिल शरीर रचना विज्ञान के कारण, हृदय के नमूनों के लिए लगातार प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य विच्छेदन और कटाई प्रोटोकॉल को लागू करना चुनौतीपूर्ण हो सकता है। यह पांडुलिपि कुछ मानक कार्डियक विच्छेदन प्रोटोकॉल के प्रमुख तत्वों को प्रस्तुत करती है, जो सकल परीक्षा दृष्टिकोण और आमतौर पर हिस्टोपैथोलॉजिकल परीक्षा के लिए उपयोग की जाने वाली नमूना साइटों दोनों पर प्रकाश डालती है।
Abstract
मानक सकल परीक्षा और नमूनाकरण बड़े जानवरों में किए गए कार्डियोवैस्कुलर रोगों के प्रयोगात्मक अध्ययनों की प्रजनन क्षमता और सफलता में महत्वपूर्ण तत्व हैं। हृदय की जटिल शारीरिक रचना, अंतर-प्रजाति मतभेदों और प्रतिपूरक और पैथोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं के प्रकारों को ध्यान में रखते हुए, लगातार प्रोटोकॉल को लागू करना चुनौतीपूर्ण है। कई विच्छेदन प्रोटोकॉल का उपयोग आमतौर पर प्रोसेक्टर के अनुभव के अनुरूप अनुकूलित किया जाता है, और व्यक्तिगत वरीयता प्रयोगात्मक और इंटरऑब्जर्वर परिवर्तनशीलता का स्रोत बनी हुई है। यहां, उद्देश्य कार्डियोवैस्कुलर बीमारियों के मॉडल के रूप में कुछ सामान्य रूप से इस्तेमाल की जाने वाली प्रजातियों (कुत्तों, सूअरों, जुगाली करने वालों और बिल्लियों सहित) में हृदय की मुख्य शारीरिक विशेषताओं और स्थलों, विच्छेदन प्रोटोकॉल और हिस्टोलॉजिकल नमूना मानकों को प्रस्तुत करना है।
दो मानक सकल परीक्षा प्रोटोकॉल यहां प्रस्तुत किए गए हैं। सबसे पहले, इनफ्लो-आउटफ्लो विधि, जो हृदय और बड़ी वाहिकाओं (अक्सर कुत्तों, जुगाली करने वालों और सूअरों में उपयोग की जाती है) के माध्यम से शारीरिक रक्त प्रवाह दिशा का पालन करती है, और दूसरा, चार-कक्ष विच्छेदन तकनीक (बिल्लियों में उदाहरण)। दोनों तकनीकों को कुछ प्रयोगात्मक परिस्थितियों में किसी भी प्रजाति के लिए अनुकूलित किया जा सकता है। नमूना प्रोटोकॉल में रुचि के सभी क्षेत्र शामिल हैं (सिनोएट्रियल नोड, वेंट्रिकल्स, इंटरवेंट्रिकुलर सेप्टम, एट्रिया, वाल्व और महाधमनी), और यदि ठीक से किया जाता है, तो प्रयोगात्मक अध्ययनों की प्रजनन क्षमता और विश्वसनीयता दोनों में सुधार करें।
Introduction
जटिल शरीर रचना विज्ञान और प्रारंभिक कठोरता के कारण, जो हृदय की दीवार की मोटाई का आकलन करने में हस्तक्षेप कर सकता है, हृदय की सकल परीक्षा चुनौतीपूर्ण है और कई तकनीक से संबंधित या व्याख्या त्रुटियों से ग्रस्त है। यह अंतर-विशिष्ट रूपात्मक विविधताओं और इस तथ्य से प्रवर्धित होता है कि कई नैदानिक, प्रमुख हृदय रोग (कोरोनरी हृदय रोगों, फाइब्रोसिस, धमनीशोथ और एमाइलॉयडोसिस के शुरुआती मामलों सहित) किसी भी सकल परिवर्तन से जुड़े नहीं हैं, संक्षेप में, हिस्टोलॉजिकल विकृति। एक मानकीकृत विच्छेदन और हिस्टोलॉजिकल नमूना कटाई प्रोटोकॉल पर्यवेक्षकों के बीच स्थिरता ला सकता है और साथ ही, कार्डियोवैस्कुलर बीमारियों के प्रयोगात्मक अध्ययनों की तुलनात्मकता और प्रजनन क्षमता ला सकता है।
नमूने दो कुत्तों (कैनिस ल्यूपस परिचित) (एक 3 वर्षीय, नर फ्रेंच बुलडॉग, और 8 वर्षीय, मादा मिश्रित नस्ल), एक बिल्ली (फेलिस कैटस) (एक 6 वर्षीय, पुरुष यूरोपीय शॉर्टहेयर), एक घरेलू सुअर (सुस स्क्रोफा डोमेस्टिकस) (एक 1 वर्षीय, नर लार्ज व्हाइट), और एक गाय (बोसटॉरस) (2 महीने की, मादा होलस्टीन) से एकत्र किए गए थे। चुनी गई प्रजातियों में से प्रत्येक का एक अलग बीमारी के लिए कार्डियोवैस्कुलर मॉडल के रूप में विशेष उपयोग है; उदाहरण के लिए, कुत्ते अतालता मॉडलिंग के लिए एक पसंदीदा मॉडल हैं; बिल्लियों को हाइपरट्रॉफिक कार्डियोमायोपैथी (एचसीएम) के लिए पसंद किया जाता है, क्योंकि यह एचसीएम के उच्चतम प्रसार वाली प्रजाति है; सूअरों का उपयोग तीव्र मायोकार्डियल रोधगलन के लिए एक मॉडल के रूप में किया जाता है; और जुगाली करने वालों का उपयोग विषाक्त पदार्थों के संपर्क में आने के कारण नशे के लिए एक मॉडल के रूप में किया जाता है जो घास के मैदान11 पर आसानी से पाए जा सकते हैं।
इस पांडुलिपि में, एक नेक्रोपसी प्रोटोकॉल और हृदय के दो विच्छेदन प्रोटोकॉल प्रस्तुत किए गए हैं, जिन्हें प्रयोगात्मक हृदय रोगों में हृदय की सकल और हिस्टोलॉजिकल परीक्षा में सुधार करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। वर्णित प्रोटोकॉल पशु चिकित्सा पाठ्यपुस्तकों 1,2,4,5,6,7,8,9,10,11,12, जर्नल साहित्य 3,13,14, आधिकारिक दस्तावेज 15 और वेबिनार 16 से जानकारी के आधार पर विकसित किए गए थे , 17. इस अध्ययन में उपयोग किए गए नमूने नियमित ऑटोप्सी निदान के लिए यूएसएएमवी क्लुज-नेपोका के पैथोलॉजी विभाग को प्रस्तुत शवों से निकाले गए थे।
Protocol
Representative Results
Discussion
वर्तमान प्रोटोकॉल का प्रदर्शन करते समय, लगातार परिणामों के लिए कई महत्वपूर्ण चरणों पर सावधानीपूर्वक विचार किया जाना चाहिए। युवा जानवरों में, हृदय माप वयस्कों (वेंट्रिकुलर दीवार मोटाई सहित) से अलग हो?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
कोई नहीं।
Materials
| 0.9% saline solution | B. BRAUN MELSUNGEN AG | W04479004 | For washing all the blood, and blood clots from the heart. |
| 10% neutral buffered formalin (NBF) | Q Path | 11699404 | Materials for collecting histopathology samples. |
| Bone cutting forceps | HELEN SRL | LS109HV | Sturdy instrument for cutting bone. |
| Cutting board | Ambition | 86304 | For an easier manipulation, and cutting the organs. |
| Decalcifying solution | Thermo Scientific TBD-2 | 6764004 | 1:1 mixture of 8% formic acid and hydrochloric acid. |
| Digital camera | Canon Inc. | PowerShot SX540 HS | For photographic, and videographic documentation. |
| Forceps | MKD-Medicale | 15-430 | Dissection instruments. |
| Histological cassettes | Q Path | 720-2215 | Materials for collecting histopathology samples. Dimensions: 3 × 2.5 × 0.4 cm |
| Knife | TEHNO FOOD COM SERV SRL | D2006/15 | Sharp blade for cutting soft tissue. |
| Latex gloves | MKD-Medicale | SANTEX-S | Protection equipment. |
| Mask | MKD-Medicale | 21221 | Protection equipment. |
| Petri dishes | MKD-Medicale | 0598-1V | Materials for collecting ancillary testing samples. |
| Plastic recipients | Corning Gosselin | TP200-02 | Materials for collecting histopathology samples. |
| Scale | ESPERANZA | MEEKS008 | For weighing the organs. |
| Scale | White Deals | 72 | For weighing the subjects. |
| Scalpel | MKD-Medicale | 10322E | Sharp blade for cutting soft tissue. |
| Scissors | MKD-Medicale | 13-260 | Dissection instruments. |
| Scrub | MKD-Medicale | 410100-52 | Protection equipment. |
| Syringes | MKD-Medicale | 10573EU | Materials for collecting ancillary testing samples. |
References
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