पॉलीप बेल-आउट तीव्र तनाव से प्रेरित एक प्रक्रिया है, जिसमें कोरल पॉलीप्स ऊतक को अपनी कॉलोनी से जोड़ते हैं और व्यक्तियों के रूप में रहने के लिए इससे अलग हो जाते हैं। वर्तमान प्रोटोकॉल बताता है कि हाइपरसेलिन या कैल्शियम मुक्त समुद्री जल उपचार का उपयोग करके बेल-आउट द्वारा कोरल माइक्रोप्रोपेगेशन को कैसे प्रेरित किया जाए।
कोरल औपनिवेशिक जानवर हैं जो मॉड्यूलर इकाइयों द्वारा गठित होते हैं जिन्हें पॉलीप्स कहा जाता है। कोरल पॉलीप्स शारीरिक रूप से जुड़े होते हैं और ऊतक से जुड़े होते हैं। पॉलीप बेल-आउट की घटना तीव्र तनाव से प्रेरित एक प्रक्रिया है, जिसमें कोरल पॉलीप्स ऊतक को कॉलोनी के बाकी हिस्सों से जोड़ते हैं और अंततः अलग-अलग व्यक्तियों के रूप में रहने के लिए कंकाल से अलग हो जाते हैं। कोरल जीवविज्ञानियों ने वर्षों से पॉलीप बेल-आउट की प्रक्रिया को स्वीकार किया है, लेकिन हाल ही में इस प्रक्रिया द्वारा उत्पन्न माइक्रोप्रोपेगेट्स को कोरल जीव विज्ञान अध्ययन के लिए एक मॉडल प्रणाली के रूप में मान्यता दी गई है। पॉलीप बेल-आउट का उपयोग एक एकल मूंगा टुकड़े से उच्च संख्या में क्लोनल इकाइयां बना सकता है। एक और लाभ यह है कि पॉलीप्स के एकल पॉलीप्स या पैच को माइक्रोस्कोप के तहत आसानी से देखा जा सकता है और पेट्री डिश, फ्लास्क और माइक्रोफ्लुइडिक चिप्स जैसे अत्यधिक मानकीकृत कम लागत वाले वातावरण में बनाए रखा जा सकता है। वर्तमान प्रोटोकॉल लंबे समय तक जीवित एकल पॉलीप्स को बनाए रखने के लिए कोरल माइक्रोप्रोपेगेशन और विभिन्न दृष्टिकोणों को प्रेरित करने में सक्षम प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तरीकों को प्रदर्शित करता है। यह पद्धति बेल-आउट के बाद 8 सप्ताह तक कोरल प्रजातियों पोसिलोपोरा वेरुकोसा के पॉलीप्स की सफलतापूर्वक खेती करने में सक्षम थी, जो कोरल अनुसंधान के लिए व्यक्तिगत कोरल पॉलीप्स का उपयोग करने की व्यावहारिकता का प्रदर्शन करती है।
स्क्लेरैक्टिनियन या रीफ-बिल्डिंग कोरल कार्बोनेट कंकाल बनाने, चट्टानों को बनाने और संरचनात्मक रूप से जटिल पारिस्थितिक तंत्र बनाने में सक्षम हैं जो गहरे से उथले पानी के वातावरण तक पाए जा सकते हैं1. उष्णकटिबंधीय प्रवाल भित्तियां उच्च जैव विविधता की मेजबानी करती हैं और आवश्यक पारिस्थितिकी तंत्र सेवाएं प्रदान करती हैं, जैसे कि तटीय संरक्षण और मत्स्य पालन रखरखाव2. अधिकांश उथले-पानी की चट्टान-निर्माण कोरल परिवार के शैवाल के साथ पारस्परिक संबंध पर भरोसा करते हैं सिम्बायोडिनियासी, जो ऊर्जा प्रदान करते हैं जो कोरल को अपने कंकाल बनाने के लिए आवश्यक है। मूंगा और शैवाल के बीच सहजीवन पर्यावरणीय तनाव से टूट सकता है, जिससे मूंगा विरंजन 3,4,5,6 हो सकता है। हाल के तापमान विसंगतियों ने दुनिया भर में प्रमुख प्रवाल विरंजन घटनाओं का कारण बना है, जिससे बड़े पैमाने पर प्रवाल मृत्यु दर और स्थायी चट्टान गिरावट 7,8,9,10,11 हो गई है। चूंकि यह घटना पोस्ट हीट स्ट्रेस-जुड़े सेलुलर तंत्र, जैसे एपोप्टोसिस, ऑटोफैगी और एक्सोसाइटोसिस द्वारा सहजीवन के निष्कासन पर आधारित है, कोरल विरंजन को एक सेलुलर प्रक्रिया के रूप में वर्णित किया जा सकता है जिसमें पारिस्थितिकी तंत्र-पैमाने के परिणाम 5,6,12 होते हैं, जिसका अर्थ है कि कोरल कोशिकाओं या ऊतकों की इन विट्रो संस्कृतियों में होना इस घटना का बारीकी से अध्ययन करने के लिए लागू होगा।
प्रवाल भित्तियों के महत्व और प्रमुख खतरों के कारण वे सामना कर रहे हैं, विशेष रूप से पिछले दो दशकों में2, कोरल दुनिया भर में सुरक्षा और बहाली उद्देश्यों के लिए अनुसंधान का केंद्र बन गए हैं13. हालांकि, दृष्टिकोण और प्रयोगात्मक प्रणालियों का विकास जो विश्वसनीय, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य हैं, और कोरल का अध्ययन करने के लिए न्यूनतम पर्यावरणीय प्रभाव प्रदान करते हैं, इस क्षेत्र में एक बड़ा संघर्ष है।
माइक्रोप्रोपेगेशन को नियंत्रित जहाजों14,15 में अपनी जैविक सामग्री को संवर्धन करके एक जीव के जीनोटाइप के इन विट्रो प्रसार के रूप में परिभाषित किया गया है। हाल के दशकों में पौधे और पशु जीव विज्ञान के लिए कोशिकाओं, ऊतकों और अंगों की संवर्धन महत्वपूर्ण रही है। यह प्रयोगशालाओं में जीवों के बड़े पैमाने पर प्रजनन, विभिन्न उपचारों (जैसे दवाओं और फार्मास्यूटिकल्स) के तेजी से मूल्यांकन और सेल फ़ंक्शन 14,15,16,17 के प्रत्यक्ष अध्ययन की अनुमति देता है। सामान्य तौर पर, इन विट्रो मॉडल बेहतर नियंत्रित भौतिक और रासायनिक स्थितियों के तहत विभिन्न जीवों के अध्ययन को पूरक और गहरा करने के लिए उपयोगी रहे हैं। इन विट्रो संवर्धन तकनीकों के फायदों के कारण, विभिन्न पशु कोशिका और ऊतक संस्कृति प्रौद्योगिकियों को कई अनुसंधान क्षेत्रों में महत्वपूर्ण उपकरणों के रूप में विकसित, अनुकूलित और उपयोग किया गया है, जहां कई सेल लाइनों का अध्ययन और व्यावसायीकरण कई अनुप्रयोगों के लिए किया गया है 16,17,18।
सेल और टिशू कल्चर के ज्ञान में कई प्रगति 188217 में पहली पशु ऊतक संस्कृति के बाद से की गई है, जैसे कि प्राकृतिक और सिंथेटिक मीडिया का उपयोग, स्थापित सेल लाइनों का आविष्कार, और बेहतर तरीके से सेल प्रकारों की भीड़ की खेती करने के लिए 3 डी मीडिया का विकास16,17, 18,19. हालांकि, कोशिका जीव विज्ञान के क्षेत्र ने ज्यादातर मॉडल जीवों के एक चुनिंदा समूह पर ध्यान केंद्रित किया है, जबकि कई कर अभी भी कोशिकाओं, ऊतकों या अंगों की इन विट्रो संस्कृतियों में अच्छी तरह से स्थापित नहीं हैं20. उदाहरण के लिए, कोरल अनुसंधान में, अनुसंधान के लिए बड़े पैमाने पर कोई अमर सेल लाइनों का उपयोग नहीं किया गया है, जो प्राथमिक सेल संस्कृतियों के उपयोग के लिए कोरल सेल अनुसंधान को बाधित करता है। इन संस्कृतियों की व्यवहार्यता कुछ हफ्तों 21 तक सीमित है,जिसमें 2021 22 की शुरुआत तक 13 दिनों से अधिक समय तक सभी प्रवाल ऊतकों से व्यक्तिगत कोशिकाओं के अस्तित्व को रिकॉर्ड करने वाला कोई अध्ययन नहींहै। प्रकाशित होने वाली टिकाऊ मूंगा सेल लाइनों की पहली रिपोर्ट एक्रोपोरा टेनुइस कोशिकाओं के साथ थी जो 6 महीने तक जीवित रहती थीं, और भविष्य के अनुसंधान के लिए इन कोशिकाओं की उपयोगिता का पता लगाया जाना बाकी है।
मूंगा कोशिका संस्कृतियों की संवर्धन में सीमाओं को दूर करने और एक प्रयोगशाला संस्कृति को बनाए रखने के लिए जो कोरल के समग्र ऊतक संगठन को संरक्षित करता है, पृथक पॉलीप्स का उपयोग हाल ही में कोरल जीव विज्ञान अनुसंधान24,25 के लिए एक मॉडल के रूप में प्रस्तावित किया गया है। पॉलीप्स कोरल की शारीरिक इकाइयाँ हैं, और उनमें से प्रत्येक का मुंह उनकी मौखिक डिस्क के केंद्र में स्थित है और अपने एबोरल क्षेत्र26 में कोनोसार्क द्वारा अन्य पॉलीप्स से जुड़ा हुआ है। लाइव पॉलीप्स का पृथक्करण पॉलीप बेल-आउट की प्रक्रिया से स्वाभाविक रूप से होता है, जिसमें तीव्र तनाव पॉलीप्स के बीच कोनोसार्क के पाचन का कारण बनता है, जो तब कॉलोनी के कंकाल25,27,28 से अलग हो सकता है। इस घटना को विभिन्न प्रकार के करों में होने की सूचना मिली है, जिसमें ऑक्टोकोरल29,30,31, काले कोरल32, और स्क्लेरैक्टिनियन कोरल 25,27,28,32,33 शामिल हैं, और कई पर्यावरणीय तनावों से जुड़ा हुआ है, जैसे कि पानी में कैल्शियम की कमी 24,34, अम्लतामें वृद्धि 35, हाइपरोस्मोटिक स्थितियां 25,27,32,36, उच्च तापमान36,37, भुखमरी33, वायु जोखिम25,30 और कीटनाशक संदूषण28,38। पॉलीप बेल-आउट, उदाहरण के लिए, पोसिलोपोरिड कोरल19 में रिपोर्ट किया गया है, जो दुनिया भर में व्यापक रूप से वितरित किए जाते हैं और आमतौर पर कोरल अनुसंधान में मॉडल के रूप में उपयोग किए जाते हैं। इस समूह से संबंधित प्रजातियां, जैसे कि पोसिलोपोरा डेमिकॉर्निस और स्टाइलोफोरा पिस्टिलाटा, ने 5 मिमी टुकड़े25 से लगभग 30-40 माइक्रोप्रोपेगेट उत्पन्न किए हैं। यह संख्या कोरल माइक्रोप्रोपेगेशन के लिए एक विधि के रूप में पॉलीप बेल-आउट का उपयोग करने के लाभ पर जोर देती है, क्योंकि यह मूंगा के एक छोटे से टुकड़े से कई आनुवंशिक रूप से समान व्यक्तियों को उत्पन्न करने की संभावना पैदा करती है। अनुसंधान के लिए पृथक पॉलीप्स के उपयोग में नियंत्रित प्रयोगशाला वातावरण, जैसे फ्लास्क और पेट्री व्यंजनों में सुसंस्कृत होने की संभावना के बारे में सेल संस्कृतियों के समान फायदे हैं। इसके अतिरिक्त, लाइव पॉलीप्स को बनाए रखने के लिए माइक्रोफ्लुइडिक प्लेटफार्मों ने प्रदर्शित किया है कि इन माइक्रोप्रोपेगेट्स को नियंत्रित जल प्रवाह, सतह और तापमान24,25 के साथ अपेक्षाकृत सस्ते और आसानी से पुन: उत्पन्न वातावरण में रखा जा सकता है। इन माइक्रोफ्लुइडिक्स प्लेटफार्मों का उपयोग माइक्रोस्कोप के तहत सीधे24,25 के तहत जीवित प्रवाल संरचनाओं की कल्पना करने के लिए भी किया जा सकता है।
वर्तमान लेख में, हम उन तकनीकों को संक्षेप में प्रस्तुत और प्रदर्शित करते हैं जिन्हें उनकी कॉलोनियों से व्यक्तिगत प्रवाल पॉलीप्स को अलग करने के लिए विकसित किया गया है, यह दिखाते हुए कि उन्हें दीर्घकालिक संस्कृति के लिए प्रयोगशाला स्थितियों में कैसे बनाए रखा जाए। चर्चा की गई विधियों में वाष्पीकरण और उच्च लवणता वाले समुद्री जल को पंप करके हाइपरोस्मोटिक स्थितियों के माध्यम से पॉलीप बेल-आउट और कैल्शियम मुक्त समुद्री जल में इनक्यूबेशन शामिल हैं।
बेल-आउट प्रक्रियाओं में प्रस्तुत किए जाने के बाद पॉलीप्स जीवित रहने की दर और प्रक्रिया को पूरा करने के लिए आवश्यक समय पहले से रिपोर्ट किए गए शोध 25,33,41 के बीच भिन्न होता है, जिसे संभवतः प्रत्येक अध्ययन में लागू विभिन्न प्रयोगात्मक दृष्टिकोणों द्वारा समझाया गया है। उदाहरण के लिए, विभिन्न प्रवाल प्रजातियां, या यहां तक कि एक ही प्रजाति के कोरल, लेकिन विभिन्न पर्यावरणीय परिस्थितियों (जैसे, लाल सागर से कोरल) के आदी, लवणता के स्तर के लिए अलग-अलग थ्रेसहोल्ड प्रस्तुत करते हैं। चयनित बेल-आउट की विधि और प्रयोगशाला / मछलीघर की स्थिति भी परिणामों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है। कुछ मामलों में, प्रयोगशाला स्थितियों के तहत कोरल माइक्रोप्रोपेगेट्स के रखरखाव ने एज़ोक्सैंथेलेट 3 3,41 और ज़ोक्सैंथेलेट25 कोरल में जीवित रहने के महीनों तक पहुंचकर कोरल सेल संस्कृतियों के अस्तित्व के समय को पार कर लिया है। पॉलीप बेल-आउट प्रक्रिया को पूरा करने का समय भी विभिन्न अध्ययनों में भिन्न होता है, कुछघंटों 2 5,2 7,30 से लेकर सप्ताह3 5 तक इनक्यूबेशन बेल-आउट पैदा करने के लिए जिम्मेदार तनाव के संपर्क में आते हैं। पॉलीप बेल-आउट का अध्ययन करते समय ध्यान में रखा जाने वाला एक और चर तीव्र तनाव के संपर्क में आने के बाद पॉलीप्स की वसूली है जिसने उनकी रिहाई को ट्रिगर किया। यह अभी भी बहस का विषय है कि क्या बेल-आउट के बाद पॉलीप्स कोरल जीव विज्ञान का अध्ययन करने के लिए मॉडल के रूप में उपयोग किए जाने के लिए पर्याप्त स्थिति में हैं। इन माइक्रोप्रोपेगेट्स का उपयोग करते समय कोनोसार्क के क्षरण के बाद उनके ऊतकों की वसूली चिंता का विषय है। हालांकि, वर्तमान सहित कई अध्ययनों में पॉलीप्स, अपने ऊतकों और बाहरी आकृति विज्ञान के अंदर ज़ोक्सांथेला कोशिकाओं को बरकरार मौखिक-अबोरल ध्रुवीकरण और 25,27,32,36 के बाद टेंटकल्स के साथ पेश करने में सक्षम रहे हैं। पिछले अध्ययनों में यह भी पाया गया है कि, तीव्र तनाव से राहत मिलने के बाद, अत्यधिक खारा या गर्म समुद्री जल के संपर्क में आने वाले प्रवाल पॉलीप्स एपोप्टोसिस, प्रोटियोलिसिस और कोशिका विभाजन जैसी प्रक्रियाओं से संबंधित जीन की अभिव्यक्ति को पुनर्प्राप्त करने में सक्षम हैं, जो बेल-आउट32,36 से पहले पाए गए स्तरों के समान हैं और यहां तक कि ऊतक उपचार 36 से संबंधित जीन की अभिव्यक्ति को बढ़ाने के लिए भी।
विधियों के बीच अस्तित्व में अंतर के संबंध में, यह उजागर करना महत्वपूर्ण है कि यह समय विभिन्न प्रयोगों के बीच भिन्न हो सकता है, भले ही एक ही तकनीक का उपयोग किया जाता है, और यह उपयोग किए गए टुकड़ों के स्वास्थ्य और बेल-आउट प्रक्रिया के बाद पॉलीप्स के उचित रखरखाव से संबंधित हो सकता है। कैल्शियम मुक्त समुद्री जल इनक्यूबेशन के माध्यम से बेल-आउट के मामले में, पॉलीप अस्तित्व 1 दिन तक सीमित था। इस प्रकार, यह निष्कर्ष निकाला जा सकता है कि विधि अध्ययन की गई प्रजातियों के दीर्घकालिक अस्तित्व के लिए अच्छी तरह से अनुकूल नहीं है, या लाल सागर से पी वेरुकोसा कोरल के लिए तकनीक का बेहतर अनुकूलन किया जाना चाहिए। रिपोर्ट किए गए परिणामों से पता चला कि लवणता में क्रमिक वृद्धि के आधार पर विधियों के साथ लंबे समय तक जीवित रहने का समय प्राप्त किया गया था, जब पॉलीप्स को उच्च लवणता वाले पानी के टपकने के अधीन किया गया था। यह विधि वाष्पीकरण विधि की तुलना में लवणता में अधिक नियंत्रित वृद्धि प्रदान कर सकती है, साथ ही मूंगा के चयापचय अपशिष्ट सहित समुद्री जल में पाए जाने वाले अन्य पदार्थों की एकाग्रता में वृद्धि के लिए जिम्मेदार नहीं है, जो जीव के लिए संभावित रूप से विषाक्त है। इन सभी कारणों से, इस पद्धति को स्वस्थ पॉलीप्स27 को बनाए रखने के लिए एक सुरक्षित विकल्प के रूप में सुझाया गया है। यद्यपि इस पद्धति को पॉलीप स्वास्थ्य के लिए सुरक्षित होने की परिकल्पना की गई है और लंबे समय तक रहने वाले पॉलीप्स का उत्पादन करने में सक्षम है, एक तथ्य जो इस वर्तमान प्रकाशन में पुष्टि की गई थी, इसकी पुष्टि करने के लिए अतिरिक्त सर्वेक्षणों की आवश्यकता है। दोनों उच्च लवणता-प्रेरित बेल-आउट प्रयोगों ने 24 घंटे में लवणता 59 पीएसयू तक पहुंचने के बाद पॉलीप्स की एक पूरी टुकड़ी का प्रदर्शन किया। यदि लवणता उस स्तर से आगे बढ़ जाती है जिस पर बेल-आउट पूरा हो जाता है, तो पॉलीप्स को और तनाव होगा, जिससे तीव्र तनाव उपचार से बचने और ठीक होने की संभावना कम हो जाएगी। इसलिए, इस तरह के लवणता के स्तर में पॉलीप्स को लंबे समय तक बनाए रखने की सिफारिश नहीं की जाती है। कैल्शियम मुक्त समुद्री जल के संपर्क में आकर बेल-आउट प्रेरण विधि का प्रदर्शन करते समय, कैल्शियम मुक्त कृत्रिम समुद्री जल में 3 घंटे के इनक्यूबेशन से एक पूर्ण टुकड़ी प्राप्त की गई थी, जिसका अर्थ है कि इस माध्यम के आगे के संपर्क की भी सिफारिश नहीं की जाती है।
इन विट्रो सर्वेक्षणों में कोरल पॉलीप्स के अध्ययन के लिए अधिक पर्याप्त तरीकों को संबोधित करने के लिए, इस अध्ययन ने केवल तीन प्रक्रियाओं पर ध्यान केंद्रित किया, जिन्हें बेल-आउट प्रक्रिया को पूरा होने में लगभग 24 घंटे लगे और उन अध्ययनों में उपयोग किया गया जिनमें स्क्लेरैक्टिनियन कोरल से कोरल पॉलीप्स का दीर्घकालिक रखरखाव शामिल था। इस समय की तुलना में काफी अधिक समय लेने के लिए रिपोर्ट किए गए अन्य तरीकों को व्यस्त नहीं किया गया था। इस अध्ययन में एक सब्सट्रेट के लिए पॉलीप्स के निपटान का प्रयास नहीं किया गया था, जो पॉलीप्स के उत्पादन पर केंद्रित था जिसे विभिन्न वातावरणों में स्थानांतरित किया जा सकता था या डिस्पोजेबल पिपेट का उपयोग करके विश्लेषण के लिए आसानी से एकत्र किया जा सकता था। परिणाम बताते हैं कि कोरल प्रजातियों से पॉलीप्स पी वेरुकोसा को जीवित रखा गया था, संबंधित ज़ोक्सांथेला कोशिकाओं, स्वस्थ दृश्य स्थिति और एक संरक्षित सकल बाहरी शारीरिक संरचना के साथ, 8 सप्ताह तक, यहां तक कि सब्सट्रेट से लगाव के बिना भी। इन परिणामों से संकेत मिलता है कि इस अध्ययन में प्रदर्शित कुछ तकनीकों का उपयोग करके एकल मूंगा टुकड़ों से अधिक जैविक प्रतिकृतियां उत्पन्न की जा सकती हैं। इस तरह के जैविक प्रतिकृतियों को नियंत्रित वातावरण (जैसे पेट्री डिश और सेल फ्लास्क) में रखा जा सकता है और महीने भर के प्रयोगों के लिए प्रयोगशाला स्थितियों में बनाए रखा जा सकता है और कई उद्देश्यों के लिए उपयोग किया जा सकता है।
पॉलीप बेल-आउट42,43 के पहले आकस्मिक विवरणों के बाद से, पॉलीप रिलीज को प्रेरित करने और ऐसे पॉलीप्स को जीवित रखने के लिए अधिक मानकीकृत तरीकों को खोजने के लिए नए प्रोटोकॉल स्थापित किए गए हैं, जिनका उपयोग भविष्य के अनुसंधान अनुप्रयोगों के लिए किया जा सकता है। इनमें कोरल होलोबियंट फिजियोलॉजी44 और होस्ट-माइक्रोबायोम इंटरैक्शन45 से जुड़े विभिन्न पहलुओं की जांच करना, कोरल ब्लीचिंग5,25 में शामिल आणविक तंत्र, और कोरल होलोबियंट 12,13,46,47 के स्वास्थ्य, लचीलापन और सुरक्षा शामिल हैं। . इसके अलावा, जारी किए गए कोरल पॉलीप्स का उपयोग अनुसंधान के दायरे के बाहर अनुप्रयोगों के लिए किया जा सकता है और प्रोपेग्यूल बनाने के लिए उपयोगी होने का सुझाव दिया गया है जो एक सब्सट्रेट से जुड़ सकते हैं और बढ़ सकते हैं, संभावित रूप से कई कोरल व्यक्तियों का निर्माण कर सकते हैं जिनका उपयोग बहाली उद्देश्यों के लिए किया जा सकता है एक बार बेल-आउट के लिए मानकीकृत प्रोटोकॉल व्यापक हो जाते हैं28 . कुल मिलाकर, हालांकि पद्धति को मानकीकृत करने के लिए बेल-आउट पॉलीप्स का उपयोग करके अधिक गहराई से प्रयोग किए जाने चाहिए, यह दिखाया गया है कि पॉलीप बेल-आउट एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य दृष्टिकोण है जिसे कई उद्देश्यों के लिए मूंगा अनुसंधान में एक उपकरण के रूप में लागू किया जा सकता है।
The authors have nothing to disclose.
हम प्रवाल पॉलीप्स के प्रयोगों और निगरानी में उनके समर्थन के लिए एडम बार्नो और फ्रांसिस्का गार्सिया को धन्यवाद देते हैं। हम मछलीघर रखरखाव और बुनियादी ढांचे के बारे में उनकी सहायता के लिए केएयूएसटी तटीय और समुद्री संसाधन कोर लैब को भी धन्यवाद देते हैं। अध्ययन को केएयूएसटी अनुदान संख्या बीएएस / 1/ 1095-01-01 द्वारा वित्त पोषित किया गया था।
5560 Conductivity/Temperature Probe | YSI | 5560 | Conductivity probe used with the ProQuatro Multiparameter meter |
Ace 5 in. Alloy Steel Diagonal Pliers | Ace Hardware | 2004083 | Used to cut coral fragments |
Ampicillin sodium salt | Sigma-Aldrich | A9518 | Used in DMEM medium. |
DMEM (1x) Dulbecco's Modified Eagle Medium | Gibco | 41965-039 | Used for incubating coral fragments in the calcium-free polyp bail-out method |
Fisherbrand Petri Dish, Stackable Lid 60 mm x 15 mm Sterile, Polystyrene | Thermo Fisher Scientific | FB0875713A | Petri dish used for bail-out by evaporstion and for keeping polyps inside an aquarium. |
Heizer Titanrohr Heizstab SW MW 600 Watt | Schego | 548 | Heaters used in aquarium |
Leica Application Suite Version 4.2 | Leica Microsystems | NA | Software used for image capture in demonstrative results |
Leica IC80 HD | Leica Microsystems | 12730216 | Camera used to take demonstrative results pictures |
Leica MDG33 | Leica Microsystems | 10 450 123 | Stereoscope stand used to take demonstrative results pictures |
Leica Z6 APO | Leica Microsystems | NA | Macroscope used to take demonstrative results pictures |
Magnesium Chloride | Thermo Fisher Scientific | 7487-88-9 | Used for preparing calcium-free artificial seawater. |
Magnesium Sulfate Anhydrous | Sigma-Aldrich | 7791-18-6 | Used for preparing calcium-free artificial seawater. |
Masterflex I/P Easy-Load Pump Head for Precision Tubing, White PPS Housing, SS Rotor | Masterflex | HV-77602-10 | Peristaltic pump head. |
Masterflex L/S Precision Modular Drives with Benchtop Controller | Masterflex | EW-07557-00 | Peristaltic pump drive used for pumping high salinity seawater. Can be substituted for any peristaltic pump capable of mainaining water flow as described in protocol. |
Masterflex L/S Precision Pump Tubing, Platinum-Cured Silicone, L/S 16; 25 ft | Masterflex | HV-96410-16 | Tubing for peristaltic pump. |
Millex 33 mm PVDF 0.22 µm Sterile RUO | Sigma-Aldrich | SLGVR33RS | Used to filter artificial sea water. |
Nunc EasYFlask 75 cm2 Nunclon Delta Surface | Thermo Fisher Scientific | 156499 | Flask usually used for cell culture used for polyp culture. |
Orbital shaker, Advanced 5000, VWR | VWR | 444-2916 | Shaker used inside incubator. |
Percival Incubator – I-22VL | Percival | NA | Incubator used for maintaing corals kept in cell flasks. |
Plankton net 200 µm mesh size | KC Denmark | NA | Used for covering petri dishes containing coral polyps. |
Potassium Chloride | VWR Chemicals | 7447-40-7 | Used for preparing calcium-free artificial seawater. |
ProQuatro Multiparameter Meter | YSI | 606950 | Used for measuring salinity thoughout the protocol |
RADION XR15 G5 PRO | Ecotech | NA | Lights used in aquarium |
Red Sea Salt Premium grade, moderate Alkalinity |
Red Sea | NA | Used to prepare 40 PSU artifical sea water. |
Sodium Bicarbonate | Sigma-Aldrich | 144-55-8 | Used for preparing calcium-free artificial seawater. |
Sodium Chloride | Sigma-Aldrich | S3014 | Used for preparing calcium-free artificial seawater. |
Sodium Sulfate Anhydrous | VWR Chemicals | 7757-82-6 | Used for preparing calcium-free artificial seawater. |
TRD 112 thermostat | Schego | NA | Thermostat used in aquarium |
Turbelle Nanostream 6025 | Tunze | 6025 000 | Pumps used in aquarium |