यूरोकिनेज-टाइप प्लास्मिनोजेन एक्टिवेटर-प्रेरित माउस बैक पेन मॉडल
Summary
चूहों में पीठ दर्द मॉडल के सरल, तेजी से प्रेरण के तरीके यहां मूत्र प्लास्मिनोजेन एक्टिवेटर के इंट्रालिगामेंट इंजेक्शन का उपयोग करके प्रदान किए गए हैं।
Abstract
पीठ के निचले हिस्से में दर्द को जारी रखने का एक मॉडल यहां वर्णित सरल पद्धति के साथ चूहों में प्रेरित किया जा सकता है। चूहों में एक लगातार पीठ दर्द मॉडल के सरल, तेजी से प्रेरण के लिए चरण-दर-चरण विधियां यहां यूरोकिनेज-प्रकार प्लास्मिनोजेन एक्टिवेटर (यूरोकिनेज), मनुष्यों और अन्य जानवरों में मौजूद एक सेरीन प्रोटीज के इंजेक्शन का उपयोग करके प्रदान की जाती हैं। चूहों में पीठ के निचले हिस्से में लगातार दर्द को शामिल करने की पद्धति में काठ का रीढ़ के लिगामेंटस सम्मिलन क्षेत्र के साथ यूरोकाइनेज का एक सरल इंजेक्शन शामिल है। यूरोकिनेज भड़काऊ एजेंट प्लास्मिनोजेन को प्लास्मिन में सक्रिय करता है। आमतौर पर, मॉडल को 10 मिनट के भीतर प्रेरित किया जा सकता है और अतिसंवेदनशीलता कम से कम 8 सप्ताह तक बनी रहती है।
अतिसंवेदनशीलता, चाल की गड़बड़ी, और अन्य मानक चिंता- और अवसाद जैसे उपायों का परीक्षण लगातार मॉडल में किया जा सकता है। पीठ दर्द दर्द का सबसे प्रचलित प्रकार है। पीठ दर्द के बारे में जागरूकता में सुधार करने के लिए, इंटरनेशनल एसोसिएशन फॉर द स्टडी ऑफ पेन (IASP) ने 2021 को “पीठ दर्द के बारे में वैश्विक वर्ष” और 2022 को “अभ्यास के लिए दर्द ज्ञान का अनुवाद करने के लिए वैश्विक वर्ष” नाम दिया। दर्द चिकित्सा विज्ञान की चिकित्सीय प्रगति की एक सीमा लगातार और पुराने दर्द के परीक्षण के लिए उपयुक्त मॉडल की कमी है। इस मॉडल की विशेषताएं पीठ दर्द और इसकी सहायक विशेषताओं को कम करने के उद्देश्य से संभावित चिकित्सीय परीक्षण के लिए उपयुक्त हैं, जो IASP के नामकरण 2022 को दर्द ज्ञान को अभ्यास में अनुवाद करने के लिए वैश्विक वर्ष के रूप में योगदान देती हैं।
Introduction
कम पीठ दर्द विकलांगता के सबसे आम कारणों में से एक है, दुनिया भर में 5 में से 1 व्यक्ति पीड़ितहै। इन प्रयासों के बावजूद, पीठ दर्द के कुछ विश्वसनीय पशु मॉडल लोकप्रिय रूप से दर्द क्षेत्र में पशु अनुसंधान में उपयोग किए जाते हैं, खासकर चूहों में। पिछले मॉडलों ने लगभग विशेष रूप से पुरानी पीठ दर्द (सीबीपी) को शामिल करने के लिए चूहों का उपयोग किया है जैसे कि काठ का पहलू संयुक्त 2,3 में मूत्र प्लास्मिनोजेन एक्टिवेटर (यूपीए) के इंजेक्शन से प्रेरित, ट्रंक पेस्कुलचर4 में तंत्रिका विकास कारक (एनजीएफ) का इंजेक्शन, या मोनोसोडियम आयोडोसेटेट (एमआईए) 5 या इंटरल्यूकिन -1बीटा6 इंट्रावर्टेब्रल डिस्क में इंजेक्शन। बेशक, चूहों को इन मॉडलों के लिए मुख्य रूप से उनके बड़े आकार और भड़काऊ एजेंटों के इंजेक्शन के लिए पहुंच में आसानी के कारण पसंद किया जाता है।
स्पष्ट होने के लिए, पीठ दर्द के माउस मॉडल मौजूद हैं जैसे कि कई वर्षों सेउपयोग किए जाने वाले इंटरवर्टेब्रल-डिस्क डिजनरेशन के एसपीएआरसी-नल माउस मॉडल, लेकिन ये इंजेक्शन-आधारित मॉडल की तुलना में स्थापित करने के लिए अधिक महंगा और समय लेने वाले हैं। हाल ही में एक माउस अध्ययन ऊर्ध्वाधर पुरानी संयम तनाव8 के साथ कम पीठ की मांसपेशियों में एनजीएफ इंजेक्शन के संयोजन से पीठ के निचले हिस्से में दर्द का एक मॉडल स्थापित किया. निम्नलिखित प्रोटोकॉल में, हमने चूहों2 के लिए चूहों से यूपीए-प्रेरित सीबीपी मॉडल को अनुकूलित किया है। अतिसंवेदनशीलता 1 सप्ताह के भीतर स्थापित होती है और 6-8 सप्ताह तक बनी रहती है। इसके अलावा, हम स्थापित करते हैं कि चूहों में चिंता और अवसाद जैसे व्यवहार विकसित होते हैं। पीठ दर्द की व्यापकता और आणविक दर्द अनुसंधान में चूहों के अधिक सामान्य उपयोग को देखते हुए, यह टिकाऊ मॉडल पीठ दर्द से राहत के लिए नई उपचार रणनीतियों के विकास में उपयोग के लिए आसानी से स्थापित किया गया है।
Protocol
Representative Results
Discussion
पुरानी पीठ दर्द का यह मॉडल प्रेरित करने के लिए सरल है, और 1 सप्ताह के भीतर स्थापित अतिसंवेदनशीलता 8 सप्ताह तक (और संभवतः उससे परे) तक रह सकती है। यह अन्य तीव्र मॉडल के विपरीत पुराने दर्द की स्थिति के सटीक अ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
अनुदान निधि NIH हील UG3 NS123958 द्वारा प्रदान की गई थी। आवास सुविधाओं का निरीक्षण किया गया और AAALAC द्वारा मान्यता प्राप्त की गई। जानवरों को पशु संसाधन केंद्र (एआरसी) आवास सुविधा में रखा गया था, जो प्रयोगशाला कर्मचारियों और प्रयोगशाला और पशु संसाधन विभाग (डीएलएआर) के कर्मचारियों द्वारा बनाए रखा गया था। व्यवहार परीक्षण के लिए प्रक्रियाएं अमेरिकन पेन सोसाइटी और इंटरनेशनल एसोसिएशन फॉर द स्टडी ऑफ पेन द्वारा अनुमोदित क्षेत्र में मानक तरीके हैं। इच्छामृत्यु की विधि अमेरिकन वेटरनरी मेडिकल एसोसिएशन के इच्छामृत्यु पर पैनल की सिफारिशों के अनुरूप है।
Materials
| Animals and Consumables | |||
| 70% ethanol | Local Source | ||
| BALB/c mice | Envigo | 20-25 g | |
| Cotton balls | Fisher Scientific | 19-090-702 | |
| Cotton-tipped applicators | Fisher Scientific | 19-062-616 | |
| Isoflurane inhalant anesthetic | MedVet | RXISO-250 | |
| Labeling tape | Fisher Scientific | NGFP7002 | |
| Nitrile exam gloves | Fisher Scientific | ||
| Oxygen tank | Local Source | ||
| Surgical drape, Steri-Drape Utility Sheet, Absorbent Prevention | VWR | 76246-788 | cut into 15 x 15 cm pieces |
| Tygon tubing with 3 mm inner diameter | Grainger | 22XH87 | |
| Equipment | |||
| #11 carbon steel scalpel blades | VWR | 21909-612 | |
| Anesthesia induction chamber | Summit Medical Equipment Company | AS-01-0530-LG | |
| Autoclave | Local Unit | ||
| Biology Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-30 | |
| Glass bead sterilizer Germinator 500 | VWR | 102095-946 | |
| IITC Life Sciences Series 8 Model PE34 Hot/Cold Plate Analgesia Meter | IITC | PE34 | |
| Integra Miltex cotton & dressing pliers | Safco Dental Supply | 66-317 | |
| OPTIKA CL31 double arm LED illuminator | New York Microscope Company | OPCL-31 | |
| Plantar Test System with InfraRed Emitter, i. e. Hargreaves Apparatus | Ugo Basile | 37370-001 and 37370-002 | |
| Scalpel Handle No. 3 | VWR | 25607-947 | |
| Small animal heating pad | Valley Vet Supply | 47375 | |
| Student Vannas spring scissors, straight blade | Fine Science Tools | 91500-09 | |
| Table top animal research portable anesthesia workstation “PAM” | Patterson Scientific | AS-01-0007 | |
| Von Frey Filaments | Ugo Basile | 37450-275 |
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