Den nåværende protokollen beskriver optimalisering av eksperimentelle parametere ved bruk av transesophageal atrial pacing for å vurdere atrieflimmer følsomhet hos mus.
Musemodeller av genetiske og ervervede risikofaktorer for atrieflimmer (AF) har vist seg verdifulle for å undersøke molekylære determinanter for AF. Programmert elektrisk stimulering kan utføres ved hjelp av transesophageal atrial pacing som en overlevelsesprosedyre, og muliggjør dermed seriell testing i samme dyr. Imidlertid finnes det mange pacing-protokoller, noe som kompliserer reproduserbarheten. Denne protokollen tar sikte på å gi en standardisert strategi for å utvikle modellspesifikke eksperimentelle parametere for å forbedre reproduserbarheten mellom studier. Foreløpige studier utføres for å optimalisere eksperimentelle metoder for den spesifikke modellen som undersøkes, inkludert alder på tidspunktet for studien, kjønn og parametere i pacing-protokollen (f.eks. Modus for pacing og definisjon av AF-følsomhet). Det er viktig at det tas hensyn til å unngå høye stimulusenergier, da dette kan forårsake stimulering av ganglionisk plexi med utilsiktet parasympatisk aktivering, manifestert av overdrevet atrioventrikulær (AV) blokk under pacing og ofte forbundet med kunstig AF-induksjon. Dyr som demonstrerer denne komplikasjonen må utelukkes fra analysen.
Atrieflimmer (AF) representerer en endelig felles vei for flere ervervede og genetiske risikofaktorer. For studier som undersøker de patofysiologiske mekanismene til AF-substratet, er musemodeller fordelaktige gitt den enkle genetiske manipulasjonen og det faktum at de generelt reproduserer AF-følsomheten observert hos mennesker for forskjellige kliniske fenotyper 1,2,3. Imidlertid utvikler mus sjelden spontan AF4, noe som nødvendiggjør bruk av provoserende atrielle pacingstudier.
Programmert elektrisk stimulering (PES) kan utføres for å vurdere murine atriell elektrofysiologi og AF-følsomhet ved bruk av enten intrakardiell5 eller transesophageal6 pacing. Mens transesophageal tilnærming er spesielt fordelaktig som en overlevelsesprosedyre, er bruken komplisert av de mange publiserte eksperimentelle protokollene 7,8 og kilder til variabilitet som kan hindre reproduserbarhet9. Videre gjør begrensede rapporterte protokollsammenligninger det utfordrende å velge en passende pacing-protokoll.
Den nåværende protokollen tar sikte på å bruke en systematisk strategi for å utvikle modellspesifikke transesophageal PES-metoder for å vurdere murine AF-følsomhet for å øke reproduserbarheten. Det er viktig at innledende pilotstudier utføres for å optimalisere pacing-protokollen ved å ta hensyn til variasjon i alder, kjønn og pacing-modus, med pacing designet for å minimere utilsiktet parasympatisk stimulering som kan forvirre resultatene9.
Transesophageal atrial pacing tillater ikke bare serielle studier i samme dyr, men varigheten er vanligvis kortere enn intrakardiale studier (~ 20 min), og minimerer dermed bedøvelsesbruk og dens effekter på elektrofysiologiske parametere.
Det er avgjørende å optimalisere metodene først for hver enkelt musemodell. Aldring øker AF-induserbarheten hos normale mus18,19, og individuelle genetiske modeller kan demonstrere AF-induserb…
The authors have nothing to disclose.
Figur 2 ble opprettet med BioRender.com. Dette arbeidet ble støttet av tilskudd fra National Heart, Lung, and Blood Institute ved National Institutes of Health (HL096844 og HL133127); American Heart Association (2160035, 18SFRN34230125 og 903918 [MBM]); og National Center for Advancing Translational Sciences ved National Institute of Health (UL1 TR000445).
27 G ECG electrodes | ADInstruments | MLA1204 | |
2-F octapolar electrode catheter | NuMED | CIBercath | |
Activated carbon canister | VetEquip | 931401 | |
Analysis software | ADInstruments | LabChart v8.1.13 | |
Biological amplifier | ADInstruments | FE231 | |
Data acquisition hardware | ADInstruments | PowerLab 26T | |
Eye ointment | MWI Veterinary | NC1886507 | |
Heating pad | Braintree Scientific | DPIP | |
Isoflurane | Piramal | 66794-017-25 | |
Stimulator | Bloom Associates | DTU-210 | |
Stimulus Isolator | World Precision Instruments | Model A365 |