Summary

इंट्राऑपरेटिव पैराथायरायड ग्लैंड इमेजिंग के लिए एक सरल और प्रभावी चूहा मॉडल की स्थापना

Published: August 17, 2022
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Summary

आज तक, पैराथायरायड ग्रंथि (पीजी) पहचान विधियों का विकास प्रीक्लिनिकल अनुसंधान में पशु मॉडल की कमी से सीमित है। यहां, हम इंट्राऑपरेटिव पीजी इमेजिंग के लिए एक सरल और प्रभावी चूहा मॉडल स्थापित करते हैं और एक नए पीजी कंट्रास्ट एजेंट के रूप में आयरन ऑक्साइड नैनोकणों का उपयोग करके इसकी प्रभावशीलता का मूल्यांकन करते हैं।

Abstract

पैराथायरायड ग्रंथि (पीजी) की पहचान थायरॉयडेक्टोमी में एक महत्वपूर्ण अपूर्ण आवश्यकता है। थायराइड सर्जरी में पीजी की पहचान चुनौतीपूर्ण है क्योंकि यह थायरॉयड ग्रंथि के रंग के समान है। प्रीक्लिनिकल अनुसंधान में प्रभावी पशु मॉडल की कमी पीजी पहचान तकनीकों के विकास के लिए एक गंभीर सीमा है। यह प्रोटोकॉल पीजी पहचान के लिए एक सरल और प्रभावी चूहा मॉडल की स्थापना की अनुमति देता है। इस मॉडल में, काले लौह ऑक्साइड नैनोकणों (आईओएनपी) को थायरॉयड ग्रंथि में स्थानीय रूप से इंजेक्ट किया जाता है और थायरॉयड ग्रंथि के भीतर तेजी से फैलता है लेकिन पीजी नहीं। बाहरी माइक्रोस्कोप की आवश्यकता के बिना नग्न आंखों द्वारा एक नकारात्मक दाग वाले पीजी और एक सकारात्मक दाग वाली थायरॉयड ग्रंथि को आसानी से पहचाना जा सकता है। काले आईओएनपी के रंग के आधार पर थायरॉयड ग्रंथि और पीजी के बीच रंग कंट्रास्ट को बढ़ाकर पीजी की स्थिति की पहचान की जा सकती है। यह चूहा मॉडल पीजी पहचान के लिए कम लागत और सुविधाजनक है, और आईओएनपी एक नया पीजी कंट्रास्ट एजेंट है।

Introduction

पैराथायरायड ग्रंथि (पीजी) मनुष्यों और अन्य कशेरुकियों की गर्दन में स्थित छोटी, अंडाकार आकार की अंतःस्रावी ग्रंथियां हैं, जो रक्तऔर हड्डियों में कैल्शियम और फास्फोरस के स्तर को विनियमित और संतुलित करने के लिए पैराथायरायड हार्मोन का उत्पादन और स्राव करती हैं। मनुष्यों में आमतौर पर परिवर्तनीय स्थानों में थायरॉयड ग्रंथि लोब के पीछे स्थित पीजी के दो जोड़े होते हैं; मानव पीजी का आकार आमतौर पर 6 मिमी x 4 मिमी x 2 मिमी मापता है, जिसका वजन लगभग 35-40 मिलीग्राम2 होता है। पीजी को हटाने या क्षतिग्रस्त करने से हाइपोपैराथायरायडिज्म (एचपी) होता है, एक अंतःस्रावी विकार जो हाइपोकैल्सीमिया और पैराथायरायड हार्मोन के निम्न या अज्ञात स्तर की विशेषता है, जो ऐंठन जैसी ऐंठन से लेकर विकृत दांतों से लेकर क्रोनिक किडनी रोगों तक लक्षणों की एक विस्तृत श्रृंखला का कारण बनता है। इनमें से कुछ जटिलताएं घातक हैं (जैसे, दिल की विफलता और दौरे) 3,4,5; इस प्रकार, पीजी शरीर के चयापचय को विनियमित करने और जीवन को बनाए रखने में आवश्यक है।

एचपी पूर्ववर्ती गर्दन की सर्जरी के बाद सबसे आम जटिलताओं में से एक है, विशेष रूप से थायरॉयडेक्टोमी में, थायराइड कैंसर के लिए एक अच्छी तरह से स्थापित उपचारात्मक उपचार, जो दुनिया भर में सबसे आम अंतःस्रावी कैंसर है पोस्ट-थायराइडेक्टोमी एचपी मुख्य रूप से प्रत्यक्ष आघात, इस्केमिया, या सर्जरी में पीजी को हटाने के कारण होता है क्योंकि ऑपरेशन रूम में वास्तविक समय में थायरॉयड ग्रंथि लोब और आसपास के अन्य ऊतकों (जैसे, लिम्फ नोड्स और परिधीय वसा कणों) से पीजी को मज़बूती से भेदभाव करने की क्षमता की गंभीर कमी होती है। 2021 में, बैरियोस एट अल ने 1,114 थायरॉयडेक्टोमी मामलों के भीतर 22.4% की औसत पीजी मिस-सेक्शन दर की सूचना दी, और यहां तक कि अनुभवी सर्जन भी जिनके पास 7.7% की न्यूनतम त्रुटि दर थी। इस तरह की उच्च पीजी मिस-सेक्शन दरें अन्य समान रिपोर्ट 9,10,11 के अनुरूप हैं। इस प्रकार, गलत पैराथायरायडेक्टोमी क्षणिक और स्थायी पोस्टऑपरेटिव एचपी के लिए एक स्वतंत्र जोखिम कारक है।

प्रभावी इंट्राऑपरेटिव पीजी पहचान विधियों का विकास इस महत्वपूर्ण अपूर्ण चिकित्सा आवश्यकता को संबोधित करने की कुंजी रखता है; हालांकि, यह प्रीक्लिनिकल अनुसंधान में पशु मॉडल की कमी से गंभीर रूप से सीमित हो गया है। आज तक, अधिकांश इंट्राऑपरेटिव पीजी पहचान जांच मानव रोगियों और बड़े जानवरों (जैसे, कुत्तों) 12 पर की गई है, जो नैतिक अनुमोदन प्राप्त करने, विषय संख्या का विस्तार करने और दोहराए गए परीक्षणों के लिए महंगा और मुश्किल है। इस बीच, माउस, जैविक अनुसंधान में सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला कशेरुक मॉडल, 1 मिमी13 से कम के आकार के साथ बेहद छोटा पीजी है। इस सीमा के कारण, माउस पीजी मॉडल का उपयोग शायद ही कभी इंट्राऑपरेटिव पीजी पहचान अनुसंधान में किया गया है।

यह पेपर इंट्राऑपरेटिव पीजी पहचान अध्ययन के लिए एक सरल, सीधा और प्रभावी चूहा मॉडल की स्थापना की रिपोर्ट करता है। हमने थायरॉयडेक्टोमी सर्जरी में पीजी इमेजिंग कंट्रास्ट एजेंट, आईओएनपी के परीक्षण के लिए एक विश्वसनीय पशु मॉडल के रूप में किसी भी सर्जिकल संशोधन या आनुवंशिक इंजीनियरिंग के बिना देशी स्प्रैग-डॉवले (एसडी) चूहों के उपयोग की जांच की। यह चूहा मॉडल पीजी और आसपास के माइक्रोएन्वायरमेंट की एक अत्यधिक समान शारीरिक संरचना को मनुष्यों के समान प्रदर्शित करता है, और चूहे पीजी का आकार चूहों की तुलना में नेत्रहीन रूप से पता लगाने के लिए काफी बड़ा है। अधिकांश चूहों में थायरॉयड ग्रंथि के प्रत्येक तरफ एक पीजी होता है। थायराइडेक्टोमी सर्जरी में इंट्राऑपरेटिव आईओएनपी-एन्हांस्ड पीजी इमेजिंग करके इस चूहे के मॉडल की सादगी और प्रभावशीलता का प्रदर्शन किया गया है।

Protocol

सभी पशु अध्ययनों को इंस्टीट्यूट ऑफ बेसिक मेडिसिन एंड कैंसर, चाइनीज एकेडमी ऑफ साइंसेज के संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (आईएसीयूसी) द्वारा अनुमोदित किया गया है। यह एक गैर-जीवित सर्जरी है। <p c…

Representative Results

इस पशु मॉडल में, हमने श्वासनली, स्वरयंत्र और आसपास के ऊतकों को उजागर करने के लिए एक एसडी चूहे की गर्दन को शल्य चिकित्सा से संक्रमित किया। फिर, थायरॉयड ग्रंथि श्वासनली के दोनों किनारों पर नेत्रहीन रूप से…

Discussion

हम काले आईओएनपी का उपयोग करके चूहे पीजी की एक आईओएनपी-निर्देशित नकारात्मक इमेजिंग तकनीक का प्रदर्शन करते हैं, जिन्हें थायरॉयड ग्रंथि के केंद्र में स्थानीय रूप से इंजेक्ट किया गया था और थायरॉयड ग्रंथ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस अध्ययन को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (एनएसएफसी) (82172598), झेजियांग प्रांत, चीन के प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (एलजेड 22 एच 310001), झेजियांग प्रांत, चीन के स्वास्थ्य आयोग की 551 स्वास्थ्य प्रतिभा प्रशिक्षण परियोजना और झेजियांग प्रांत, चीन के चिकित्सा और स्वास्थ्य विज्ञान और प्रौद्योगिकी परियोजना (2021 केवाई 110) द्वारा समर्थित किया गया था।

Materials

alcohol Li feng 9400820067
anesthesia machine RWD Company R520IE Machine number
blade Daopian TB-JZ-10#
cylindrical pillow made by ourselves
depilatory cream Nair TMG-001
electronic scale Hong xingda CN-HXD2
eosin Thermo Fisher (Waltham, USA). C0105S-2
erythromycin Shuang ji (Beijing, China) 200409
gauze Fulanns YY0331-2006
heating pad Johon (ShenZhen,China) JH-36-2006
hematoxylin Thermo Fisher (Waltham, USA). C0105S-1
insulin injection needle Jiangyin NanquanMacromolecule 20170702
iodophor cotton ball HOYON 19-6007
iron oxide nanoparticle solution Zhongke Leiming Technology (Beijing, China) Mag9110-05
isoflurane Sigma Aldrich (St Louis USA). 21112801
needle holder Meijun MH0587
operation table BioJane BJ-P-M
paraformaldehyde solution Biosharp 21269333
rubber G-CLONE
XT41050
scanning machine Olympus Slideview VS200
surgical forceps Suping SPHC-0676
surgical knife handle Aladdin S3052-06-1EA
surgical retractor TOCYTO 18-4010
surgical scissors Suping SPHC-0795
surgical towel Along technology YCKJ-RJ-036205
suture Ethicon SA84G
suture with needle Jinhuan (Shanghai,China) F301
vascular forceps Along technology YCKJ-RJ-016218
Water Bath-Slide Drier Hua su (Jinhua, China) HS-1145

References

  1. Cope, O., Donaldson, G. A. Relation of thyroid and parathyroid glands to calcium and phosphorus metabolism. Study of a case with coexistent hypoparathyroidism and hyperthyroidism. The Journal of Clinical Investigation. 16 (3), 329-341 (1937).
  2. Mansberger, A. R., Wei, J. P. Surgical embryology and anatomy of the thyroid and parathyroid glands. Surgical Clinics of North America. 73 (4), 727-746 (1993).
  3. Koch, A., Hofbeck, M., Dorr, H. G., Singer, H. Hypocalcemia-induced heart failure as the initial symptom of hypoparathyroidism. Zeitschrift für Kardiologie. 88 (1), 10-13 (1999).
  4. Shoback, D. M., et al. Presentation of hypoparathyroidism: etiologies and clinical features. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 101 (6), 2300-2312 (2016).
  5. Arneiro, A. J., et al. Self-report of psychological symptoms in hypoparathyroidism patients on conventional therapy. Archives of Endocrinology Metabolism. 62 (3), 319-324 (2018).
  6. Olson, E., Wintheiser, G., Wolfe, K. M., Droessler, J., Silberstein, P. T. Epidemiology of thyroid cancer: a review of the national cancer database, 2000-2013. Cureus. 11 (2), 4127 (2019).
  7. Du, L., et al. Epidemiology of thyroid cancer: incidence and mortality in China, 2015. Frontiers in Oncology. 10, 1702 (2020).
  8. Barrios, L., et al. Incidental parathyroidectomy in thyroidectomy and central neck dissection. Surgery. 169 (5), 1145-1151 (2021).
  9. Sitges-Serra, A., et al. Inadvertent parathyroidectomy during total thyroidectomy and central neck dissection for papillary thyroid carcinoma. Surgery. 161 (3), 712-719 (2017).
  10. Sakorafas, G. H., et al. Incidental parathyroidectomy during thyroid surgery: an underappreciated complication of thyroidectomy. World Journal of Surgery. 29 (12), 1539-1543 (2005).
  11. Sahyouni, G., et al. Rate of incidental parathyroidectomy in a pediatric population. OTO Open. 5 (4), (2021).
  12. Erickson, A. K., et al. Incidence, survival time, and surgical treatment of parathyroid carcinomas in dogs: 100 cases (2010-2019). Journal of the American Veterinary Medical Association. 259 (11), 1309-1317 (2021).
  13. Bi, R., Fan, Y., Luo, E., Yuan, Q., Mannstadt, M. Two techniques to create hypoparathyroid mice: parathyroidectomy using GFP glands and diphtheria-toxin-mediated parathyroid ablation. Journal of Visualized Experiments. (121), e55010 (2017).
  14. Soulsby, S. N., Holland, M., Hudson, J. A., Behrend, E. N. Ultrasonographic evaluation of adrenal gland size compared to body weight in normal dogs. Veterinary Radiology & Ultrasound. 56 (3), 317-326 (2015).
  15. Zheng, W. H., et al. Biodegradable iron oxide nanoparticles for intraoperative parathyroid gland imaging in thyroidectomy. PNAS Nexus. 1 (3), 087 (2022).

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Cite This Article
Chen, F., Liu, C., Guo, P., Zheng, W. Establishment of a Simple and Effective Rat Model for Intraoperative Parathyroid Gland Imaging. J. Vis. Exp. (186), e64222, doi:10.3791/64222 (2022).

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