Method Article

TLC Plakasındaki Bileşiklerin Veriminin Mavi-LED Aydınlatma Tekniği ile Tahmin Edilmesi

DOI:

10.3791/64230

⸱

October 6th, 2022

 , 
1Department of Marine Biotechnology and Resources, National Sun Yat-sen University, 2Doctoral Degree Program in Marine Biotechnology, National Sun Yat-sen University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mevcut protokol, mavi-LED aydınlatma tekniğini kullanarak TLC plakasındaki bileşiklerin verimini tahmin etmek için bir yöntem geliştirdi. Bu yaklaşımın avantajları, güvenli, etkili, ucuz olması ve araştırmacının aynı anda birden fazla örneği ölçmesine izin vermesidir.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İnce tabaka kromatografisi (TLC), bilinmeyen numunelerin verimini ölçmek için organik kimya araştırmalarında yaygın olarak kullanılan erişilebilir bir analitik tekniktir. Bu çalışma, mavi-LED aydınlatıcıyı kullanarak bir TLC plakasındaki numunelerin verimini tahmin etmek için etkili, ucuz ve güvenli bir yöntem geliştirdi. Aspergillus terreus'tan ekstrakte edilen Lovastatin, bu çalışmada kullanılan örnek bileşiktir. Lovastatin verimini değerlendirmek için lovastatin standardına dayanan regresyon modelleri kullanılmıştır. Üç yöntem karşılaştırıldı: biyotahlil, UV algılama ve mavi-LED aydınlatma. Sonuç, mavi-LED aydınlatma yönteminin UV algılama ve biyotahlil yöntemlerinden önemli ölçüde daha fazla zaman etkili olduğunu göstermiştir. Ek olarak, mavi-LED aydınlatma, biyotahlil yöntemindeki biyolojik tehlikeler (örneğin, mikrobiyal enfeksiyon) ve UV algılama yönteminde ultraviyole maruziyeti endişesi nedeniyle nispeten güvenli bir seçenekti. GC, HPLC ve HPTLC gibi bağımsız olarak çalışmadan önce özel cihazlar ve uzun süreli eğitim gerektiren pahalı yöntemlerle karşılaştırıldığında, mavi-LED aydınlatıcıyı kullanmak, bir TLC plakasından numunelerin verimini tahmin etmek için ekonomik bir seçenekti.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İnce tabaka kromatografisi (TLC), organik kimya alanında kalitatif ve kantitatif bir teknik olarak yaygın olarak kullanılmaktadır 1,2,3. TLC'nin başlıca avantajları, hızlı algılama, esnek numune gereksinimleri sağlaması ve özel ekipman gerektirmemesidir4. Bugüne kadar, birçok gelişmiş yaklaşım oluşturulmuş olmasına rağmen, TLC hala bir karışımdaki bilinmeyen numuneleri tanımlamak için ana yöntemdir. Bununla birlikte, bu yaklaşımın zorluğu, özellikle sınırlı bütçeli laboratuvarlar geliştirmek için numune verimini ölçmek için güvenli ve ucuz ekipman eksi....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mevcut protokol örnek olarak lovastatin kullanılarak açıklanmıştır. Lovastatin, bir haftalık Aspergillus terreus'tan çıkarıldı.

1. Bileşik ekstraksiyon

NOT: Bileşik ekstraksiyonu ile ilgili ayrıntılar için lütfen Şekil 1'e bakınız.

  1. Kültür Aspergillus terreus patates dekstroz agar üzerinde (PDA, bakınız Malzeme Tablosu) 30 °C'de orta.
  2. Kültürü 24 saat boyunca 40 °C'de kurutun. Kurutulmuş kültürü sterilize cımbız kullanarak 50 mL'lik bir tüpe aktarın ve 15 mL etil asetat ekleyin.
  3. Karışımı 1 dakika boyunca....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışmada, bileşiklerin verimini tahmin etmek için mavi-LED aydınlatma yöntemi sunulmuş ve bu yöntem biyotahlil ve UV ile saptanan yöntemlerle doğrulanarak karşılaştırılmıştır (Tablo 1). Regresyon modelleri, numunelerin verimini tahmin etmek için sırasıyla üç yöntem için bantların boyutlarına ve standartların konsantrasyonuna dayanarak geliştirilmiştir. İlk olarak, biyotahlil yönteminin sonuçlarında, inhibisyon bölgesinin boyutları ile lovastatin standartları arasındaki R-karesi 0.99 idi ve örnek veri.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışmada, HPTLC, HPLC ve GC yöntemi gibi pahalı ve özel ekipman kullanmadan bileşikleri ölçmek için yeni bir yaklaşım olan mavi-LED aydınlatıcı tanımlanmıştır ve yöntem, nicelleştirme performansını değerlendirmek için biyotahlil ve UV tarafından tespit edilen yöntemlerle karşılaştırılmıştır. Sonuç olarak, mavi-LED aydınlatma yönteminin, TLC plakası üzerinde hedeflenen bileşiklerin verimini ölçmek için kullanılan nispeten güvenli ve etkili bir protokol olduğu sonucuna varılmıştır.

Önceki ça.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm yazarlar çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma Tayvan Bilim ve Teknoloji Bakanlığı (MOST 108-2320-B-110-007-MY3) tarafından desteklenmiştir.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Amerikan bakteriyolojik AgarCondalab1802.00
Aspergillus terreus  ATCC 20542
Mavi-LED aydınlatıcıMICROTEKBio-1000F
SantrifüjThermo Scientific HERAEUS Megafuge 8
Kompakt UV lambasıUVPUVGL-25
Etil AsetatMACRONMA-H078-10
Filtre Kağıdı 125mmADVANTEC60311102
ImageJNIHÜcretsizhttps://imagej.nih.gov/ij/download.html
Lovastatin standardıACROSA0404262
MiBio Fluo MICROTEKV1.04
n-HekzanC-ECHOHH3102-000000-72EC
OriginProOriginLab9.1https://www.originlab.com/origin
Patates dekstroz suyu HSTBIO MEDIA
110533 Döner buharlaştırıcıEYELASB-1000
Sülfürik asitFluka30743-2.5L-GL
TLC silika jel 60 F254MERCK1.05554.0001
Trifloroasetik asitAlfa Aesar10229873
Ultrasonik titreşim makinesiDELTADC600

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Pyka, A. Detection progress of selected drugs in TLC. BioMed Research International. 2014, 732078(2014).
  2. Hess, A. V. I. Digitally enhanced thin-layer chromatography: An inexpensive, new technique for qualitative and qua....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Thin Layer ChromatographyBlue LED IlluminationTLC Plate YieldLovastatin QuantificationRegression Model AnalysisBioassay MethodUV DetectionOrganic ExtractionSilica Gel ChromatographyNatural Products Chemistry

Related Articles