Articolo metodologico
Il presente protocollo illustra l'uso di componenti disponibili in commercio per generare un gradiente termico stabile e lineare. Tale gradiente può quindi essere utilizzato per determinare il limite termico superiore degli organismi planctonici, in particolare delle larve di invertebrati.
I limiti termici e l'ampiezza sono stati ampiamente utilizzati per prevedere la distribuzione delle specie. Mentre la temperatura globale continua a salire, capire come cambia il limite termico con l'acclimatazione e come varia tra le fasi della vita e le popolazioni è vitale per determinare la vulnerabilità delle specie al riscaldamento futuro. La maggior parte degli organismi marini ha cicli di vita complessi che includono i primi stadi planctonici. Mentre quantificare il limite termico di questi piccoli stadi iniziali di sviluppo (da decine a centinaia di micron) aiuta a identificare i colli di bottiglia dello sviluppo, questo processo può essere difficile a causa delle piccole dimensioni degli organismi bersaglio, del grande spazio richiesto al banco e degli elevati costi iniziali di fabbricazione. Qui viene presentata una configurazione orientata verso piccoli volumi (da ml a decine di ml). Questa configurazione combina componenti disponibili in commercio per generare un gradiente termico stabile e lineare. Vengono inoltre presentate le specifiche di produzione della configurazione, nonché le procedure per introdurre ed enumerare individui vivi rispetto a quelli morti e calcolare la temperatura letale.
La tolleranza termica è fondamentale per la sopravvivenza e la funzione degli organismi 1,2. Mentre il pianeta continua a riscaldarsi a causa delle emissioni antropogeniche di carbonio, viene prestata crescente attenzione alla determinazione e all'applicazione dei limiti termici3. Vari endpoint, come la mortalità, il mancato sviluppo e la perdita di mobilità, sono stati utilizzati per determinare i limiti termici superiori e inferiori4. Questi limiti termici sono spesso considerati un proxy per la nicchia termica di un organismo. Queste informazioni vengono a lor....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
1. Fabbricazione del blocco termico
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
L'obiettivo di questo protocollo è determinare il limite termico superiore dello zooplancton. Per fare ciò, è necessario un gradiente termico stabile e lineare. La configurazione proposta è stata in grado di generare un gradiente termico compreso tra 14 °C e 40 °C impostando la temperatura del bagno d'acqua a 8 °C e il riscaldatore a 39 °C (Figura 2A). Il gradiente di temperatura può essere ridotto e spostato modificando i valori finali. È stato inoltre generato un gradiente termico con un i.......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Questo protocollo fornisce un approccio accessibile e personalizzabile per determinare i limiti termici di piccoli organismi plancton attraverso l'esposizione termica acuta. Il design a 10 fori e i punti finali di temperatura flessibili, controllati dal bagno d'acqua all'estremità inferiore e dal riscaldatore all'estremità superiore, consentono di determinare LT50 con precisione. Utilizzando questo approccio, è stata rilevata una differenza nel limite termico di <1 °C (Figura 3). .......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Gli autori non hanno alcun conflitto di interessi da dichiarare.
Questo lavoro è supportato dal Faculty Research Fund dello Swarthmore College [KC] e dalla Robert Reynolds and Lucinda Lewis '70 Summer Research Fellowship per BJ.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 0,45 & micro; m filtro a membrana | VWR | 74300-042 | |
| ½ ” Lastra acrilica | McMaster-Carr | 8560K266 | Utilizzato per costruire una custodia rigata con isolamento sufficiente. |
| Siringa da 1 mL | VWR | 76290-420 | |
| canali 7 tipi di termocoppia Datalogger | Omega Engineering | HH506A | Può essere sostituito con qualsiasi termometro che si inserisce all'interno di una provetta per microcentrifuga |
| Pipetta automatica | Ranin | ||
| Riscaldatore a strisce con montaggio a bullone e morsetto con guaina in acciaio inossidabile 430, 120 V CA, 1-1/2" di larghezza, 100 W | McMaster-Carr | 3619K32 | |
| Crystal Sea Bioassay Mix | Pentair | CM2B | Utilizzare per rendere aritifical l'acqua di mare |
| Denraster excentricus | M-Rep | Dollari di sabbia dalla California | |
| Microscopio da dissezione | Nikon | SMZ645 | |
| Blocco di raffreddamento ad acqua in alluminio fai-da-te, sistema di dissipazione del calore del radiatore del radiatore della grafica del computer del computer per PC Testa endotermica Argento (40 mm x 120 mm x 12 mm) | Amazon | Si collega al bagno d'acqua e viene utilizzato per raffreddare un'estremità del blocco. | |
| Foglio di alluminio pressofuso MIC6 facile da lavorare 2" di spessore 8" x 8" | McMaster-Carr | 86825K953 | Lavorato a 2" x 6" x 8" con 60 fori equidistanti (11 mm di diametro, 42 mm di profondità) con due fori aggiuntivi praticati su un lato per le sonde del termostato. |
| Isolamento economico del tubo flessibile del polietilene espanso | McMaster-Carr | 4530K121 | Copre il tubo di plastica tra il refrigeratore e il blocco per ridurre la perdita di calore. Può essere omesso se l'intervallo di temperatura è vicino alla temperatura ambiente |
| EVERSECU 72w 110-240v Refrigeratore d'acqua per acquari Regolatore di temperatura per pesci Serbatoio per gamberetti Serbatoio della barriera corallina marina Refrigeratore per acquario inferiore a 20 L/30 L | Può essere utilizzato al posto del bagno d'acqua da laboratorio... | ||
| Esempio con dollaro larvale di sabbia | |||
| GENNEL 100 g Pasta grassa composta termoconduttiva siliconica argento per GPU CPU IC LED Forni Raffreddamento | Amazon | Migliora la conduttanza termica tra il blocco e gli elementi di riscaldamento e raffreddamento. | |
| Regolatore di temperatura per termostato per rettili WiFi Inkbird con 2 sonde e 2 uscite, termostato per tappetino riscaldante per rettili IPT-2CH (max 250 W per presa) | Amazon | monitora le estremità calde e fredde. Mantiene l'estremità calda nella gamma | |
| Lauda Ecoline Silver Termostati a circolazione raffreddati ad aria VWR | 89202-386 | Può essere sostituito con un refrigeratore per acquari | |
| Provette per microcentrifuga | VWR | 76019-014 | Se si utilizzano animali più grandi, le fiale di scanilazione (VWR 66022-004) sono una buona alternativa. |
| Filtro a rete in nitex | Fatto da sé | Colla a caldo usata per attaccare la rete Nitex al tubo in PVC da 1/2 " | |
| Pipetta Pasteur | VWR | 14673-010 | |
| Cloruro di potassio (0,35 M) | Millpore-Sigma | P3911-500G | |
| R. | Il progetto R per il calcolo | ||
| Ago per siringa | VWR | 89219-346 | A seconda delle dimensioni dell'organismo bersaglio, è possibile utilizzare i gague 14 e 16 |
| Tygon Tubing | McMaster-Carr | 5233K65 | Regolare in base al refrigeratore e al blocco utilizzati |
| Il reostato Zoo Med Repti Temp | Chewy.com | valutato fino a 150 W e ricablato per essere alimentato direttamente nell'elemento riscaldante. Utilizzato per controllare la velocità di produzione di calore |
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Richiedi il permesso di riutilizzare il testo o le figure di questo articolo JoVE
Richiedi permesso