यह प्रोटोकॉल एक कुशल और सस्ती विधि का वर्णन करता है जो वयस्क ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर की व्यवहार्यता पर रासायनिक विषाक्त पदार्थों के प्रभावों का आकलन करने के लिए तरल मीडिया का उपयोग करता है।
मानव उद्योग सैकड़ों हजारों रसायनों को उत्पन्न करते हैं, जिनमें से कई को पर्यावरणीय सुरक्षा या मानव स्वास्थ्य पर प्रभाव के लिए पर्याप्त रूप से अध्ययन नहीं किया गया है। रासायनिक सुरक्षा जानकारी की यह कमी स्तनधारियों में वर्तमान परीक्षण विधियों से बढ़ जाती है जो महंगी, श्रम-गहन और समय लेने वाली हैं। हाल ही में, वैज्ञानिक और नियामक रासायनिक सुरक्षा परीक्षण के लिए नई दृष्टिकोण पद्धतियों (एनएएम) को विकसित करने के लिए काम कर रहे हैं जो सस्ता, अधिक तेजी से और पशु पीड़ा को कम करते हैं। उभरने वाले प्रमुख एनएएम में से एक स्तनधारी मॉडल के प्रतिस्थापन के रूप में अकशेरुकी जीवों का उपयोग है ताकि मनुष्यों सहित दूर से संबंधित प्रजातियों में कार्रवाई के संरक्षित रासायनिक तरीकों को स्पष्ट किया जा सके। इन प्रयासों को आगे बढ़ाने के लिए, यहां, हम एक विधि का वर्णन करते हैं जो रासायनिक सुरक्षा का आकलन करने के लिए फल मक्खी, ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर का उपयोग करता है। प्रोटोकॉल उजागर वयस्क मक्खियों की व्यवहार्यता और भोजन व्यवहार को मापने के लिए एक सरल, तेज और सस्ती प्रक्रिया का वर्णन करता है। इसके अलावा, प्रोटोकॉल को जीनोमिक और मेटाबोलिक दृष्टिकोण के लिए नमूने उत्पन्न करने के लिए आसानी से अनुकूलित किया जा सकता है। कुल मिलाकर, प्रोटोकॉल सटीक विष विज्ञान में उपयोग के लिए एक मानक मॉडल के रूप में ड्रोसोफिला को स्थापित करने में एक महत्वपूर्ण कदम का प्रतिनिधित्व करता है।
मनुष्य लगातार विभिन्न स्रोतों से रसायनों के संपर्क में आते हैं, जिनमें हवा1, भोजन2, पानी3,4, दवाएं5, सफाई एजेंट6, व्यक्तिगत देखभाल उत्पाद 7, औद्योगिक रसायन 7, और निर्माण सामग्री 7 शामिल हैं। इसके अलावा,हर साल हजारों नए रसायनों को पेश किया जाता है, जिनमें से कई स्वास्थ्य और पर्यावरण सुरक्षा के लिए ठीक से जांच नहीं की जाती हैं। पर्याप्त रासायनिक सुरक्षा परीक्षण की यह कमी चूहों और चूहों जैसे स्तनधारी मॉडल पर अधिक निर्भरता से उपजी है। जबकि ऐसे कृंतक मॉडल जानकारीपूर्ण हैं, इन प्रणालियों में रासायनिक सुरक्षा परीक्षण महंगा, समय लेने वाला है, और अक्सर परीक्षण पशु9 के लिए पीड़ा के अस्वीकार्य स्तर का कारण बनता है।
स्तनधारी रासायनिक सुरक्षा परीक्षण से जुड़े वित्तीय और नैतिक बोझ, साथ ही स्तनधारी अध्ययनों की समय लेने वाली प्रकृति, नए रसायनों के आसपास के डेटा की कमी के लिए प्रमुख योगदान कारक हैं। इस मुद्दे को हल करने के लिए, अमेरिकी पर्यावरण संरक्षण एजेंसी (ईपीए), यूरोपीय रसायन एजेंसी (ईसीएचए), स्वास्थ्य कनाडा और अन्य एजेंसियां उन उपायों को लागू कर रही हैं जो नियामक ढांचे10 में नई दृष्टिकोण पद्धतियों (एनएएम) को शामिल करते हैं, इस प्रकार उत्तरी अमेरिकी और यूरोपीय नीति को जानवरों के उपयोग को बदलने, कम करने और परिष्कृत करने के लिए अंतर्राष्ट्रीय लक्ष्यों के अनुरूप रखते हैं (3 आर प्रिंसिपल)11, 12,13,14. एनएएम में मुख्य रूप से इन विट्रो और सिलिको मॉडल पर आधारित विभिन्न प्रकार के परख शामिल हैं जो स्तनधारी परीक्षण प्रजातियों पर लगाए गए प्रतिकूलपरिस्थितियों को देखने के बजाय रासायनिक विषाक्तता की यंत्रवत समझ प्रदान करते हैं, जिससे रासायनिक जोखिम मूल्यांकन के लिए डेटा उत्पादन की दर बढ़ जाती है, जबकि अभी भी उच्च निष्ठा आउटपुट15 का उत्पादन होता है।. हालांकि, ये विधियां अभी तक प्रणालीगत विषाक्तता से बचाने के लिए साबित नहीं हुई हैं, जिसमें इंटरऑर्गन संचार और अंतःस्रावी सिग्नलिंग से जुड़ी महत्वपूर्ण जैविक प्रक्रियाओं का विघटन शामिल है। इसके अलावा, वे विशिष्ट ऊतकों के भीतर रसायनों के जैव संचय, व्यक्तिगत यौगिकों को अवशोषित और स्रावित करने की क्षमता और व्यवहार और रासायनिक जोखिम के बीच परस्पर क्रिया के लिए जिम्मेदार नहीं हो सकते हैं।
इन विट्रो और कम्प्यूटेशनल मॉडल की सीमाओं के कारण, स्तनधारी मॉडल को कम करने या बदलने के लिए एनएएम के सफल उपयोग में विवो मॉडल में अकशेरुकी भी शामिल होना चाहिए, जैसे कि फ्रूट फ्लाई, ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर। मक्खी में पिछले अध्ययनों से पता चला है कि यह जीव संरक्षित आनुवंशिक मार्गों का अध्ययन करने के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है जो विषाक्त अणुओं 16,17,18,19,20,21,22 के खिलाफ पशु कोशिकाओं की रक्षा करते हैं। इसके अलावा, मक्खी मनुष्यों के लिए उल्लेखनीय आनुवंशिक समानता दिखाती है, जिसमें 65% से अधिक मानव रोगों 23,24,25 के लिए कार्यात्मक होमोलॉग और महत्वपूर्ण कार्यात्मक मार्गों का और भी अधिक संरक्षण शामिल है। ये विशेषताएं, उनके अपेक्षाकृत छोटे जीवन चक्र, कम रखरखाव लागत और आसानी से अवलोकन योग्य व्यवहार प्रतिक्रियाओं के साथ मिलकर, ड्रोसोफिला को एक विष विज्ञान मॉडल27,28,29,30 के रूप में उपयोग के लिए अच्छी तरह से अनुकूल बनाती हैं। इसके अलावा, मक्खियों में कृंतक मॉडल की तुलना में बहुत अधिक थ्रूपुट होता है और चयापचय, शरीर विज्ञान और हार्मोन सिग्नलिंग पर प्रभाव पड़ता है जो अन्य गैर-जीव एनएएम9 द्वारा आसानी से पता लगाने योग्य नहीं होते हैं।
यहां वर्णित प्रोटोकॉल वयस्क ड्रोसोफिला पर रासायनिक जोखिम के प्रभावों के परीक्षण के लिए एक रूपरेखा का प्रतिनिधित्व करता है। विधि को कुशल, सस्ती और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य बनाने के लिए डिज़ाइन किया गया है, जबकि शोधकर्ताओं को परीक्षण रसायन के संपर्क में होना चाहिए और मेटाबोलॉमिक्स और अन्य ओमिक्स दृष्टिकोणों के लिए नमूना संग्रह को समायोजित करना चाहिए। प्रोटोकॉल को प्रति प्रयोग एक एकल रसायन के परीक्षण के लिए अनुकूलित किया गया है, लेकिन आसानी से अन्य प्रयोगात्मक मापदंडों को समायोजित कर सकता है, जैसे कि विभिन्न सॉल्वैंट्स या रसायनों के संयोजन।
फ्रूट फ्लाई ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर एनएएम16,18,19,21 के लिए एक शक्तिशाली प्रणाली के रूप में उभर रहा है। फ्लाई समुदाय के लिए उपलब्ध अद्वितीय आनुवंशिक संसाधनों का लाभ उठाकर, जीनोमिक्स और मेटाबोलॉमिक्स में हालिया प्रगति के साथ मिलकर, ड्रोसोफिला का उपयोग करके रासायनिक सुरक्षा अध्ययन आणविक तंत्र की जल्दी से पहचान करने में सक्षम हैं जिसके द्वारा व्यक्तिगत यौगिक चयापचय, शरीर विज्ञान और सेल सिग्नलिंग में हस्तक्षेप करते हैं (उदाहरण के लिए, देखें39). यह सस्ता प्रोटोकॉल खुराक-प्रतिक्रिया वक्रों को तेजी से परिभाषित करने और बाद में आरएनए-सेक और मेटाबोलॉमिक्स विश्लेषण के लिए नमूने उत्पन्न करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। इसके अलावा, इस लचीले प्रोटोकॉल को किसी भी जीनोटाइप के साथ उपयोग के लिए अनुकूलित किया जा सकता है और रसायनों के कई वर्गों को समायोजित कर सकता है।
इस प्रोटोकॉल का एक उल्लेखनीय पहलू रासायनिक जोखिम में उपयोग किए जाने वाले तरल भोजन की पसंद है, जो पिछले अध्ययन पर आधारित है, लेकिन ड्रोसोफिला18,22 के अधिकांश विषाक्त अध्ययनों द्वारा उपयोग किए जाने वाले ठोस मीडिया से भिन्न है। इस विशिष्ट तरल मीडिया को मानक, ठोस बीडीएससी मीडिया की पोषण सामग्री को प्रतिबिंबित करने के लिए चुना गया था कि मक्खियों को इस प्रोटोकॉल में भी खिलाया जाता है, यह सुनिश्चित करने के लिए कि मक्खियों को लगातार पोषण प्राप्त होता है। तरल फीडिंग मीडिया की सादगी के कई फायदे हैं। तरल मीडिया ठोस भोजन की तुलना में संभालना आसान है, जिसे पाउडर से पिघलाने और पुन: ठोस या पुनर्गठित करने की आवश्यकता होती है। तरल मीडिया भी सिस्टम के थ्रूपुट को बढ़ाता है, पूरे फीडिंग मीडिया में रासायनिक वितरण भी सुनिश्चित करता है, और खतरनाक यौगिकों के साथ काम करने में बिताए गए समय को कम करता है। इसके अतिरिक्त, मीडिया को गर्म करने के लिए समाधान की आवश्यकता नहीं होती है, जो वाष्पशील परीक्षण यौगिकों के परीक्षण की सुविधा प्रदान करता है। अंत में, खाद्य समाधान में शामिल अपेक्षाकृत कुछ घटकों के कारण, परीक्षण रासायनिक और अन्य आहार घटकों के बीच अवांछनीय पक्ष प्रतिक्रियाओं को कम किया जाता है। भोजन में उपयोग किया जाने वाला खमीर भी निष्क्रिय है, जो भोजन माध्यम की प्रतिक्रियाशीलता को और सीमित करता है। हालांकि, कृपया ध्यान दें कि विधि विकास या लार्वा विषाक्तता के परीक्षण के लिए उपयुक्त नहीं है।
प्रोटोकॉल में उपयोग की जाने वाली कुछ सामग्रियों को प्रतिस्थापित किया जा सकता है, जैसे कि पॉलीप्रोपाइलीन के बजाय ग्लास फ्लाई शीशियों का उपयोग करना। हालांकि, उपयोग की जाने वाली सामग्रियों को अभिकर्मकों और रासायनिक जोखिमों के बीच अवांछित रासायनिक प्रतिक्रियाओं से बचने के लिए निष्क्रिय और डिस्पोजेबल दोनों के रूप में चुना गया था जो ग्लासवेयर की सफाई के परिणामस्वरूप हो सकते हैं।
तरल भोजन के उपयोग के लिए खाद्य वितरण के लिए एक वाहन की आवश्यकता होती है। सेल्यूलोज एसीटेट फिल्टर पेपर को इसके लचीलेपन और निष्क्रिय प्रकृतिके कारण इस उद्देश्य के लिए चुना गया था। अन्य शोधकर्ताओं ने इसी तरह के प्रोटोकॉल का उपयोग किया, लेकिन अन्य वाहनों के साथ, जैसे कि नाजुक टास्क वाइप्स या ग्लास फाइबर फिल्टर29,30। सेल्यूलोज एसीटेट फिल्टर पेपर इन आवश्यकताओं के अनुकूल है क्योंकि यह एक निष्क्रिय वाहन है जिसे कागज और शीशी की दीवार के बीच बड़े अंतराल के बिना फ्लाई शीशियों के तल में फिट करने के लिए आदर्श आकार में काटा जा सकता है, जिससे मक्खियों के मीडिया या वाहन में फंसने के कारण होने वाली मृत्यु को रोका जा सकता है।
इस प्रणाली की एक महत्वपूर्ण सीमा यह है कि एक रसायन की अधिकतम परीक्षण योग्य एकाग्रता रसायन की घुलनशीलता से बंधी होती है। गैर-पानी में घुलनशील यौगिकों को एक अतिरिक्त विलायक की आवश्यकता होती है, जिससे रुचि के रसायन के साथ अतिरिक्त या सहक्रियात्मक प्रभाव हो सकते हैं। यह ऐसी परिस्थितियां भी पैदा कर सकता है जिसमें स्टॉक समाधान तैयार करना संभव नहीं है जो सभी जीवों में वांछित समापन बिंदु प्राप्त करने के लिए पर्याप्त केंद्रित हैं, इसलिए परिणामी डेटा31 के विश्लेषण को सीमित करते हैं। इसे संबोधित करने के लिए, कम पानी की घुलनशीलता वाले रसायनों को खाद्य समाधान में 0.5% डाइमिथाइल सल्फोक्साइड जोड़कर परीक्षण किया जा सकता है। अन्य सॉल्वैंट्स का भी उपयोग किया जा सकता है, लेकिन जीव पर विलायक प्रभाव को कम करते हुए घुलनशीलता को अधिकतम करने के लिए समाधान के भीतर अधिकतम स्वीकार्य विलायक एकाग्रता निर्धारित करने के लिए ब्याज के प्रत्येक विलायक के लिए अतिरिक्त शोध की आवश्यकता होती है।
ड्रोसोफिला में ओल्फेशन प्रतिक्रिया के व्यापक लक्षण वर्णन ने वर्णन किया है कि मक्खियां विषाक्त यौगिकों40,41 का सेवन करने से कैसे बचती हैं, जिससे उपचारित मीडिया पर भोजन कम हो जाता है। ब्लू डाई परख शोधकर्ताओं को प्रयोगात्मक रसायन42,43,44 की प्रत्येक एकाग्रता को खिलाए गए मक्खियों के भोजन व्यवहार को कुशलतापूर्वक स्क्रीन करने की अनुमति देकर इस घटना को संबोधित करती है। मक्खी के जठरांत्र संबंधी मार्ग में नीले रंग की उपस्थिति या अनुपस्थिति इंगित करती है कि क्या मक्खी विषाक्त युक्त माध्यम खा रही है। यद्यपि फ्लाई फीडिंग व्यवहार का आकलन करने के अधिक परिष्कृत तरीके मौजूद हैं, जैसे कि फ्लाई लिक्विड-फूड इंटरैक्शन काउंटर45, यह गुणात्मक विधि उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंग के लिए बेहतर अनुकूल है।
इस प्रोटोकॉल का एक उल्लेखनीय पहलू यह है कि इसे मक्खियों को स्थानांतरित करने या एक्सपोज़र शीशी में अतिरिक्त तरल जोड़ने की आवश्यकता के बिना 48 घंटे की एक्सपोज़र अवधि के लिए अनुकूलित किया गया है। आर्द्रता कक्ष का उपयोग करना और कक्षों को उच्च आर्द्रता पर रखे गए इनक्यूबेटर में रखने से इस समय सीमा के दौरान फीडिंग मीडिया वाले फिल्टर पेपर को सूखने से रोका जा सकता है। प्रोटोकॉल को लंबे समय तक एक्सपोजर अवधि के लिए अनुकूलित किया जा सकता है, लेकिन विधि को यह सुनिश्चित करने के लिए समायोजित किया जाना चाहिए कि फ़िल्टर पेपर सूखा न हो और निर्जलीकरण के कारण समाधान एकाग्रता या घातकता में महत्वपूर्ण परिवर्तन न हो।
अंत में, इस प्रोटोकॉल की एक महत्वपूर्ण विशेषता यह है कि यह आनुवंशिक वेरिएंट को आसानी से समायोजित कर सकता है, जो शोधकर्ताओं को ड्रोसोफिला के लिए आनुवंशिक उपकरणों की विशाल सरणी का उपयोग करने की अनुमति देता है ताकि विवो में रासायनिक कार्रवाई के तंत्र को बेहतर ढंग से समझने के लिए जंगली प्रकार के जीवों पर इन प्रारंभिक अध्ययनों का विस्तार किया जा सके। इस संबंध में, ऊपर उल्लिखित प्रोटोकॉल को पीटरसन और लॉन्ग द्वारा पहले वर्णित जोव प्रोटोकॉल के पूरक के लिए आसानी से संशोधित किया जा सकता है जो जंगली-पकड़े गएमक्खियों के विषाक्त विश्लेषण की अनुमति देता है।
ड्रोसोफिला 32,33,34,35,36 में सोडियम आर्सेनाइट की विषाक्तता पर पिछले अध्ययनों की विस्तृत विविधता के कारण, ओरेगन-आर मक्खियों को हमारे सिस्टम की प्रभावकारिता का प्रदर्शन करने के लिए इस यौगिक के साथ इलाज किया गया था। नर मक्खियों ने 0.65 एमएम के एलडी 50 का प्रदर्शन किया, और महिलाओं ने 0.90 एमएम के एलडी50 का प्रदर्शन किया। यह सोडियम आर्सेनाइट-उपचारित वयस्क ड्रोसोफिला के पिछले अध्ययनों के साथ संरेखित है। उदाहरण के लिए, गोल्डस्टीन और बाबिच37 ने पाया कि 50% मक्खियों (मिश्रित लिंग) की मृत्यु 0.5 एमएम एनएएएसओ2 के संपर्क में आने के 7 दिनों के बाद हुई। यद्यपि यह वर्तमान में देखी गई तुलना में थोड़ा कम खुराक है, उनके तरीकों और इस विधि (ठोस जोखिम मीडिया, लंबे समय के पैमाने और मिश्रित लिंगों के उपयोग सहित) के बीच अंतर संभवतः इस अंतर के लिए जिम्मेदार है। महत्वपूर्ण रूप से, दोनों विधियों के परिणामस्वरूप समग्र समान एलडी50 मान थे।
इस प्रोटोकॉल का उपयोग करने वाले प्रयोगों के अवलोकन का उपयोग बाद के व्यवहार या यांत्रिक अध्ययनों के लिए आनुवंशिक और आणविक लक्ष्यों को खोजने के लिए किया जा सकता है। एक्सपोजर विधि का उपयोग मेटाबोलॉमिक्स और प्रोटिओमिक्स के नमूने के लिए ड्रोसोफिला के इलाज के लिए भी किया जा सकता है, जिससे यह प्रोटोकॉल सटीक विष विज्ञान के बढ़ते क्षेत्र (सटीक चिकित्सा क्षेत्र46 से मॉडलिंग) के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है। इस संबंध में, बाद के जीनोमिक और मेटाबोलॉमिक्स विश्लेषण के लिए चरण 8 के बाद उजागर मक्खियों को एकत्र किया जा सकता है। चरण 8 में एकत्र किए गए नमूने तब संसाधित किए जा सकते हैं, जैसा कि ली और टेनेसेन47 द्वारा वर्णित है, चरण 3 से शुरू होता है।
अंततः, ऊपर वर्णित प्रयोगों से प्राप्त डेटा, साथ ही साथ किसी भी बाद के मेटाबोलॉमिक्स और प्रोटिओमिक्स डेटा का उपयोग आदर्श रूप से क्रॉस-प्रजाति तुलना में किया जाएगा। जैसा कि पहले उल्लेख किया गयाहै, इस तरह के क्रॉस-प्रजाति अध्ययन शक्तिशाली हैं और यह निर्धारित करने में सक्षम हैं कि व्यक्तिगत रसायन संरक्षित जैविक मार्गों में कैसे हस्तक्षेप करते हैं। इस प्रकार, ऊपर वर्णित प्रोटोकॉल का उपयोग फ़ाइला में व्यक्तिगत विषाक्त पदार्थों के जवाब में विकासवादी समानताओं को खोजने और रासायनिक सुरक्षा विनियमन को सूचित करने में मदद करने के लिए किया जा सकता है।
The authors have nothing to disclose.
हम इस प्रोटोकॉल के परीक्षण और अनुकूलन में मदद के लिए अपने कर्मचारियों को धन्यवाद देते हैं: अमेया बेलमकर, मर्लिन क्लार्क, अलेक्जेंडर फिट, एम्मा रोज गैलेंट, एथन गोल्डिच, मैथ्यू लोव, मॉर्गन मार्श, काइल मैकक्लंग, एंडी पुगा, डार्सी रोज, कैमरन स्टॉकब्रिज और नोएल ज़ोलमैन। प्रोटोकॉल के लक्ष्यों की पहचान करने में मदद करने के लिए हम प्रेसिजन टॉक्सिकोलॉजी ग्रुप के अपने सहयोगियों, विशेष रूप से हमारे एक्सपोज़र ग्रुप समकक्षों को भी धन्यवाद देते हैं।
इस परियोजना को अनुदान समझौते संख्या 965406 के तहत यूरोपीय संघ के क्षितिज 2020 अनुसंधान और नवाचार कार्यक्रम से धन प्राप्त हुआ। इस प्रकाशन में प्रस्तुत कार्य ASPIS क्लस्टर के भाग के रूप में किया गया था। यह आउटपुट केवल लेखकों के विचारों को दर्शाता है, और यूरोपीय संघ को किसी भी उपयोग के लिए जिम्मेदार नहीं ठहराया जा सकता है जो इसमें निहित जानकारी से बना हो सकता है। यह प्रकाशन इंडियाना क्लिनिकल एंड ट्रांसलेशनल साइंसेज इंस्टीट्यूट के समर्थन से भी संभव हो गया था, जिसे नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ हेल्थ, नेशनल सेंटर फॉर एडवांसिंग ट्रांसलेशनल साइंसेज, क्लिनिकल एंड ट्रांसलेशनल साइंसेज अवार्ड से अवार्ड नंबर UL1TR002529 द्वारा वित्त पोषित किया जाता है। सामग्री पूरी तरह से लेखकों की जिम्मेदारी है और जरूरी नहीं कि राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के आधिकारिक विचारों का प्रतिनिधित्व करती हो। इस परियोजना के कुछ हिस्सों को जेआरएस और फाइलोटॉक्स कंसोर्टियम को सम्मानित इंडियाना विश्वविद्यालय से धन द्वारा समर्थित किया गया था। जेएमएच और ईएमपी को ब्लूमिंगटन ड्रोसोफिला स्टॉक सेंटर को एनआईएच पुरस्कार P40OD018537 द्वारा समर्थित किया गया था।
1.5 inch flower lever action craft punch | Bira Craft | HCP-115-024 | |
15 mL Centrifuge Tubes | VWR | 89039-666 | High-Performance Centrifuge Tubes with Flat or Plug Caps, Polypropylene, 15 mL |
2 ml Tubes | VWR | 16466-044 | Micro Centrifuge Tube with Flat Screw-Cap, conical bottom |
5 ml Tubes | VWR | 60818-576 | Culture Tubes, Plastic, with Dual-Position Caps |
50 mL Centrifuge Tubes | Corning | 430290 | 50 mL polypropylene centrifuge tubes, conical bottom with plug seal cap |
Benchmark Dose Software version 3.2 | U.S. Environmental Protection Agency | ||
Cardboard trays | Genesee Scientific flystuff | 32-122 | trays and dividers for narrow vials |
CO2 gas pads | Genesee Scientific flystuff | 59-114 | FlyStuff flypad, CO2 anesthetizing apparatus |
Combitips advanced, 50 mL | Eppendorf | 0030089693 | Combitips advanced, Biopur, 50 mL, light gray, colorless tips |
Cotton balls | Genesee Scientific flystuff | 51-101 | Cotton balls, large, fits narrow vials |
Delicate task wipes | Kimtech | 34155 | Kimtech Science Kimwipes Delicate Task Wipes, 1 Ply / 8.2" x 4.39" |
Drosophila Vial Plugs, Cellulose Acetate (aka, Flugs) | VWR | 89168-888 | Wide |
FD&C Blue No. 1 | Spectrum Chemical | FD110 | CAS number 3844-45-9 |
Flies | BDSC | Stock #2057 | OregonR wildtype |
Gloves (nitrile) | Kimtech | 55082/55081/55083 | Kimtech purple nitrile exam gloves, 5.9 mil, ambidextrous 9.5" |
Grade 1 CHR cellulose chromatography paper | Cytvia | 3001-917 | Sheet, 46 x 57 cm |
Mesh for humidity chamber | |||
Multipette / Repeater (X) stream | Eppendorf | 022460811 | Repeater Xstream |
Plastic grate | Plaskolite | 18469 (from lowes) | Plaskolite 24 in x 48 in 7.85 sq ft louvered ceiling light panels, cut down to fit in rubbermaid tubs |
Plastic trays for glass vials | Genesee Scientific flystuff | 59-207 | Narrow fly vial reload tray |
Polypropylene Drosophila Vial | VWR | 75813-156 | Wide (28.5 mm) |
Rubbermaid tubs | Rubbermaid | 3769017 (from Lowes) | Rubbermaid Roughneck Tote 10 gallon 18" L x 12" W x 8 1/2" H |
Sucrose ultra pure | MP Biomedicals, Inc. | 821721 | |
Tube racks for wide-mouthed tubes | Thermo scientific | 5970-0230 | Nalgene Unwire Test tube racks, for 30 mm tubes |
Water Purification System | Millipore Milli-Q | ZMQ560F01 | Millipore Milli-Q Biocel Water Purifier |
Yeast extract | Acros Organics | 451120050 | CAS number 84604-16-0 |