Два протокола абляции глазных стебельков (т.е. прижигание и хирургическое вмешательство) были выполнены на анестезированных самках крабов. Абляция глазного стебля грязевых крабов ускорила созревание яичников без снижения выживаемости.
Грязевые крабы (Scylla spp.) являются коммерчески важными видами ракообразных, которые можно найти по всему Индо-Западному Тихоокеанскому региону. Во время культивирования индукция созревания яичников важна для удовлетворения потребительского спроса на зрелых грязевых крабов и ускорения производства семян. Абляция глазного стебля является эффективным инструментом для ускорения созревания яичников у грязевых крабов. Тем не менее, не существует стандартного протокола для абляции глазного стебля грязевых крабов. В этом исследовании описаны два метода абляции глазных стебельков: прижигание (использование горячего металла для удаления глазного стебля анестезированного краба) и хирургическое вмешательство (удаление глазного стебля с помощью хирургических ножниц). Перед абляцией глазного стебля половозрелые самки (CW > 86 мм) были анестезированы с помощью пакета со льдом (-20 ° C) с морской водой. Когда температура воды достигала 4 °C, мешок со льдом вынимали из воды. Проточная морская вода (температура окружающей среды: 28 °C) использовалась для восстановления после анестезии сразу после абляции глазного стебля. Смертность не наступала ни во время, ни после процесса абляции глазных стебельков. Представленный здесь протокол абляции глазных стебельков ускорил созревание яичников грязевых крабов.
Все четыре вида грязевых крабов, принадлежащие к роду Scylla, являются коммерчески важными видами ракообразных в аквакультуре 1,2. Рост ракообразных, в том числе грязевых крабов, и их трансформация из преждевременной (субвзрослой или пубертатной) фазы в половозрелую (взрослую) фазу происходят в процессе линьки, который включает периодическое сбрасывание старых и меньших экзоскелетов. Ширина панциря (CW), хелипеды и морфология брюшного лоскута широко используются для определения половой зрелости Scylla spp. 3,4,5. Процесс линьки регулируется действием различных гормонов и требует огромного количестваэнергии6. В дополнение к нормальному процессу линьки, потеря конечностей, добровольно или вызванная внешними факторами, ускоряет линьку крабов, не влияя на их выживаемость 7,8,9. Поэтому аутотомия конечностей обычно используется для индукции линьки в индустрии разведения грязевых крабовс мягким панцирем 7,9.
Односторонняя или двусторонняя абляция глазного стебля в основном популярна у пресноводных креветок и морских креветок для созревания гонад и производства семян 10,11,12,13. Распространенные методы абляции глазного стебля у ракообразных включают следующее: (i) лигирование у основания глазного стебля с использованием нити14,15; (ii) прижигание глазного стебля с помощью горячих щипцов или электрокоагуляционных устройств16; (iii) удаление или прямое защемление глазного стебля, чтобы оставить открытую рану12; и (iv) удаление содержимого глазного стебля через разрез после разрезания дистальной части глаза бритвой17. Х-органы глазного стебля являются важными эндокринными органами у ракообразных, поскольку они регулируют гипергликемические гормоны ракообразных (CHH), гормоны, ингибирующие линьку (MIH), и гормоны, ингибирующие вителлогенез (VIH)6,18,19,20,21,22. Х-органы глазного стебля (или комплекс синусовых желез) синтезируют и высвобождают гормоны, ингибирующие гонады (GIH), также известные как гормоны, ингибирующие вителлогенез (VIH), принадлежащие к семейству нейропептидных гормонов6. Односторонняя или двусторонняя абляция глазных стебельков снижает синтез GIH, что приводит к доминированию стимулирующих гормонов (т.е. гонадстимулирующих гормонов, GSH) и ускорению процесса созревания яичников у ракообразных23,24,25,26. Без влияния ГИГ после абляции глазных стебельков самки ракообразных посвящают свою энергию развитию яичников27. Было обнаружено, что односторонняя абляция глазных стебельков достаточна для индукции созревания яичников у ракообразных11 и что абляция глазного стебля креветок и крабов может восстанавливаться после нескольких линьк28. У Scylla spp. зарегистрировано четыре стадии развития яичников: i) незрелая (стадия-1), ii) раннеспелая (стадия-2), iii) предзрелая (стадия-3) и iv) полностью зрелая (стадия-4)29,30. Незрелая стадия яичников встречается у неполовозрелых самок. После пубертатной линьки и спаривания незрелая завязь начинает развиваться и, наконец, созревает (стадия-4) до нереста31.
Протокол абляции глазного стебля необходим для развития маточного стада грязевых крабов и производства семян. На мировом продовольственном рынке потребители предпочитают зрелых грязевых крабов с полностью зрелыми яичниками (стадия 4), а не крабов с более высоким содержанием мышц и, таким образом, имеют более высокую коммерческую ценность, даже выше, чем крупные самцы. Не существует полного протокола абляции глазного стебля грязевых крабов. Протокол абляции глазных стебельков в этой работе сводит к минимуму стресс за счет использования полностью анестезированных крабов и сводит к минимуму физические травмы персонала от укусов крабов. Этот протокол прост и экономичен. Здесь мы представляем протокол абляции глазных стебельков Scylla spp., который может вызвать созревание гонады. Были протестированы два метода абляции глазных стекол (прижигание и хирургическое вмешательство), и их эффективность сравнивалась на основе скорости развития гонад самок грязевых крабов.
Этот протокол был разработан для абляции глазного стебля грязевого краба Scylla spp. и может применяться в качестве эффективного метода для стимуляции созревания гонад. Этот протокол может быть легко воспроизведен для коммерческого созревания яичников грязевых крабов и может быть ре…
The authors have nothing to disclose.
Это исследование было поддержано Министерством образования Малайзии в рамках программы Центра передового опыта высших учебных заведений (HICoE), Малайзия, аккредитованной при Институте тропической аквакультуры и рыболовства, Университет Малайзии Теренггану (Vot No 63933 и Vot No 56048). Мы выражаем признательность за поддержку Universiti Malaysia Terengganu и Sayap Jaya Sdn. Bhd. в рамках исследовательского гранта частного партнерства (Vot. No 55377). Также признана должность адъюнкт-научного сотрудника Университета Сайнс Малайзии для Хор Вайхо и Ханафии Фажан.
Aeration tube | Ming Yu Three | N/A | aquarium and pet shop |
Airstone | Ming Yu Three | N/A | aquarium and pet shop |
Autoclave machine | HIRAYAMA MANUFACTURING CORPORATION | N/A | MADE IN JAPAN |
Bleaching powder (Hi-Chlon 70%) | Nippon Soda Co.Ltd,Japan | N/A | N/A |
Blow torch | MR D.I.Y. Group Berhad | N/A | N/A |
Circular tank (32L) | BEST PLASTIC INDUSTRY SDN. BHD. | N/A | N/A |
Cotton hand gloves (thick) | MR D.I.Y. Group Berhad | N/A | N/A |
Cotton towel | MR D.I.Y. Group Berhad | N/A | N/A |
Digital thermometer | Hanna Instrument | HI9814 | Hanna Instruments GroLine Hydroponics Waterproof pH / EC / TDS / Temp. Portable Meter HI9814 |
Digital Vernier Caliper | INSIZE Co., Ltd. | N/A | |
Dissecting tray | Hatcheri AKUATROP | N/A | Research Center of Universiti Malaysia Terengganu |
Dropper bottle/Plastic Pipettes Dropper | Shopee Malaysia | N/A | N/A |
Ethanol 70% | Thermo Scientific Chemicals | 033361.M1 | Diluted to 70% using double distilled water |
Fiberglass tank (1 ton) | Hatcheri AKUATROP | N/A | Research Center of Universiti Malaysia Terengganu |
Fine sand | N/A | N/A | collected from Sea beach of Universiti Malaysia Terengganu |
First Aid Kits | Watsons Malaysia | N/A | N/A |
Flat head nickel steel metal rod (Screw driver) | MR D.I.Y. Group Berhad | N/A | N/A |
Formaldehyde | Thermo Scientific Chemicals | 119690010 | |
Gas cylinder (butane gas) for blow torch | MR D.I.Y. Group Berhad | N/A | N/A |
Gas lighter gun (long head) | MR D.I.Y. Group Berhad | N/A | N/A |
Glass beaker (100 mL)) | Corning Life Sciences | 1000-100 | |
Ice bag | Watsons Malaysia | N/A | N/A |
Perforated plastic baskets | Eco-Shop Marketing Sdn. Bhd. | N/A | N/A |
PVC pipe 15mm | Bina Plastic Industries Sdn Bhd (HQ) | N/A | N/A |
Refractometer | ATAGO CO.,LTD. | ||
Refrigerator | Sharp Corporation Japan | N/A | Chest Freezer SHARP 110L – SJC 118 |
Scoop net | MR D.I.Y. Group Berhad | N/A | |
Seawater | Hatcheri AKUATROP | N/A | Research Center of Universiti Malaysia Terengganu |
Siphoning pipe | MR D.I.Y. Group Berhad | N/A | N/A |
Spray bottle | Mr. DIY Sdn Bhd | N/A | N/A |
Stainless surgical forceps | N/A | N/A | N/A |
Stainless surgical scissors | N/A | N/A | N/A |
Submersible water pump | AS | N/A | model: Astro 4000 |
Tincture of iodine solution (Povidone Iodine) | Farmasi Fajr Sdn Bhd | N/A | N/A |
Tissue paper | N/A | N/A | |
Transparent plastic aquarium | Ming Yu Three | N/A | aquarium and pet shop |
Waterproof table | Hatcheri AKUATROP | N/A | Research Center of Universiti Malaysia Terengganu |